摘要: 【目的】鉴定家蚕Bombyx mori马氏管特异表达基因及其启动子，为家蚕的代谢排泄、解毒及免疫相关基因功能的研究及利用提供新的工具与支撑。【方法】基于家蚕全组织蛋白质组学数据进行马氏管特异表达基因筛选并利用RT-PCR验证基因在家蚕5龄幼虫头、表皮、中肠、脂肪体、马氏管、丝腺、精巢、卵巢、血细胞及气管中的表达；利用qRT-PCR检测家蚕不同发育阶段(卵、 3龄眠、 4龄幼虫、 5龄幼虫、上簇期、蛹和成虫)马氏管中及5龄幼虫头、表皮、中肠、脂肪体、马氏管、丝腺、精巢、卵巢、血细胞和气管中上述特异表达基因的表达量；利用PCR克隆家蚕马氏管特异表达基因BmPiT4175的上游启动子序列，并构建以EGFP为报告基因的转基因载体，获得转基因家蚕，在个体水平验证BmPiT4175上游启动子的活性及组织特异性。【结果】筛选获得了在家蚕马氏管特异表达的基因BmPiT4175;所克隆的BmPiT4175启动子长2 955 bp,其驱动的EGFP仅在转基因家蚕马氏管中特异表达，且EGFP与内源基因BmPiT4175的表达量相当。【结论】BmPiT4175的表达模式及其启动子活性都是家蚕马氏管特异的。

摘要: 【目的】本研究旨在探究西方蜜蜂Apis mellifera芳烃受体(aryl hydrocarbon receptor, AHR)基因AmAHR和芳烃受体核转运因子(aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator, ARNT)基因AmARNT在工蜂生长发育过程和杀虫剂胁迫下的表达模式，为这两个基因的功能研究提供理论参考。【方法】通过基因克隆获得西方蜜蜂AmAHR和AmARNT的编码序列(coding sequence, CDS)全长并进行多物种间的同源序列比对和系统进化树构建。利用qRT-PCR检测AmAHR和AmARNT在西方蜜蜂工蜂不同发育阶段(卵、幼虫、蛹和成蜂)、8日龄成年工蜂组织(触角、咽下腺、前足、中足、后足、翅、中肠、后肠和蛰针，及剔除了上述组织的头、胸和腹)和8日龄工蜂成蜂分别口服杀虫剂高效氯氟氰菊酯(1.25, 2.5, 5和10 mg/L)、氟胺氰菊酯(30, 60, 120和240 mg/L)和甲酸(1.25, 2.5, 5和10 mg/L)后的头中的表达量。【结果】克隆获得的西方蜜蜂AmAHR和AmARNT CDS分别编码885和686个氨基酸，编码蛋白均含有1个螺旋-环-螺旋、2个PAS结构域和1个PAC结构域，属于亲水性胞内蛋白。与西方蜜蜂的AmAHR和AmARNT氨基酸序列高度一致的同源蛋白前23个来源物种均属膜翅目(Hymenoptera), AmAHR和AmARNT分别与蜜蜂属Apis的昆虫相应的AHR和ARNT聚为一支。从卵至成蜂的发育过程中，AmAHR的表达量呈单峰型，以白眼白蛹期的表达量最高，显著高于其他发育阶段的，是卵期表达量的37.86倍；AmARNT的表达量呈双峰型，在卵和3日龄预蛹中表达量最高。AmAHR和AmARNT在蛹期的表达量峰期紧邻，且AmARNT先于AmAHR到达表达量峰值。AmAHR的表达量在8日龄工蜂成蜂触角中最高，是头中表达量的34.08倍，且显著高于其他组织中的表达量。AmANRT在8日龄工蜂成蜂胸中的表达量显著高于其他组织中的表达量，是头中表达量的1.75倍。与对照组相比，8日龄工蜂成蜂饲喂15μL 5 mg/L高效氯氟氰菊酯后，头中AmAHR的表达量显著上调至1.83倍，饲喂30和60 mg/L氟胺氰菊酯后，头中AmAHR的表达量则分别上调至1.63和1.74倍，而饲喂120 mg/L氟胺氰菊酯后，头中AmAHR的表达量仅为对照的0.36倍，表达被抑制；饲喂1.25, 2.5和5 mg/L的甲酸后，8日龄工蜂成蜂头中AmAHR的表达量分别上调至4.13, 3.61和2.56倍。