摘要: 【目的】本研究旨在调查不同蛋白酶抑制剂对梨茎蜂Janus piri和梨瘿蚊Dasineura pyri幼虫中肠蛋白酶活性的影响。【方法】运用生化技术分别测定梨茎蜂2-5龄幼虫和梨瘿蚊1-4龄幼虫中肠pH值和4种中肠蛋白酶(总蛋白酶、强碱性胰蛋白酶、弱碱性胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶)活性，进一步在最适pH和幼虫龄期分别测定10种抑制剂对两种害虫幼虫中肠蛋白酶活性的影响。【结果】梨茎蜂和梨瘿蚊幼虫中肠平均pH值分别为8.2和7.6,两种害虫4种中肠蛋白酶活性均在3龄幼虫期最高。对梨茎蜂幼虫中肠总蛋白酶抑制效果最好的是5 mmol/L EDTA,其次是1 mmol/L TPCK;抑制强碱性胰蛋白酶活性效果最好的是1 mmol/L TPCK,抑制弱碱性胰蛋白酶效果最好的是10 mmol/L PMSF,抑制胰凝乳蛋白酶活性效果最好的是5 mmol/L EGTA。对梨瘿蚊幼虫中肠总蛋白酶活性抑制效果最好的是1 mmol/L TPCK,其次是50μg/mL STI;抑制强碱性胰蛋白酶活性效果最好的是5 mmol/L EDTA,抑制弱碱性胰蛋白酶活性效果最好的是10 mmol/L EDTA,抑制胰凝乳蛋白酶活性效果最好的是50μg/mL STI。【结论】对梨茎蜂和梨瘿蚊幼虫中肠总蛋白酶活性抑制效果较好的是TPCK, STI和EDTA;对幼虫中肠强碱性胰蛋白酶活性抑制效果较好的是EDTA和EGTA;对幼虫中肠弱碱性胰蛋白酶活性抑制效果较好的是PMSF, EDTA和TPCK;对幼虫中肠胰凝乳蛋白酶活性抑制效果较好的是EGTA。研究结果为开发与昆虫中肠蛋白酶和抑制剂有关的新型生物农药提供一定的理论参考价值。

摘要: 【目的】氟氯氰菊酯（cyfluthrin）是一种被广泛应用于农业害虫和卫生害虫防治的新型拟除虫菊酯类杀虫剂。本研究旨在探究氟氯氰菊酯对中华按蚊Anopheles sinensis的亚致死效应，为合理使用氟氯氰菊酯防治中华按蚊提供理论依据。【方法】采用WHO推荐的幼虫浸渍法处理中华按蚊4龄幼虫24 h,计算氟氯氰菊酯对中华按蚊4龄幼虫的LC₁₀和LC₃₀值；采用幼虫浸渍法以LC₁₀和LC₃₀浓度氟氯氰菊酯胁迫中华按蚊4龄幼虫24 h,统计F₀代雌雄成虫寿命和单雌产卵量，收集成虫所产卵为F₁代试虫，统计其孵化率、各发育阶段历期、羽化率、成虫产卵前期、总产卵前期和单雌产卵量，构建年龄-龄期两性生命表，预测各处理下中华按蚊种群动态。【结果】24 h内氟氯氰菊酯对中华按蚊4龄幼虫的LC₁₀和LC₃₀值分别为1.223×10^-3和4.454×10^-3 mg/L。与对照（去氯自来水处理）相比，LC₁₀和LC₃₀浓度氟氯氰菊酯处理中华按蚊4龄幼虫显著抑制了F₀代雄成虫寿命和单雌产卵量，且LC₃₀浓度氟氯氰菊酯显著缩短了F₀代雌成虫寿命。f_x7曲线显示，与对照组相比，LC₁₀和LC₃₀浓度氟氯氰菊酯处理中华按蚊4龄幼虫减少了其F₁代雌成虫产卵天数和产卵量；并且LC₁₀和LC₃₀浓度氟氯氰菊酯处理降低了F₁代l_xm_x,m_x和v_xj峰值，LC₁₀浓度氟氯氰菊酯处理中华按蚊4龄幼虫延后了其F₁代m_x峰的出现，而LC₃₀浓度氟氯氰菊酯将提前F₁代m_x峰的出现。s_xj,l_x和e_xj曲线显示LC₁₀和LC₃₀浓度的氟氯氰菊酯处理中华按蚊4龄幼虫会对其F₁代的存活率和期望寿命产生有利影响。与对照组相比，LC₁₀浓度氟氯氰菊酯处理组中华按蚊F₁代雌虫蛹历期、成虫前历期和雄虫卵历期显著延长，F₁代雄成虫寿命和总发育历期显著缩短；LC₁₀和LC₃₀浓度氟氯氰菊酯胁迫中华按蚊4龄幼虫显著升高了其F₁代成虫前期存活率，但显著减少了其F₁代单雌产卵量；LC₁₀浓度氟氯氰菊酯处理中华按蚊4龄幼虫显著延长了其F₁代平均世代周期（T）, LC₃₀浓度氟氯氰菊酯处理中华按蚊4龄幼虫却显著缩短了其F₁代平均世代周期。【结论】亚致死浓度(LC₁₀和LC₃₀浓度)氟氯氰菊酯胁迫显著抑制了中华按蚊F₁代繁殖力，提高了F₁代成虫的存活率和期望寿命，故对F₁代种群数量无显著影响。本研究结果为合理使用氟氯氰菊酯防治中华按蚊提供了理论依据。

