摘要: 【目的】探究中华按蚊Anopheles sinensis无锡株溴氰菊酯的抗性关联单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）位点和基因。【方法】对中华按蚊无锡株溴氰菊酯抗性品系（WX-LR）和敏感品系（WX-LS）杂交构建的F₂群体进行0.04%溴氰菊酯处理，测定击倒时间；采用混合群体分离分析（bulked segregant analysis, BSA）和全基因组测序相结合的方法，对获得的中华按蚊极端抗性个体和极端敏感个体混池进行全基因组重测序，筛选与溴氰菊酯抗性关联的SNP位点；采用SNP-index（SNP基因型频率）计算和候选区域定位以筛选与溴氰菊酯抗性关联的数量性状位点（quantitative trait loci, QTL）,并对候选QTL基因进行GO功能注释和KEGG通路富集；筛选溴氰菊酯抗性关联的关键基因。【结果】与中华按蚊溴氰菊酯抗性关联的SNP位点主要集中在2号和3号染色体上。99%置信区间ΔSNP-index全部分布在2号染色体上，包括12个与溴氰菊酯类抗性关联的QTL和672个功能注释的基因。最终筛选到12个溴氰菊酯抗性关联的关键基因，包括6个Trypsin基因，4个锌指蛋白基因，OAT基因和CYP4J5基因，其涉及杀虫剂代谢解毒酶和有机阴离子转运等。【结论】基于BSA测序（BSA sequencing, BSA-seq）鉴定中华按蚊无锡株溴氰菊酯抗性直接关联的基因，为深入了解中华按蚊对溴氰菊酯类杀虫剂抗性的分子机制奠定了基础。

摘要: 【目的】为明确新疆棉花主要种植区花蓟马Frankliniella intonsa对6种常用杀虫剂（吡虫啉、噻虫嗪、氟啶虫胺腈、双丙环虫酯、氟吡呋喃酮和溴氰虫酰胺）的抗性现状。【方法】以云南农业大学提供的花蓟马为敏感品系，采用浸渍法测定上述6种杀虫剂对新疆阿克苏阿瓦提县、喀什泽普县、库尔勒和什力克乡和昌吉玛纳斯县田间花蓟马种群成虫的致死中浓度(median lethal concentration, LC₅₀)值，并据此评估这4个田间种群对这6种杀虫剂的抗性水平。【结果】新疆4个地区花蓟马田间种群除对溴氰虫酰胺仍保持敏感水平外，对其他5种杀虫剂均产生了不同程度的抗性。其中，库尔勒种群对吡虫啉抗性水平最高，达到了中抗水平，抗性倍数（resistance ratio, RR）为32.6;泽普种群对氟吡呋喃酮的抗性水平最高，表现为中等抗性水平，RR为15.7; 4个花蓟马田间种群对噻虫嗪、氟啶虫胺腈和双丙环虫酯均达到了中低等抗水平（5.0<RR≤40.0）。【结论】溴氰虫酰胺可作为防治田间花蓟马的推荐药剂，与其他作用机理不同的药剂进行轮换使用，以延缓花蓟马抗药性发展速度。

