摘要: 【目的】本研究旨在探究麦长管蚜Sitobion avenae唾液铁蛋白SaFer1在取食过程中的功能，明确其对蚜虫-植物互作的影响。【方法】以麦长管蚜唾液腺转录组数据为基础，克隆麦长管蚜SaFer1的cDNA全长序列，进行生物信息学分析；利用RT-qPCR检测SaFer1在不同发育阶段(1-4龄若蚜和无翅成蚜)、1日龄无翅成蚜不同组织(头、胸部、腹部、唾液腺、中肠和胚胎)、不同翅型(无翅和有翅)成蚜及取食不同食料(小麦和人工饲料)的1-4龄若蚜和无翅成蚜中的表达量；利用本氏烟Nicotiana benthamiana瞬时表达系统，在本氏烟叶片中通过根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导SaFer1及Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, BAX)的表达，观察叶片坏死症状，分析SaFer1蛋白功能，并在激光共聚焦显微镜下观察SaFer1的亚细胞定位；利用酵母分泌系统验证SaFer1信号肽功能；通过RNAi沉默无翅成蚜中的SaFer1,计算存活率和日均产蚜量，利用昆虫刺探电位(electrical penetration graph, EPG)仪检测无翅成蚜对小麦的取食行为参数；利用RT-qPCR检测SaFer1被RNAi后麦长管蚜取食3 d时小麦叶片中防御相关基因(ROS相关基因NOX和SOD、水杨酸通路相关基因PAL及茉莉酸通路相关基因AOS和FAD7)的表达量。【结果】克隆的麦长管蚜SaFer1(GenBank登录号：PP760384)cDNA全长1 212 bp, ORF全长675 bp,编码224个氨基酸残基，蛋白质相对分子质量为25.5 kD,等电点为6.20,N端具有1个信号肽，该蛋白与大戟长管蚜Macrosiphum euphorbiae中未命名蛋白(GenBank登录号：CAI6358877.1)氨基酸序列一致性最高(98.61%)。RT-qPCR结果显示，SaFer1在麦长管蚜各发育阶段均有表达，属于组成型表达基因，并在无翅成蚜中肠和唾液腺中高表达。SaFer1能够抑制由BAX诱导产生的本氏烟叶片坏死现象；SaFer1定位于本氏烟叶片细胞膜与细胞核上；SaFer1信号肽具有分泌活性。与对照组(dsGFP)相比，沉默SaFer1后麦长管蚜存活率无显著变化，日均产蚜量显著降低，取食过程中E1波时长显著降低，F波及G波时长显著增加，小麦叶片中NOX,SOD,PAL,AOS和FAD7的表达量显著上调。【结论】麦长管蚜唾液铁蛋白SaFer1属于效应蛋白，在麦长管蚜与寄主植物互作中能通过抑制寄主的防御反应来帮助该蚜虫取食，提高该蚜虫适合度，在蚜虫-寄主互作中发挥重要作用。

摘要: 【目的】构建高效“菌-生物炭-黑水虻Hermetia illucens互作”转化体系，探究基质配比、黑水虻幼虫接入密度、生物炭、功能微生物等因素组合策略对黑水虻转化金霉素菌渣体系的影响。【方法】黑水虻幼虫由麦麸饲养至3龄后，分别设置不同质量配比的金霉素菌渣与小麦秸秆接入比(菌渣∶秸秆=0∶1, 1∶2, 1∶4, 1∶8, 1∶12和1∶20)、幼虫密度(幼虫数量：物料质量=0.6∶1, 0.8∶1, 1∶1, 2∶1, 4∶1, 6∶1, 8∶1和10∶1)、生物炭接入量(0, 30, 60, 90, 120, 150和180 g/kg)、功能菌(斯氏普罗威登斯菌Providencia stuartii TX2、肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae TX1、贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis EEAM 10B)以及混合添加组别，测定不同组别中黑水虻幼虫的生长发育标(体重、体长和体宽),基质转化指标(基质消耗率和基质转化率)及基质中的金霉素去除率。