摘要: 【目的】明确田间防治棉蚜Aphis gossypii的最佳时期及亚致死浓度的氟啶虫酰胺对花椒Zanthoxylum bungeanum棉蚜生长发育及繁殖的影响。【方法】采用浸叶法通过室内毒力测定氟啶虫酰胺对棉蚜成虫及不同龄期若虫的亚致死浓度，采用浸叶法测定亚致死浓度(LC₁₀和LC₃₀)氟啶虫酰胺处理24 h对棉蚜亲本（F₀）及其F₁子代成虫寿命和繁殖力的影响，计算F₀和F₁代的净增殖率、平均世代周期、内禀增长率、周限增长率和种群加倍时间等生命表参数。【结果】氟啶虫酰胺的亚致死浓度随棉蚜发育阶段的增长不断增加，24 h内氟啶虫酰胺对1-4龄若虫及成虫的LC₃₀值分别为22.939, 26.346, 36.050, 36.531和36.911 mg/L。LC₃₀和LC₁₀浓度的氟啶虫酰胺处理棉蚜成虫均能够降低其F₀和F₁代的雌成虫寿命和单雌产卵量，LC₃₀浓度氟啶虫酰胺处理组F₀代棉蚜雌成虫寿命为（6.15±0.45） d,显著短于对照组（清水处理）[（8.53±0.39） d],单雌产卵量为（9.53±0.44）粒，显著少于对照组[（25.08±0.61）粒], F₁代棉蚜雌成虫寿命为（9.06±0.44） d,显著短于对照组[（10.85±0.52） d],单雌产卵量为（15.76±0.40）粒，显著低于对照组[（28.06±0.45）粒]; LC₁₀浓度氟啶虫酰胺处理组F₀代棉蚜的雌成虫寿命为（7.45±0.37） d,与对照组[（8.53±0.39） d]无显著差异，单雌产卵量为（17.56±0.56）粒，显著少于对照组[（25.08±0.61）粒], F₁代棉蚜雌成虫寿命为（10.10±0.51） d,与对照组[（10.85±0.52） d]相比无显著变化，单雌产卵量为（22.40±0.45）粒，显著少于对照组[（28.06±0.45）粒]。LC₃₀浓度氟啶虫酰胺处理组F₀和F₁代棉蚜净增殖率分别为7.83±0.39和15.22±0.43,显著低于对照组（分别为22.57±0.64和23.87±1.25）,周限增长率分别为（1.83±0.12）和（1.65±0.06） d^-1,显著低于对照组[分别为（1.97±0.29）和（1.69±0.17） d^-1]; LC₁₀浓度氟啶虫酰胺处理组F₀和F₁代棉蚜净增殖率分别为15.17±0.46和18.65±0.55,显著低于对照组（分别22.57±0.64和23.87±1.25）; LC₃₀浓度氟啶虫酰胺处理组F₀代棉蚜平均世代周期（3.41±0.17） d,显著低于对照组[（4.61±0.21） d],内禀增长率为（0.60±0.23） d^-1,显著低于对照组[（0.68±0.17） d^-1]。【结论】氟啶虫酰胺对花椒棉蚜种群表现出较好的防治效果，尤其是对低龄棉蚜的防效最佳；亚致死浓度的氟啶虫酰胺对F₀和F₁代棉蚜的生长发育及繁殖均有抑制作用。本研究为合理使用氟啶虫酰胺防治花椒棉蚜提供了理论依据。