8日龄工蜂成蜂饲喂2.5, 10 mg/L高效氯氟氰菊酯和30, 120 mg/L氟胺氰菊酯使AmARNT的表达量显著下降，仅分别为对照的0.69, 0.68, 0.60和0.34倍，但饲喂2.5 mg/L甲酸使AmARNT的表达量上调至对照组的1.68倍。【结论】西方蜜蜂AmAHR和AmARNT分别与其他昆虫的进化关系较为保守；AmAHR和AmARNT在初化蛹期的表达峰同步，暗示两基因的表达有密切关联，且可能与工蜂预蛹的发育有关。AmAHR和AmARNT在两种菊酯类杀虫剂胁迫下表达趋势相同，而与其对甲酸的响应不同，推测与两类杀虫剂的解毒代谢差异机制相关，本研究为进一步挖掘昆虫AHR和ARNT的功能提供新的理论依据。

摘要: 【目的】核心结合因子(core binding factor, CBF)β亚基(CBFβ)是一种重要的转录因子，在昆虫胚胎发育和免疫调节等过程中发挥关键作用，但是其在西方蜜蜂Apis mellifera中尚未报道。本研究旨在利用CRISPR/Cas9技术探究CBFβ在西方蜜蜂中的生理功能。【方法】克隆西方蜜蜂Bgb(big brother)基因AmBgb的编码序列(coding sequence, CDS),并进行生物信息学分析；运用qRT-PCR检测AmBgb在西方蜜蜂不同发育发育阶段(1-3日龄工蜂卵，1, 3和5日龄工蜂幼虫，工蜂预蛹，1, 3, 5, 7和9日龄工蜂蛹，刚出房工蜂，10日龄哺育蜂以及21日龄采集蜂)的表达量；采用CRISPR/Cas9敲除西方蜜蜂卵中AmBgb,监测卵的发育和存活情况，并通过PCR和测序的方法检测靶位点，验证AmBgb在西方蜜蜂中的生理功能。【结果】西方蜜蜂AmBgb的CDS全长为759 bp,编码252个氨基酸，第39-201位氨基酸存在1个CBFβ结构域；AmBgb分子量为28 982.37 D,无信号肽和跨膜结构，预测其为胞内蛋白；系统进化树显示西方蜜蜂AmBgb与东方蜜蜂A.cerana的Bgb高度同源(氨基酸序列一致性为99.21%),且亲缘关系最密切。AmBgb在2和3日龄工蜂卵中的表达量明显高于其他发育阶段的。基于CRISPR/Cas9处理的西方蜜蜂43粒卵中，有5粒卵孵化为幼虫且AmBgb靶位点无突变；随机对7粒死亡卵进行检测，发现6粒卵中AmBgb的靶位点出现基因编辑，包括不同长度插入、缺失或替换。【结论】西方蜜蜂AmBgb在2和3日龄卵中高量表达，敲除AmBgb导致卵不能正常孵化为幼虫。这些结果表明AmBgb在西方蜜蜂胚胎发育过程中发挥重要作用，这将为其他膜翅目(Hymenoptera)昆虫中该基因的生理功能研究提供理论指导。

摘要: 【目的】本研究旨在探究干旱处理韭菜迟眼蕈蚊Bradysia odoriphaga雌雄蛹对成虫羽化、繁殖能力和生殖系统发育以及F₁代生长、发育和繁殖的影响，以揭示干旱胁迫对韭菜迟眼蕈蚊种群的调控机制，为其田间预测预报及科学防控提供理论依据。【方法】韭菜迟眼蕈蚊雌雄蛹经10%土壤含水量（干旱）和40%土壤含水量（湿润）处理，统计成虫羽化率、单雌产卵量及产卵率；解剖羽化24 h内的成虫，观察卵巢和精巢的发育状况，通过构建年龄-龄期两性生命表分析蛹期干旱处理对F₁代生长、发育和繁殖的影响。【结果】韭菜迟眼蕈蚊蛹期干旱处理抑制其成虫羽化，减少其产卵量及产卵率，其中雌蛹和雄蛹羽化率在湿润处理后分别为85.00%和86.67%,在干旱处理后依次仅为23.33%和13.33%;干旱处理成虫单雌产卵量和产卵率较湿润处理分别下降了69.55%和33.33%。