【结果】在最优“菌-生物炭-黑水虻互作”菌渣转化体系下，即菌渣∶秸秆为1∶4、幼虫密度为4∶1、生物炭添加比例为120 g/kg、存在斯氏普罗威登斯菌TX2时，幼虫的体重、体长、体宽分别达到0.17 g/头、18.27 mm和4.83 mm,基质消耗率和基质转化率分别达到34.04%和29.50%,同时基质中的金霉素去除率提高至96.23%。【结论】通过构建“菌-生物炭-黑水虻互作”高效抗生素菌渣生物转化体系，将两种有机固废物转化成高值昆虫蛋白，同时提高了基质中金霉素去除率。

摘要: 【目的】本研究旨在探究毒死蜱对白背飞虱Sogatella furcifera的亚致死效应，为合理使用杀虫剂防治白背飞虱提供理论依据。【方法】采用稻茎浸渍法分别以LC₁₀浓度（1.5 mg/L）和LC₂₅浓度（2.9 mg/L）毒死蜱处理白背飞虱3龄若虫，测定F₀代雌成虫寿命、成虫羽化率和单雌产卵量，组建F₁代年龄-龄期两性生命表来分析其发育历期、繁殖力和存活率的变化，采用RT-qPCR测定其F₀代雌成虫体内生殖相关基因（SfRheb,SfTOR,SfS6K,SfHMGR,SfIPPI,SfFPPS1,SfFPPS2,SfJHAMT,SfFAMeT,SfMet,SfKrh1和SfVg）的相对表达量。【结果】LC₁₀和LC₂₅浓度毒死蜱处理组白背飞虱F₀代成虫单雌产卵量较对照组（蒸馏水处理）显著降低，且LC₂₅浓度毒死蜱处理组F₀代成虫羽化率和雌成虫寿命均显著低于对照组的。LC₁₀和LC₂₅浓度毒死蜱处理组F₁代成虫平均单雌产卵量分别为191.4和169.9粒，均显著低于对照组的（230.6粒）; LC₂₅浓度毒死蜱胁迫白背飞虱3龄若虫较对照组能显著缩短其F₁代雌成虫历期且降低F₁代存活率。此外，LC₁₀和LC₂₅浓度毒死蜱处理白背飞虱3龄若虫能够抑制其F₀代雌成虫中保幼激素（juvenile hormone, JH）相关信号通路基因（SfFAMeT,SfFPPS1,SfFPPS2和SfKrh1）、TOR相关信号通路基因（SfRheb和SfTOR）和SfVg的表达。【结论】亚致死浓度毒死蜱胁迫会抑制白背飞虱的生长发育、存活率和繁殖力，从而在一定程度上抑制白背飞虱后代种群的增长，并且还能够抑制TOR和JH信号通路中相关基因的表达。这些发现不仅可为田间科学防治白背飞虱提供理论依据，同时为理解杀虫剂调控昆虫生殖的分子机制打下基础。

摘要: 【目的】明确韭菜迟眼蕈蚊Bradysia odoriphaga对10种杀虫剂的抗性现状及对灭蝇胺的抗性风险和灭蝇胺对韭菜迟眼蕈蚊的亚致死效应。【方法】采用胃毒触杀联合毒力法测定了5类（新烟碱类、拟除虫菊酯类、吡咯类、昆虫生长调节剂类和有机磷类）共10种杀虫剂对河南省濮阳市、安徽省亳州市、河北省唐山市及山东省济宁市4个地区韭菜迟眼蕈蚊2龄幼虫的毒力，用亚致死浓度(LC₁₅和LC₃₀)灭蝇胺处理韭菜迟眼蕈蚊观察对其幼虫历期、化蛹率、羽化率及单雌产卵量等指标的影响，评估了韭菜迟眼蕈蚊对灭蝇胺的抗性风险，并通过Tabashnik域性状分析法计算抗性现实遗传力（realized heritability,h²）和基于选择数据预测不同选择压力下的抗性发展速率。【结果】监测数据表明，韭菜迟眼蕈蚊田间种群对灭蝇胺、氟啶脲、氟铃脲和吡丙醚处于敏感至低水平抗性，对辛硫磷产生低至中等水平抗性，对高效氯氰菊酯处于低水平抗性，对吡虫啉、噻虫嗪和噻虫胺处于敏感或低至中等水平抗性。当抗性现实遗传力（h²）为0.073,在不同的选择压力下（死亡率分别为50%, 60%, 70%, 80%和90%）,韭菜迟眼蕈蚊对灭蝇胺的抗性上升至10倍分别需要25.2, 20.7, 17.2, 14.4和11.4代；采用LC₁₅和LC₃₀浓度灭蝇胺处理韭菜迟眼蕈蚊2龄幼虫后，F₀和F₁代的羽化率和单雌产卵量显著降低。【结论】韭菜迟眼蕈蚊对灭蝇胺具有较低的抗性风险，亚致死浓度灭蝇胺显著抑制韭菜迟眼蕈蚊的化蛹率、羽化率及单雌产卵量。