摘要: 【目的】本研究旨在明确黄曲条跳甲Phyllotreta striolata成虫行为活动的昼夜节律及不同时段及光照条件下停留的位置，为室内饲养、行为学研究与防控新技术开发提供依据。【方法】室内人工光暗条件下(光照强度5 000 lx,光周期16L∶8D)观察记录了黄曲条跳甲成虫移动、交配、取食与静息行为的昼夜节律，分析了特定行为的时间分配特征和停留位置，比较了500, 5 000和10 000 lx 3种光照强度条件下黄曲条跳甲行为活动的差异。【结果】静息是黄曲条跳甲成虫昼夜间主要行为模式，夜间22:00至次日早晨6:00为静息高峰；取食行为仅发生于白天8:00-18:00, 8:00达到取食高峰；交配行为仅见于夜间0:00-2:00。自6:00-18:00黄曲条跳甲成虫选择叶背和心叶以及处于养虫笼壁的频次占比显著高于黑夜，而停留于土中与叶片表面的频次占比黑夜显著高于白天。光照强度显著影响黄曲条跳甲成虫行为活动，500 lx光照强度下的取食行为频次占比显著减少，但光照强度增加至5 000 lx及以上时静息行为的频次占比显著减少；5 000 lx光照强度下黄曲条跳甲成虫取食行为最为常见，且与10 000 lx光照强度条件下相比移动行为频次占比显著减少。500 lx光照强度下，成虫停留在叶背和心叶的频次占比显著少于其他两种光照强度下的，而在5 000 lx光照强度下，成虫更倾向于停留在叶片表面。【结论】黄曲条跳甲成虫的移动、取食、交配和静息行为及停留的位置具有明显的昼夜节律，且不同行为的发生频率和活动峰值的时间点有所差异，且各种行为活动及停留位置受光照强度的影响。

摘要: 【目的】本研究旨在测定不同存储温度和时间下，七星瓢虫Coccinella septempunctata、异色瓢虫Harmonia axyridis和龟纹瓢虫Propylaea japonica卵孵化率和孵化时间，探究3种商品化瓢虫卵的最佳贮存温度和时间。【方法】将七星瓢虫、异色瓢虫和龟纹瓢虫室内饲养新产的卵置于6, 8和10℃下，冷藏3, 5, 7, 9, 11, 13和15 d后测定卵的孵化率；将七星瓢虫、异色瓢虫和龟纹瓢虫新产卵分别置于15, 20和25℃下，测定卵的孵化时间。【结果】七星瓢虫卵在6, 8和10℃下冷藏5 d内孵化率均高于80%, 6, 8和10℃下冷藏超过5 d时孵化率差异显著，10℃下卵孵化率最高，10℃下11 d时孵化率可达到56.1%。异色瓢虫卵对低温更敏感，在10℃下冷藏7 d时孵化率为85.3%,而6℃下冷藏7 d孵化率仅有6.1%;在10℃下冷藏11 d内孵化率不低于50%。龟纹瓢虫卵对低温最敏感，在10℃冷藏7 d时孵化率降为34.3%,在6和8℃冷藏3 d时孵化率降为0。这3种瓢虫卵的孵化时间随温度的降低而延长，15℃下为7～8 d, 20℃下为4～5 d, 25℃下为2～3 d。【结论】七星瓢虫和异色瓢虫卵的最佳贮存温度均为10℃, 10℃下冷藏7 d内其孵化率均高于85%。龟纹瓢虫卵不适合冷藏。可通过降低孵化温度至15℃延长瓢虫卵的货架期。

摘要: 传粉昆虫(包括蜂、蝴蝶、甲虫、蝇、蛾等)在生态系统中扮演着不可替代的重要角色，它们直接影响着植物的繁衍和生态平衡。随着全球人口的高速增长和社会发展，出现了生态破坏、环境污染等严重问题，加剧了传粉昆虫面临的挑战，如栖息地丧失、化学农药的使用、气候变化和病原体传播的协同效应，这些都对生态系统的稳定性产生了诸多负面影响。因此，加强对传粉昆虫的研究，探索其生理、形态、行为、生态等方面的特征及其与植物的协同进化关系，不仅有助于深入理解生物多样性和生态系统的功能机制，也为保护和利用传粉昆虫资源提供了基础性科学依据。本期传粉昆虫专辑汇聚了国内学者有关传粉昆虫的最新研究成果，有助于促进传粉昆虫研究领域的交流与合作，推动本领域学科发展，为进一步推进我国生态文明建设和环境的可持续发展提供了科学依据。