摘要: 【目的】本研究旨在明确中国梨木虱Cocapsylla chinensis成虫交配行为及昼夜节律变化，为深入研究该虫的两性通讯机制和诱杀技术提供理论依据。【方法】在陕西杨凌酥梨园调查中国梨木虱冬型成虫田间交配活动基础上，在室内条件下[温度(25±1)℃、光周期14L∶10D],观察单头配对夏型和冬型成虫交配行为，包括交配次数和时长的昼夜节律。【结果】中国梨木虱在交配过程中，雄虫主动向雌虫求偶，交配时雌雄体躯朝同一方向平行或重叠排列。两性交配主要发生于光期，而暗期则常在寄主植物上静息，表现出明显的昼夜节律性。在观察光期的单头配对成虫时发现，夏型成虫3日龄达到交配高峰，至7日龄所观察个体中有94.0%发生了交配行为；而初羽化冬型成虫移入温度(25±1)℃,光周期14L∶10D条件下，从5日龄开始展现交配行为，7-9日龄达到高峰，至9日龄所观察个体中有84.0%发生了交配行为。夏型和冬型成虫的平均交配次数分别为3.26±0.33和4.12±0.37,平均交配时长分别为(20.32±1.25)和(48.36±1.38) min/次。两型之间的交配次数无显著差异，但冬型成虫的交配时长显著大于夏型成虫的。交配次数和时长分析表明，夏型成虫的交配次数以1～2次为主(占50.0%),交配时长主要在10～30 min/次(占67.5%),而冬型成虫的交配次数以1～3次为主(占52.0%),交配时长主要在30～60 min/次(占63.2%)。【结论】上述结果表明，中国梨木虱单头配对成虫存在复交配现象，其交配活动表现出明显的昼夜节律性，在相同条件下冬型成虫的交配次数和时长较大于夏型成虫。

摘要: 【目的】沃尔巴克氏体Wolbachia是一类母系遗传的革兰氏阴性菌，是昆虫中最常见的胞内共生菌之一，可通过多种方式影响宿主的生殖和行为，但其影响机制还不甚清楚。本研究旨在探讨一种毒力较强的Wolbachia菌株wMelPop侵染对雄性黑腹果蝇Drosophila melanogaster肠道细菌的影响。【方法】解剖感染wMelPop的黑腹果蝇(Pop+)和未感染的黑腹果蝇(Pop-)雄成虫完整肠道，提取总DNA,利用Illumina NovaSeq平台对肠道细菌16S rDNA基因的V3-V4区进行测序，比较分析Pop+和Pop-肠道细菌的物种组成、丰度及α多样性，并通过qPCR验证表达量具有显著差异的3个属的6种肠道微生物高通量测序数据的有效性。【结果】α多样性分析显示，wMelPop侵染提高了雄性黑腹果蝇肠道细菌丰度，降低了肠道菌的多样性。Pop-肠道中，优势菌属是不动杆菌属Acinetobacter、假单胞菌属Pseudomonas、醋杆菌属Acetobacter和嗜盐单胞菌属Halomonas。与Pop-相比，Pop+肠道中假单胞菌属的相对丰度显著下调，而醋杆菌属和乳杆菌属Lactobacillus的相对丰度显著上调。qPCR验证结果显示，与Pop-相比，Pop+肠道中总细菌16S rDNA基因表达量极显著上调，Pop+肠道中番茄醋酸杆菌A.pomorum的16S rDNA基因表达量下调至Pop-的0.7倍，Pop+肠道中热带醋酸杆菌A.tropicalis的16S rDNA基因表达量比Pop-的上调约3 700倍，果状乳杆菌L.frutivorans、植物乳杆菌L.plantarum和短乳杆菌L.brevis的16S rDNA基因表达量均显著上调，其中果状乳杆菌16S rDNA基因表达量上调的倍数最高，约为Pop-的23 000倍，产碱假单胞菌P.alcaligenes的16S rDNA基因表达量下调至Pop-的0.6倍，这些结果与16S rDNA测序结果的趋势基本一致。【结论】wMelPop的侵染显著影响了雄性黑腹果蝇肠道细菌的相对丰度。其中，醋杆菌属和乳杆菌属的肠道菌载量显著升高，这可能是wMelPop感染影响昆虫宿主生殖和行为的机制之一。