蛹期干旱处理影响韭菜迟眼蕈蚊精巢和卵巢发育，精巢干瘪皱缩，卵巢内卵粒排布散乱；相较于湿润处理，蛹期干旱处理后卵巢长度显著缩短了16.62%,精巢长度显著缩短了24.82%,精巢宽度显著下降了18.16%,而卵巢宽度无显著变化。韭菜迟眼蕈蚊雌雄蛹经干旱处理后对其F₁代生长发育产生显著影响。韭菜迟眼蕈蚊雌蛹干旱处理后，卵历期、 1龄幼虫历期、蛹历期、雌雄成虫寿命、成虫产卵前期、总产卵前期和平均世代周期（T）显著缩短；韭菜迟眼蕈蚊雄蛹干旱处理后，1龄幼虫历期和4龄幼虫历期显著延长，2龄幼虫历期、 3龄幼虫历期和雄成虫寿命显著缩短，总产卵前期显著延长，净增殖率（R₀）、内禀增长率（r）和周限增长率（λ）显著降低，平均世代周期（T）显著延长。【结论】韭菜迟眼蕈蚊蛹期干旱胁迫显著抑制成虫羽化，成虫产卵量显著降低，阻碍了繁殖器官发育，同时无论雄蛹还是雌蛹受到干旱胁迫都会影响F₁代种群增长。

摘要: 巨自噬/自噬即细胞回收降解受损组分，是参与宿主免疫防御的自我保护机制。机体面对病原入侵等应激情况时逐步启动自噬维护自身稳态。研究表明，自噬主要受Ras-Raf-MEK-ERK通路、 PI3K-AKT-mTOR通路和AMPK等通路的调控，而这些通路均受上游的Ras蛋白直接或间接调控。Ras作为膜锚定蛋白，在细胞信号转导中扮演者关键角色，对自噬有双重调控作用，同时自噬也负向调控Ras突变引起的肿瘤发生。与哺乳动物不同，昆虫缺乏适应性免疫，主要依靠先天免疫如自噬等保守机制应对病原入侵，如黑腹果蝇Drosophila melanogaster、秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans和家蚕Bombyx mori都有报道面对细菌、病毒的入侵时自噬相关蛋白表达量上升以抵御病原体。不过由Ras蛋白在昆虫中直接调控自噬介导防御的研究仍然较少，因此为了进一步明确Ras-自噬轴的关键作用并为后续研究提供参考，本文从Ras调控自噬的分子机制、在昆虫免疫中的作用以及昆虫自噬与其他防御机制的协同网络3个方面展开综述，以期为昆虫免疫、经济昆虫保护和害虫防治等相关研究提供新视角。基于昆虫模型的独特优势与CRISPR等技术，有望阐明Ras-自噬轴调控机制及功能阈值，深化昆虫免疫稳态认知，为农业靶向设计绿色农药、提升经济昆虫抗逆性开辟新路径。

摘要: 【目的】本研究旨在明确共生菌Wolbachia属中特定菌株对宿主适合度的影响及分子机制。【方法】以20 mg/mL盐酸四环素蜂蜜溶液连续饲喂处理短管赤眼蜂Trichogramma pretiosum孤雌产雌品系3代成蜂，计算寄生率、羽化率和雌性比，并利用绝对定量qPCR(absolute quantitation qPCR, AQ-PCR)对短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂体内Wolbachia属的wsp的lg(绝对拷贝数)进行检测，分析Wolbachia的滴度；利用Illumina平台以Wolbachia基因组作为参考基因组进行短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂体内Wolbachia属的转录组测序，盐酸四环素处理前后短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂体内Wolbachia转录组中筛选差异表达基因并进行GO/KEGG/COG数据库分析；利用RT-qPCR检测短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂中Wolbachia属的5个基因(w1260,w0535,w3585,w4570和w2910)的表达量。