摘要: 【目的】本研究旨在克隆东方蜜蜂Apis cerana基质金属蛋白酶14（matrix metalloproteinase-14, MMP14）基因AcMMP14,分析其分子特征和表达模式，为持续深入开展AcMMP14的功能研究提供参考和依据。【方法】提取东方蜜蜂6日龄工蜂幼虫肠道总RNA,PCR扩增AcMMP14的编码序列（coding sequence, CDS）。使用相关生物信息学软件预测AcMMP14的理化性质和分子特征，鉴定东方蜜蜂和其他蜂种MMP14的结构域和保守基序，并进行系统进化分析。采用RT-qPCR检测AcMMP14在工蜂卵、幼虫、预蛹、蛹和不同日龄成虫，工蜂成虫触角、脑、表皮、脂肪体、毒腺、中肠和咽下腺及东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae接种刚出房的1日龄工蜂后1-4 d时中肠中的相对表达量。【结果】AcMMP14的分子式为C₃₀₆₈H₄₅₈₁N₈₀₃O₉₁₅S₂₀,分子量约为68.00 kD,脂溶系数为64.12,等电点为5.85,平均亲水系数为-0.47,含1个信号肽和36个磷酸化位点，可同时定位于线粒体、细胞核和细胞质。东方蜜蜂与其他10种蜂的MMP14中均含有3个相同的结构域和5个相同的保守基序。东方蜜蜂与大蜜蜂A.dorsata的MMP14的氨基酸序列一致性达94.23%,且在进化树上聚为一支。AcMMP14在东方蜜蜂工蜂卵、3日龄幼虫、 1和2日龄预蛹及4日龄蛹中差异表达，在4日龄蛹中的表达量最高且显著高于3日龄幼虫和2日龄预蛹中的表达量。AcMMP14在不同日龄工蜂成虫体内差异表达，在15日龄成虫体内的表达量最高且显著高于1, 2, 6, 12和17日龄成虫体内的表达量。AcMMP14在东方蜜蜂工蜂成虫的7种不同组织中差异表达，在触角中的表达量最高且显著高于脑、表皮、脂肪体、毒腺、中肠和咽下腺中的表达量。与未接种的对照组相比，东方蜜蜂微孢子虫接种后1和2 d时工蜂成虫中肠中AcMMP14的表达量显著下调，3和4 d时工蜂成虫中肠中AcMMP14的表达量下调但差异不显著。【结论】AcMMP14为潜在的亲水性蛋白和分泌蛋白；AcMMP14在东方蜜蜂工蜂不同发育阶段和成虫组织中发挥潜在的重要功能；工蜂成虫中肠中AcMMP14在东方蜜蜂微孢子虫的第一个增殖周期前期被激活表达。

摘要: 【目的】本研究旨在鉴定中华蜜蜂Apis cerana cerana幼虫肠道中体液免疫通路相关基因及其剪接异构体，为持续开展中华蜜蜂体液免疫通路相关基因和剪接异构体的分子克隆与功能研究提供资源和基础。【方法】通过Blast将前期基于中华蜜蜂工蜂幼虫肠道转录组的纳米孔(nanopore)测序数据鉴定到的所有全长转录本分别比对到KEGG和Nr数据库，筛选出体液免疫信号通路相关基因及其剪接异构体。利用GffCompare软件将鉴定到的体液免疫信号通路相关基因比对到东方蜜峰A.cerana参考基因组(版本号：ACSNU-2.0),以优化已注释基因的结构。使用Astalavista软件鉴定体液免疫信号通路相关基因的可变剪接(alternative splicing, AS)事件类型，再统计不同类型的AS事件数目；采用RT-PCR验证AS事件的真实性。利用TAPIS pipeline软件预测体液免疫信号通路相关基因所含可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation, APA)位点，并通过MEME软件鉴定APA位点上游50 bp的基序(motif);通过3′RACE验证APA位点的真实性。【结果】共鉴定到JNK-p38-MAPK信号通路相关的23个基因及135条剪接异构体，Toll信号通路相关的21个基因和130条剪接异构体，JAK/STAT信号通路相关12个基因和53条剪接异构体，IMD信号通路相关10个基因和46条剪接异构体。注释到东方蜜蜂参考基因组上体液免疫通路相关的18个基因的5′UTR被延长，19个基因的3′UTR被延长，8个基因的5′UTR和3′UTR同时被延长。共鉴定到体液免疫信号通路相关的16个基因的60次AS事件，其中最丰富的类型是可变5′端剪接(alternative 5′splice site, A5SS)(26次)。通过RT-PCR证实了随机选择的3个基因的AS事件的真实性。共鉴定到体液免疫信号通路相关的47个基因含有1个及以上的APA位点，其中含有1个APA位点的基因最多。在APA位点上游鉴定到3条一致性序列：ATATAWAWWTATATRWATNYD, HVVN VNNDBDNBHNDDDNWNNNNNWNNH和BSHDVWDRDBDDDKKNVWDRDKHHVKHDVNNVWDND BHWHB。3′RACE结果证实了随机选择的2个基因所含APA位点的真实性。【结论】首次鉴定到中华蜜蜂幼虫肠道体液免疫信号通路相关的66个基因和364条剪接异构体，优化了东方蜜蜂参考基因组上注释到体液免疫通路的29个基因结构，挖掘出体液免疫相关的60次AS事件和139个APA位点，并证实了体液免疫相关基因的AS事件和APA位点的真实性。