摘要: 番茄是重要的园艺作物，同时我国是世界上最大的番茄生产国。近年来，番茄产业面临着日益严峻的虫害威胁，包括传统重要害虫烟粉虱Bemisi tabaci、西花蓟马Frankliniella occidentalis和棉铃虫Helicoverpa armigera及新出现的入侵害虫番茄潜叶蛾Tuta absoluta。解析番茄应答虫害的防御机制，尤其是具有高抗虫特性的野生番茄种质资源的抗虫机制，可以为番茄抗虫品种培育提供重要的基因资源，同时关键的抗虫代谢物也可以指导更安全和生态友好的植物源新型绿色农药的开发。本文从植物抗虫的各个层次综述了番茄害虫与番茄等寄主植物之间的互作关系，主要包括：(1)刺吸式和咀嚼式昆虫唾液蛋白被番茄识别及对抗虫免疫的影响；(2)番茄抗虫防御信号转导网络和核心防御相关转录因子的调控机制；(3)植物抗虫性实现的结构和代谢机制，包括毛状体、酰基糖、酚胺、甾体生物碱和挥发性物质等应答虫害并发挥抗虫作用的分子和生态学机制。未来研究应利用单细胞转录组和空间转录组等新技术，结合基因编辑遗传操纵手段，进一步厘清番茄抗虫信号通路和防御物质的合成与调控过程，从而更好地理解植物与昆虫之间的互作关系，为培育高产番茄抗虫品种奠定理论基础。

摘要: 【目的】本研究旨在探究意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica去甲基化酶AmALKBH基因对生长发育过程和mRNA甲基化的潜在调控作用，为深入开展AmALKBH的功能研究提供新理论基础和参考。【方法】使用多种软件对5个AmALKBH基因（AmALKBH1,AmALKBH4,AmALKBH6,AmALKBH7及AmALKBH8）进行生物信息学分析，并进行多物种间的同源序列比对和系统进化树构建。利用qRT-PCR检测5个AmALKBH基因（AmALKBH1,AmALKBH4,AmALKBH6,AmALKBH7及AmALKBH8）在意大利蜜蜂不同发育阶段（卵、幼虫和蛹）,1, 7和18日龄成年工蜂脑中以及1日龄成年工蜂不同组织（触角、脑、咽下腺、蜜囊、中肠、回肠、直肠、脂肪体和毒腺）中的表达量。同时利用高效液相色谱三重四级杆串联质谱（high performance liquid chromatography tandem triple quadrupole mass spectrometry, HPLC-QqQ-MS/MS）检测意大利蜜蜂以上不同发育阶段以及1, 7和18日龄成年工蜂脑样品中mRNA m⁶A甲基化的水平。【结果】意大利蜜蜂的5个AmALKBH基因（AmALKBH1,AmALKBH4,AmALKBH6,AmALKBH7和AmALKBH8）分别编码311, 297, 229, 228和585个氨基酸，具有共同的保守基序和结构域，均为亲水性的球形蛋白，5个AmALKBH蛋白之间的理化性质存在差异。意大利蜜蜂的5个AmALKBHs与黑腹果蝇Drosophila melanogaster、智人Homo sapiens、家鼠Mus musculus、拟南芥Arabidopsis thaliana以及大肠杆菌Escherichia coli的ALKBH氨基酸序列一致性为12.92%～46.46%,与东方蜜蜂A.cerana、黄脚胡蜂Vespa velutina和欧洲熊蜂Bombus terrestris的ALKBH亲缘关系最紧密。