【结果】盐酸四环素处理组短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂寄生率、羽化率、雌性比和体内wsp的lg(绝对拷贝数)均显著低于对照组且随世代增加显著下降。从盐酸四环素处理前后的短管赤眼蜂孤雌产雌品系成蜂体内Wolbachia转录组中共鉴定出28个差异表达基因(6个下调)且显著富集于代谢过程、氧化磷酸化、能量产生与转换等多个与生长发育相关的通路，6个下调基因经NCBI Blast比对到3个Wolbachia菌株wCIFem,wfur和wSca。RT-qPCR验证表明，盐酸四环素处理后孤雌产雌成蜂体内5个差异表达基因(w1260,w0535,w3585,w4570和w2910)表达趋势与转录组测序结果一致。【结论】Wolbachia滴度降低通过抑制关键代谢通路(如氧化磷酸化)及清除功能菌株(wCIFem,wfur和wSca),削弱宿主能量供给与发育效率，导致生殖适合度下降。本研究首次以Wolbachia基因组为参考基因组解析共生菌-宿主互作的分子机制，研究结果表明Wolbachia通过菌株特异性基因网络维持共生稳态，揭示了Wolbachia中不同菌株通过多通路调控宿主生殖适合度的分子机制，为建立基于共生菌基因组的靶向调控技术体系提供理论支持。

摘要: 【目的】重阳木锦斑蛾Histia rhodope是我国城市绿化和行道树常见树种重阳木Bischofia polycarpa的重要食叶性害虫。本研究旨在明确重阳木锦斑蛾繁殖的行为特征与节律，为科学调控该虫种群动态提供基础资料。【方法】2023-2024年在河南洛阳隋唐城遗址植物园重阳木林间观测重阳木锦斑蛾成虫羽化、求偶、交配和产卵行为特征；室内记录重阳木锦斑蛾成虫羽化、求偶和交配节律，并探究成虫日龄对求偶率、交配率、产卵量和卵孵化率的影响。【结果】重阳木锦斑蛾雌雄成虫在5:00-20:00羽化，10:00-12:00达到羽化高峰。雄成虫求偶包括飞行、爬行、侦测、触角交流、振翅、暴露生殖器和尝试交配等系列行为，雌成虫暴露性腺、静待雄成虫。雄成虫求偶行为发生在光期9:00-18:00,高峰时段为12:00-17:00,且1-2日龄雄成虫求偶率显著高于4-5日龄雄成虫。重阳木锦斑蛾为单配制蛾类，雌成虫一生平均交配1.29次，单次交配雌成虫占73.40%;成虫交配姿势呈“一”字型，仅在10:00-19:00进行交配；各日龄成虫交配高峰不同，1日龄成虫交配高峰为15:00-16:00, 2-4日龄成虫的交配高峰为14:00-16:00, 5日龄成虫的交配高峰期为14:00-15:00; 1-2日龄成虫交配率显著高于4-5日龄成虫。重阳木锦斑蛾雌成虫交配后可多次产卵，通常选择重阳木树皮下或枝干缝隙作为产卵地；随雌成虫龄期的增加，交配率与产卵量均下降，5日龄雌成虫交配率降至15%,单雌产卵量(98.75±6.87)粒，显著低于1日龄雌成虫[交配率54%,单雌产卵量(211±13.04)粒]。【结论】重阳木锦斑蛾的羽化与繁殖行为发生在光期，它是单配制蛾类。