摘要: 【目的】前期研究发现灰飞虱Laodelphax striatellus抗溴氰菊酯品系JH-del中CYP6AY3v2和CYP439A1v3的过量表达是灰飞虱对溴氰菊酯产生抗性的主要机制。本研究旨在阐明灰飞虱CYP6AY3v2和CYP439A1v3上调表达的机理，揭示其调控信号通路。【方法】通过定量PCR检测灰飞虱G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor, GPCR)A家族长波敏感视蛋白(long wavelength-sensitive opsin, LWO)基因LWO在灰飞虱溴氰菊酯抗性品系JH-del和敏感品系JHS 4龄若虫中的表达量；通过RNAi和盐酸布比卡因干扰灰飞虱JH-del品系3龄若虫LWO/AC/cAMP/PKA信号通路基因LWO,AC-2,AC-3,PKA-1,PKA-2和PKA-3,利用生物测定检测灰飞虱对溴氰菊酯敏感性的变化，验证LWO通过增加自身表达量激活下游AC/cAMP/PKA/CYP450s信号通路基因，介导灰飞虱对溴氰菊酯产生抗性。利用转基因果蝇Drosophila结合GAL4/UAS系统和昆虫杆状病毒表达系统分别在黑腹果蝇Drosophila melanogaster 3日龄雌成虫和草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda Sf9细胞中异源表达灰飞虱LWO并验证其功能。【结果】LWO在抗溴氰菊酯灰飞虱品系JH-del中的相对表达量是敏感品系JHS中的1.54倍；与对照组(喂食dsGFP)比，喂食目标基因dsRNA干扰灰飞虱品系JH-del 3龄若虫中LWO/AC/cAMP/PKA信号通路中的任何一个节点，该信号通路下游代谢溴氰菊酯的灰飞虱CYP6AY3v2和CYP439A1v3的表达量都显著下降，灰飞虱JH-del品系3龄若虫对溴氰菊酯的敏感性都得以恢复。将灰飞虱LWO分别在黑腹果蝇和Sf9细胞中异源表达后，黑腹果蝇和Sf9细胞对溴氰菊酯的抗性也显著提高，抗性的提高也是通过灰飞虱LWO/AC/cAMP/PKA/CYP450s信号通路介导的。【结论】LWO受体通过增加自身表达量激活下游AC/cAMP/PKA/CYP450s信号通路，介导了灰飞虱对溴氰菊酯抗性的产生，该研究结果为灰飞虱抗性的治理和杀虫剂新靶标的筛选提供了理论依据。

摘要: 【目的】二化性家蚕Bombyx mori卵在25℃下催青时，热敏瞬时受体电位锚蛋白1（TRPA1）被激活，随后可能激活一条与滞育激素（diapause hormone, DH）释放相关的未知信号通路。本研究旨在研究家蚕BmTRPA1调控DH分泌的分子机制，以及BmTRPA1与GABAergic信号通路的关系。【方法】利用CRISPR/Cas9敲除25℃下催青的家蚕BmTRPA1基因，通过转录组测序筛选野生型（WT）和BmTRPA1^-/-突变型家蚕在蛹期第3天脑-咽下神经节（brain-suboesophagealganglion, Br-SG）复合体中的差异表达基因；对差异表达基因和特异表达基因分别进行GO分类和KEGG功能富集分析；qRT-PCR检测6个差异表达基因、调控GABAergic信号通路10个关键基因和神经肽基因K5的相对表达量。【结果】WT的Br-SG复合体中有13 039个基因表达，BmTRPA1^-/-Br-SG复合体中有12 937个基因表达，其中12 484个基因在WT和BmTRPA1^-/-Br-SG复合体中共表达，有555个基因在WT中Br-SG复合体特异表达，453个基因在BmTRPA1^-/-Br-SG复合体中特异表达；相比于WT Br-SG复合体，BmTRPA1^-/-Br-SG复合体有32个基因表达上调，13个基因表达下调。这些差异表达基因主要富集在正反馈调节过程、代谢、应激和细胞调控等关键生命活动过程，其中富集于蛋白质转运过程与内分泌的差异表达蛋白GAT属于质膜GABA转运蛋白，是调控家蚕DH释放的关键蛋白。qRT-PCR检测结果显示，GAT和K5在BmTRPA1^-/-Br-SG复合体中的相对表达量与WT Br-SG复合体中的相比显著下调。【结论】本研究在组学水平上证明，敲除TRPA1将降低GAT的表达，从而调控GABAergic信号通路，减少DH释放。研究结果为后续探索家蚕响应环境温度诱导滞育发生的分子调控机制提供了靶标蛋白和数据参考。