随着卵期的胚胎发育进程，AmALKBH4和AmALKBH7的表达量逐渐降低，而AmALKBH6的表达量逐渐增高，AmALKBH8的表达量在卵中期（产卵后36 h）最高而后下降，AmALKBH1不表达；在幼虫期和蛹期，5个AmALKBH基因的表达量随发育进程逐渐提高，在褐眼白蛹和褐眼浅色蛹时达到峰值，在羽化出房前有所下降；5个AmALKBH基因均显示出在意大利蜜蜂1日龄成年工蜂触角和脑中高表达；1日龄成年工蜂脑中AmALKBH6,AmALKBH7和AmALKBH8的表达量均显著低于7和18日龄成年工蜂中的。mRNA m⁶A甲基化水平从卵前期到卵中期明显降低，在卵后期（产卵后60 h）显著提高；幼虫和蛹期mRNA m⁶A甲基化水平呈现与基因表达量相似的变化趋势，不同的是在粉眼白蛹时就较早地出现峰值，而mRNA m⁶A甲基化水平在1日龄成年工蜂脑中最高，在7和18日龄成虫年工蜂脑中降低。【结论】研究结果显示出ALKBH基因家族在各物种间的高度保守性，意大利蜜蜂的5个AmALKBH基因之间在序列特征、蛋白结构和表达模式上均存在差异，预示其各自具有功能特点。AmALKBH基因表达量和mRNA m⁶A甲基化水平均随发育阶段出现动态变化，且二者之间存在一定关联，表明AmALKBH基因对意大利蜜蜂生长发育具有潜在调控作用。以上研究结果为揭示AmALKBH基因调控生长发育的分子机制打下良好基础，为进一步提升蜜蜂在基础研究和授粉应用中的价值提供全新理论依据。

摘要: 【目的】探究乳杆菌Lactobacillus对家蚕Bombyx mori抗菌肽基因转录水平的影响。【方法】用2×10～8 CFU/mL植物乳杆菌Lactobacillus plantarum FLPL028、鼠李糖乳杆菌L.rhamnosus FLRH956和罗伊氏乳杆菌L.reuteri FLRE589悬液喷涂桑叶（20μL/cm²）饲喂家蚕1龄幼虫，对5龄幼虫进行RNAref转录组测序并用2×10～6 CFU/mL的黏质沙雷氏菌Serratia marcescens悬液喷涂桑叶（20μL/cm²）饲喂，计算家蚕结茧前死亡率；将植物乳杆菌FLPL028、鼠李糖乳杆菌FLRH956和罗伊氏乳杆菌FLRE589分别与黏质沙雷氏菌孵育4 h统计黏质沙雷氏菌活菌数；对家蚕5龄幼虫中LOC101742127,glv1,glv2,CecA,LOC101739681,CecD,Attacin1,Leb3和Lzm（抗菌肽基因）,LOC692824（凝集素基因）,PGRP-S1和LOC101738493（Toll/Imd信号通路相关基因）及Pi3k60,MAPK和Ras2 （PI3K和MAPK信号通路相关基因）等免疫相关基因表达量进行qPCR检测。【结果】与对照组比，家蚕1龄幼虫分别饲喂植物乳杆菌FLPL028、鼠李糖乳杆菌FLRH956和罗伊氏乳杆菌FLRE589后，5龄幼虫中Moricin,glv4-like和glv2等大多数抗菌肽基因的转录水平显著下降，其中Moricin的转录水平下降最多；凝集素基因CTL10,CTL19和LOC101736606及Toll/Imd信号通路相关基因PGRP-S2,LOC101738325和LOC101738493的转录水平下降，PI3K和MAPK信号通路相关基因Pi3k60和MAPK的转录水平分别提高约2.4和2.1倍。但上述3种乳杆菌都对黏质沙雷氏菌具有拮抗作用，将模型组（只饲喂黏质沙雷氏菌）家蚕的死亡率从83%降低到35%以下，其中罗伊氏乳杆菌FLRE589对黏质沙雷氏菌的拮抗作用最好，只引起18.1%的家蚕5龄幼虫死亡率。LOC101742127,glv1,glv2,CecA,LOC101739681,CecD,Attacin1,Leb3,Lzm,LOC692824,LOC101738493,PGRP-S1,Pi3k60,MAPK和Ras2的表达量变化趋势与RNAref转录组测序结果的基本一致。这3种乳杆菌的发酵上清能有效杀死黏质沙雷氏菌，降低黏质沙雷氏菌的活菌数。【结论】乳杆菌抑制家蚕抗菌肽和Toll/Imd免疫通路相关基因的表达，虽然降低了先天性免疫应答，但有利于乳杆菌与家蚕和睦相处，另外还可以通过激活PI3K和MAPK信号通路提高家蚕获得性免疫，此发现有助于更加全面认识蚕免疫系统，为养蚕业防治疾病提供新的策略。