摘要: 【目的】本研究旨在丰富西方蜜蜂Apis mellifera过氧化物还原酶5（peroxiredoxin-5） AmPRX5的理化性质和分子特征信息，检测AmPRX5的表达模式，并探究AmPRX5在蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis侵染后对西方蜜蜂的抗氧化应激作用，为进一步开展AmPRX5功能和作用机制研究提供科学依据。【方法】通过PCR扩增西方蜜蜂AmPRX5的CDS;使用相关软件预测AmPRX5的理化性质和分子特征，构建蛋白互作网络，并进行保守基序、结构域和系统进化分析。采用RT-qPCR检测AmPRX5在西方蜜蜂工蜂不同发育阶段（卵、 3和5日龄幼虫、 1和2日龄预蛹、 1日龄蛹以及1, 2, 6, 8和12日龄成虫）和工蜂成虫不同组织（脑、咽下腺、中肠、触角、毒腺、表皮和脂肪体）及3日龄幼虫接种蜜蜂球囊菌后4, 5和6日龄幼虫肠道中的表达量；利用分光光度法检测蜜蜂球囊菌接种3日龄幼虫后4, 5和6日龄幼虫肠道中的过氧化氢（H₂O₂）含量。【结果】成功克隆到西方蜜蜂AmPRX5的CDS,长558 bp。AmPRX5的分子式为C₉₀₄H₁₄₄₅N₂₄₁O₂₆₄S₈,分子量约为20.17 kD,等电点为8.99,平均亲水系数为-0.013。AmPRX5含有19个磷酸化位点，但不含典型的信号肽和跨膜结构域。AmPRX5的二级结构包含88个无规卷曲、 59个α-螺旋和38条延伸链。AmPRX5与硫氧还蛋白还原酶等10个蛋白构成1个互作网络。西方蜜蜂和其他9种蜂的PRX5均包含1个相同的PRX5结构域和6个保守基序。西方蜜蜂与东方蜜蜂A.cerana的PRX5同源性最高。AmPRX5在1日龄蛹中的表达量最高且显著高于卵、 3日龄幼虫、 5日龄幼虫、 1日龄预蛹和2日龄预蛹中的表达量；AmPRX5在12日龄成虫体内的表达量最高且显著高于1, 2, 6和8日龄成虫体内的表达量；AmPRX5在成虫触角中的表达量最高且显著高于中肠、脂肪体、表皮、毒腺和脑中的表达量。与未接种对照组比较，西方蜜蜂3日龄幼虫接种蜜蜂球囊菌后AmPRX5的表达量在4日龄幼虫肠道中上调但无显著差异，在5日龄幼虫肠道中极显著上调，在6日龄幼虫肠道中显著上调；H₂O₂的含量在接种蜜蜂球囊菌后4和5日龄幼虫肠道中均极显著上升，在6日龄幼虫肠道中显著升高。【结论】AmPRX5是一种潜在的亲水性、非跨膜和胞内蛋白；AmPRX5在西方蜜蜂不同发育阶段和不同组织中动态差异表达；AmPRX5可能通过影响H₂O₂含量参与幼虫对蜜蜂球囊菌侵染的应答。

摘要: 【目的】探明丝棉木金星尺蛾Calospilos suspecta幼虫在暗期经不同光脉冲处理后滞育特性的变化规律。【方法】在温度22℃和光周期12L∶12D条件下，于暗期10个时段(第2-11小时)采用3种颜色(白、红和黄色) LED光脉冲处理丝棉木金星尺蛾初孵幼虫3个时长(60, 30和10 min),化蛹后计录蛹滞育率，测定滞育蛹重量。【结果】除12L∶2D∶1W∶9D和12L∶4D∶1W∶7D处理组外，其他处理组的丝棉木金星尺蛾滞育率均高于对照组，30和10 min白色LED光脉冲下丝棉木金星尺蛾的滞育率均高于60 min白色LED光脉冲下的。60, 30和10 min的白色LED光脉冲下丝棉木金星尺蛾最高滞育率分别为暗期第2小时的32.25%、第10小时的85.80%和第9小时的85.42%; 60, 30和10 min的红色LED光脉冲下丝棉木金星尺蛾最高滞育率分别为暗期第4小时的65.91%、第10小时的87.65%和第9小时的83.11%; 60, 30和10 min的黄色LED光脉冲下丝棉木金星尺蛾最高滞育率分别为暗期第10小时的52.76%、第2小时的72.35%和第11小时的95.89%。60 min白色LED光脉冲处理时，除12L∶2D∶1W∶9D处理组外，其他处理组中丝棉木金星尺蛾的滞育蛹重均轻于对照组，30和10 min白色LED光脉冲处理组中滞育蛹均重于60 min白色光脉冲组。