摘要: 【目的】探究不同地理分布的柑橘木虱Diaphorina citri黄龙病菌Candidatus Liberibacter asiaticus (CLas)及其主要共生细菌沃尔巴克氏Wolbachia,Carsonella和Profftella的发生及相互作用。【方法】2022年8月-2023年8月从中国柑橘木虱分布的主要气候区采集20个柑橘木虱种群样本，利用巢式PCR技术检测各种群雌成虫黄龙病感染率；通过qPCR技术对5个黄龙病感染率较高种群测定CLas和3种共生细菌(Wolbachia,Carsonella和Profftella)的相对丰度；筛选感染与未感染黄龙病的柑橘木虱成虫转录组差异表达基因，并进行KEGG通路富集分析。【结果】柑橘木虱灵山和榕江种群雌成虫黄龙病感染率最高，感染率均达到66.67%, 7个种群(琼中、澄迈、华宁、永春、衡山、麻阳、丰城)雌成虫不感染黄龙病。海拔显著影响柑橘木虱黄龙病感染率；降水量对CLas相对丰度有显著影响；纬度、海拔和温度则对特定共生细菌相对丰度有显著影响；感染黄龙病影响共生细菌对这些环境因素的响应。相关性分析表明，黄龙病的感染会影响柑橘木虱共生细菌之间相对丰度的相关性。转录组分析发现感染黄龙病的柑橘木虱差异表达基因主要富集在过氧化物酶、碳代谢等通路，可能是造成共生细菌互作关系改变的原因。【结论】本研究表明了环境因素对柑橘木虱黄龙病菌及其主要共生细菌的影响；感染黄龙病会改变柑橘木虱共生细菌对环境因素的响应以及互作，这可能与感染黄龙病的柑橘木虱基因表达调控密切相关。这些结果对于制定地理信息驱动的黄龙病综合防控策略具有重要的参考价值。

摘要: 【目的】本研究旨在通过探究翅发育调控基因spalt major在豌豆蚜Acyrthosiphon pisum翅型分化中的作用，进一步揭示昆虫翅非遗传多型现象的分子机制。【方法】在实验室条件下用密度诱导孤雌生殖的无翅豌豆蚜产生高比例的有翅型后代并利用qRT-PCR检测Apsal的表达量。设计合成靶向豌豆蚜spalt major基因Apsal的dsRNA(dsApsal),以及Apsal上游Wg/Wnt和Dpp信号通路基因Wnt-2(ApWnt2)和decapentaplegic(Apdpp)的dsRNA(分别为dsApWnt2和dsApdpp)。运用纳米载体介导的体壁渗透法干扰无翅母蚜和其初孵若蚜的Apsal,ApWnt2和Apdpp,记录有翅率，并利用qRT-PCR检测基因表达量。【结果】高密度处理豌豆蚜母蚜可以稳定诱导出超过80%的有翅后代；与单独饲养的无翅蚜相比，翅发育关键基因Apsal在密度诱导的有翅子代中表达量升高；与对照组(dseGFP)相比，dsApsal干扰Apsal表达造成有翅率显著降低；干扰上游基因ApWnt2和Apdpp的表达，Apsal的表达量降低。【结论】Apsal参与调控豌豆蚜翅型分化，其表达同时受Wg/Wnt和Dpp信号通路激活。本研究进一步揭示了蚜虫翅型分化的分子机制，为阻止蚜虫迁飞转移寄主提供了RNA防治的理论和技术依据。