摘要: 【目的】建立意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂喙转录组数据库，通过功能注释鉴定味觉受体(gustatory receptor, GR)基因信息，探究GR基因与意大利蜜蜂采集偏好性的相关性。【方法】采用Illumina HiSeq高通量测序平台对采集梨花粉、采集油菜花粉和不采集花粉的意大利蜜蜂工蜂喙进行转录组测序，筛选差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)并进行GO功能注释和KEGG代谢通路分类以及筛选GR基因并构建系统进化树；用qRT-PCR验证9个DEGs的表达。【结果】共筛选得到342个DEGs,其中上调表达基因157个，下调表达基因185个。GO功能注释结果显示，DEGs在GO注释中主要参与细胞过程、细胞解剖实体和结合。KEGG代谢通路分析结果显示，DEGs在氧化磷酸化通路中富集最多，酪氨酸代谢通路次之。在意大利蜜蜂喙转录组共鉴定出9种GR基因，其中4种为已知的GR基因，其余5种为本研究鉴定的未知GR基因，均具有完整的阅读开放框，且都有昆虫GR基因家族所具有的7个跨膜结构域。基于氨基酸序列构建的意大利蜜蜂AmelGRs与黑腹果蝇Drosophila melanogaster GRs的系统进化树，推测AmelGR4和AmelGR6可能属于苦味家族受体，AmelGR9可能属于甜味家族受体。qRT-PCR验证结果表明，筛选的9个DEGs在采集梨花粉的工蜂喙中有8个基因的表达趋势与RNA-seq结果相一致，在采集油菜花粉的工蜂喙中9个DEGs的表达趋势都与RNA-seq结果相一致。【结论】本研究获得了意大利蜜蜂工蜂喙转录组数据，筛选得到了GR基因，通过系统进化分析推测AmelGR4和AmelGR6可能属于苦味家族受体，AmelGR9可能属于甜味家族受体，推测意大利蜜蜂采集偏好性可能与GR基因相关。研究结果有助于在分子水平上加深对昆虫味觉感知系统的理解，为意大利蜜蜂在授粉过程中的采集偏好行为调控机制的研究奠定基础。

摘要: 【目的】为进一步摸清甘肃省昆虫病原线虫资源，筛选对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda具有高致病力的本土线虫。【方法】2023年7月-2024年4月分别在甘肃省定西市、白银市、庆阳市、兰州市、武威市和酒泉市地区，利用大蜡螟Galleria mellonella诱集法对甘肃省昆虫病原线虫资源进行调查。对诱集到的侵染期线虫体长、最大体宽、头到排泄孔的距离、头到神经环的距离、头到基食道球基部的距离、尾长、肛门处体宽等形态学指标进行测量与分析；同时通过分子生物学方法对各个线虫品系的ITS基因和28S rDNA基因D2-D3区序列进行扩增并对序列进行比较和分析来进行分类鉴定。利用室内生物测定法测定了Steinernema feltiae 0819B,S.feltiae 0931L,S.hebeiense 0847H,S.everestense 0821S,Heterorhabditis megidis 0853BH,H.megidis 0872L,H.beicherriana 0817H,H.beicherriana 0861H和H.beicherriana 0415L共9个线虫品系(200 IJs/头)对草地贪夜蛾3龄幼虫的致病力，并评估了草地贪夜蛾不同龄期幼虫(3龄、4龄、5龄和老熟幼虫)对1个高致病力品系H.megidis 0872L的敏感性以及不同侵染剂量(50, 100, 150, 200, 250, 300和350 IJs/头)、环境温度(13, 17, 21, 25, 29和33℃)对H.megidis 0872L致病力的影响。