60, 30和10 min的白色LED光脉冲下丝棉木金星尺蛾最重滞育蛹分别为暗期第3小时的0.112 g、第11小时的0.122 g和第10小时的0.131 g; 60, 30和10 min的红色LED光脉冲下最重滞育蛹分别为暗期第8小时的0.122 g、第6小时的0.129 g和第11小时的0.116 g;60, 30和10 min的黄色LED光脉冲下最重滞育蛹分别为暗期第8小时的0.126 g、第9小时的0.127 g和第8小时的0.128 g。【结论】暗期光脉冲明显影响了丝棉木金星尺蛾滞育反应，幼虫对各种光脉冲敏感期主要在两个不同的时间窗口期：暗期初的第2-4和暗期末的9-11小时，表现为滞育率显著升高和蛹重的增加。

摘要: 【目的】本研究旨在探究我国油茶Camellia oleifera花期中华蜜蜂Apis cerana cerana粉源植物多样性及其对油茶传粉的贡献。【方法】对2015-2023年我国油茶9个种植区(三带九区) 99个油茶基地采集的中华蜜蜂标本洗刷其体表携带花粉，提取混合花粉DNA,进行ITS2区PCR扩增，基于Illumina PE250二代高通量测序技术进行测序；经Trimmomatic, FLASH和Usearch v10.0对原始序列进行质控、拼接和去嵌合体处理，以97%相似度划分可操作分类单元(operational taxonomic units, OTUs),基于NT数据库进行物种注释。采用Past v4.17计算Simpson指数、Shannon指数、Chao1指数及Margalef指数等Alpha多样性指数值，利用SPSS v26.0进行单因素方差分析与LSD检验，分析不同种植区油茶花期中华蜜蜂的粉源植物组成、丰度和多样性。【结果】共注释到油茶花期中华蜜蜂粉源植物33目58科85属150种。不同油茶种植区花期中华蜜蜂粉源植物组成和丰度不同，总占比超过1.00%的粉源植物共有13种。其中油茶花粉的相对丰度较低，为0.03%～23.33%。中带油茶种植区的粉源植物Simpson指数、 Shannon指数、 Chao1指数和Margalef指数值最高(分别为0.75±0.14, 2.01±0.52, 85.04±21.53和7.30±1.84),北带的分别为0.56±0.17, 1.22±0.36, 35.99±3.11和2.76±0.30,南带的分别为0.43±0.14, 1.10±0.25, 77.74±9.71和6.60±0.78,多样性较低。在油茶种植区的层面上，Ⅱc(中带贵州高原区)的粉源植物Simpson指数、 Shannon指数、 Chao1指数和Margalef指数值最高(分别为0.87±0.00, 2.44±0.06, 101.97±11.33和8.33±0.58)、 Ia(北带东部桐柏山大别山低山丘陵区)的最低(分别为0.40±0.00, 0.90±0.01, 34.07±1.85和2.82±0.37)。去除油茶花粉后，不同油茶种植区的伴生粉源植物的相对丰度存在显著地域差异，优势种包括鬼针草Bidens pilosa、甘菊Chrysanthemum lavandulifolium、蔓菁Brassica rapa及假弯曲碎米荠Cardamine fallax(最高相对丰度分别为85.05%, 75.71%, 43.99%和35.38%)。【结论】中华蜜蜂是我国油茶的传粉昆虫之一，其体表携带花粉中油茶花粉的含量在不同地区差异性显著。油茶花期中华蜜蜂粉源植物资源丰富，且存在明显的区域性差异。