摘要: 感觉神经元膜蛋白(sensory neuron membrane proteins, SNMPs)是一类在昆虫中特有的膜蛋白，一般具有2个典型的跨膜结构域，也是CD36家族的重要成员之一。目前，昆虫SNMPs已扩展了5个亚家族类型，即SNMP1, SNMP2, SNMP3, SNMP4和SNMP5,分别在不同昆虫种中表现出不同的表达模式。在昆虫触角和嗅觉感觉神经元(olfactory sensory neurons, OSNs)中表达的SNMP1亚家族基因被广泛研究，已在不同昆虫中证实SNMP1在昆虫信息素感知中发挥重要作用；SNMP2亚家族基因广泛的表达模式也暗示了其在嗅觉和味觉中发挥作用；在鳞翅目(Lepidoptera)昆虫中肠中特异性表达的SNMP3亚家族基因，可能在昆虫消化和免疫等方面发挥功能；对于鞘翅目(Coleoptera)昆虫特有的SNMP4和SNMP5亚族基因，可能参与昆虫更多生命活动。过去几十年，尽管SNMPs在昆虫嗅觉系统中起着至关重要的作用，但SNMP1与其他受体蛋白的作用机制仍不明确。此外，对于其他SNMPs亚家族成员的具体功能和作用机制，尤其是在非模式昆虫中的研究仍然有限。本文总结和讨论了SNMPs各亚家族基因的多样化表达模式，SNMPs可能在昆虫生理活动中发挥的多种生理和生物学功能，以及分子生物学、分子遗传学、异源细胞表达系统、酵母双杂交等方法和技术在当前昆虫SNMPs功能研究中的应用，为今后昆虫SNMPs功能研究提供参考。最后，提出了如下研究重点展望：(1)深入开展SNMP1与昆虫信息素的关系的研究有助于开发新型信息素诱捕剂的应用；(2)未来利用人工智能和蛋白结构解析有助于揭示SNMPs与其他受体蛋白互作参与气味识别的机制；(3)进一步开展昆虫SNMPs其他亚家族在味觉、消化、免疫以及生存发展等方面的研究，有助于我们深入理解昆虫的基本生物学特性，还可能为害虫管理提供新的策略和方法。

摘要: 【目的】通过对小菜蛾Plutella xylostella性信息素生物合成激活神经肽基因PxylPBAN进行克隆、原核表达，并检测RNAi沉默PxylPBAN对小菜蛾保幼激素通路和性信息素合成通路基因表达的影响，探讨PxylPBAN在性信息素合成中的作用。【方法】利用RT-PCR克隆小菜蛾PxylPBAN的CDS全长序列；原核表达PxylPBAN并纯化；通过将dsPxylPBAN注射进小菜蛾雌蛹，利用RNAi沉默PxylPBAN,并利用RT-qPCR验证RNAi后24, 48和72 h时PxylPBAN以及保幼激素通路基因(PxylJHAMT,PxylnJHBP,PxylhJHBP和PxylMet)和性信息素合成通路基因(PxylACC和PxylFAR6)的表达量。【结果】克隆得到小菜蛾PxylPBAN(GenBank登录号：LOC105391112),全长CDS 582 bp,编码193个氨基酸，蛋白预测分子量约为21.85 kD;原核表达获得PxylPBAN重组蛋白。RNAi结果表明与注射dsEGFP的对照比较，注射dsPxylPBAN后小菜蛾PxylPBAN的表达量显著下调，且注射后24 h时下调最显著；此外，PxylJHAMT,PxylnJHBP,PxylhJHBP,PxylMet,PxylACC和PxylFAR6的表达量也显著下调。【结论】本研究成功获得PxylPBAN重组蛋白，发现PxylPBAN是小菜蛾保幼激素通路和性信息素合成通路的重要枢纽基因，为揭示小菜蛾PxylPBAN与保幼激素对性信息素生物合成的联动调控模式奠定理论基础。