【结果】本次调查共获得20个昆虫病原线虫品系，包括斯氏属Steinernema 3种：S.feltiae,S.hebeiense和S.everestense,其中S.everestense为国内首次记录；异小杆属Heterorhabditis 2种：H.megidis和H.beicherriana。室内生物测定结果表明，H.megidis 0872L对草地贪夜蛾3龄幼虫的致病力最强，侵染96 h后草地贪夜蛾3龄幼虫的校正死亡率达到79.63%;进一步探讨影响H.megidis 0872L对草地贪夜蛾致病力的单因子发现草地贪夜蛾5龄幼虫对H.megidis 0872L最为敏感，H.megidis 0872L对草地贪夜蛾3龄幼虫的最佳侵染剂量为250 IJs/头，最适侵染温度为25℃。【结论】甘肃省昆虫病原线虫较为资源丰富，它们对草地贪夜蛾具有较高的致病力，其中H.megidis 0872L表现出良好的生物防治潜力。

摘要: 【目的】通过测定lncRNA13922在西方蜜蜂Apis mellifera工蜂不同发育阶段和成虫组织的表达谱，并解析lncRNA13922的调控方式和作用，为进一步探究lncRNA13922的调控功能和机制提供科学依据。【方法】通过RT-PCR验证lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂成虫不同组织(触角、毒腺、脑、中肠、脂肪体、表皮和咽下腺)中的表达量；采用RT-qPCR检测lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫)和工蜂成虫组织(触角、毒腺、脑、中肠、脂肪体、表皮和咽下腺)中的相对表达量；通过Pearson相关性分析预测与西方蜜蜂lncRNA13922共表达的mRNA;利用miRDeep2将lncRNA13922的核苷酸序列比对到miRBase数据库，再通过miRPara来预测miRNA前体；联用Miranda, RNAhybrid和TargetScan软件分别预测lncRNA13922靶向的miRNA及miRNA靶向的mRNA,取交集作为可靠的靶标集合；根据靶向关系构建竞争性内源RNA(competing endogenous RNA, ceRNA)调控网络，进而利用相关软件对靶mRNA进行GO和KEGG数据库注释。【结果】lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂成虫的触角、脑、中肠、脂肪体、咽下腺、表皮和毒腺均能被扩增出符合预期大小(约127 bp)的目的片段。lncRNA13922在西方蜜蜂卵、 3日龄幼虫、 1和2日龄预蛹及4日龄蛹中差异表达，在卵中的表达量最高，且显著高于3日龄幼虫及1和2日龄预蛹中的表达量；lncRNA13922在1, 2, 6, 12, 15和17日龄成虫体内均有表达，但表达量存在差异；lncRNA13922在2日龄成虫体内的表达量最高且显著高于1和17日龄成虫体内的表达量。lncRNA13922在西方蜜蜂工蜂成虫上述7种组织中差异表达，在毒腺中的表达量最高，且显著高于脑、中肠、脂肪体和咽下腺中的表达量。lncRNA13922与29条mRNA潜在共表达且它们的表达量具有正相关关系，与12条mRNA潜在共表达且它们的表达量具有负相关关系。lncRNA13922可作为2个miRNA的潜在前体。lncRNA13922可靶向75个miRNA进而靶向1 833条mRNA。上述靶mRNA涉及细胞部分和细胞等603个GO条目与内吞作用和嘌呤代谢等56条KEGG通路。【结论】西方蜜蜂lncRNA13922在工蜂的不同发育阶段和成虫不同组织中动态差异表达，并通过反式作用、miRNA前体和ceRNA作用网络潜在参与调控发育过程。