摘要: 【目的】本研究旨在明确意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica piR-ame-1186994的调控功能，为进一步探究piR-ame-1186994的调控作用机制提供科学依据。【方法】通过Stem-loop RT-PCR和Sanger测序分别验证piR-ame-1186994在意大利蜜蜂6日龄工蜂成虫中肠、 12日龄雄蜂成虫精巢和7日龄蜂王成虫卵巢中的表达和序列真实性。使用相关软件预测piR-ame-1186994的靶mRNA并进行GO和KEGG数据库注释，进而构建发育信号通路、能量代谢通路及细胞和体液免疫通路相关调控网络。饲喂刚出房工蜂成虫piR-ame-1186994的模拟物(mimic)和mimic-NC(阴性对照组),利用RT-qPCR检测工蜂成虫中肠中的piR-ame-1186994及其关键2个关键靶基因(YAP1和PLD2)的相对表达量。【结果】在意大利蜜蜂6日龄工蜂成虫中肠、 12日龄雄蜂成虫精巢和7日龄蜂王成虫卵巢中均扩增出piR-ame-1186994的特异性片段。piR-ame-1186994共靶向1 097条mRNA,可注释到新陈代谢过程、结合和细胞等30条GO条目以及Wnt信号通路、内吞作用和催产素信号通路等182条KEGG通路。其中，分别有36和16条靶mRNA涉及5条发育相关信号通路(mTOR, Wnt, Hippo, AMPK和Notch信号通路)和4条能量代谢相关通路(氨基糖和核苷酸糖代谢、果糖和甘露糖代谢、糖酵解/糖异生及磷酸戊糖通路)。此外，分别有29和8条靶mRNA涉及4条细胞免疫通路(溶酶体、内吞作用、吞噬体和泛素介导的蛋白水解)和3条体液免疫通路(PI3K-Akt, MAPK和FoxO信号通路)。相较于阴性对照组mimic-NC, mimic-piR组中piR-ame-1186994的表达量在1, 3和5日龄工蜂中肠中显著上调，在2和4日龄工蜂中肠中极显著上调；靶基因YAP1的表达量在1, 3, 4和5日龄工蜂中肠中极显著下调，在2日龄工蜂中肠中显著下调；靶基因PLD2的表达量在2, 3和5日龄工蜂中肠中显著下调，在4日龄的工蜂中肠中极显著下调。【结论】piR-ame-1186994在意大利蜜蜂工蜂中肠、雄蜂精巢和蜂王卵巢中存在与表达；piR-ame-1186994通过靶向和负调控YAP1和PLD2的表达潜在调节工蜂中肠发育和免疫。

摘要: 蜂王浆是深受消费者喜爱的蜂产品之一，王浆主蛋白(major royal jelly proteins, MRJPs)具有调控蜜蜂级型分化和改善人体健康的重要功能。工蜂咽下腺是蜂王浆蛋白质的“生产车间”,其合成和分泌活性直接影响到蜂王浆品质。近年来，不同研究在咽下腺形态结构、转录组水平和蛋白组水平揭示了蜂种、发育阶段和环境条件调控MRJPs合成与分泌的分子基础，为提升蜂王浆品质提供理论基础。本文总结了MRJPs组成和功能，围绕蜜蜂咽下腺和影响MRJPs合成和分泌的因素进行了综述，并对探究蜜蜂咽下腺合成和分泌MRJPs的研究方向进行了展望：(1)深入了解咽下腺合成MRJPs的内在机理；(2)绘制咽下腺合成MRJPs的作用路径；(3)从细胞层面剖析咽下腺合成MRJPs的关键细胞类型及功能。以期为开展MRJPs合成机制相关的研究提供新视角。