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  • 翟亚南; 孙泉; 陈柏安; 卢静
    实验动物科学 2024年第41卷第6期 DOI:
    关键词: 长爪沙鼠;;血脂异常;;年龄变化
    摘要: 目的 探究不同月龄长爪沙鼠的血脂变化及分化趋势。方法 选取普通鼠饲料饲喂至2、4、6、8、10、12、14和16月龄的长爪沙鼠各20只,雌雄各半。动物安乐死后获取血清,用于总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)4项指标的检测,比较自然生长发育下不同阶段长爪沙鼠的血脂水平,自然分化为血脂正常组及血脂异常组;同时采集肝最大叶标本两份,一份作常规HE染色的组织形态学观察,一份作天狼星红染色的胶原纤维堆积观察。结果 2月龄和4月龄组血脂未发生异常,6月龄沙鼠血清三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)指标开始出现升高,从8月龄开始血脂异常动物与血脂正常动物相比血清TC、TG明显升高(P<0.01),8月龄和16月龄血脂异常动物与未发生血脂异常动物相比血清LDL-C明显升高(P<0.01)。血脂异常的动物中,8月龄组占比仅20%,10、12及14月龄组占比均未超过50%,16月龄组动物占比已高达70%,且雄性动物较多。病理学检查,2月龄组动物肝代谢旺盛,出现双核肝细胞分裂,无其他异常发现,8月龄动物开始出现脂肪空泡,至16月龄组肝细胞大量死亡,肝索不清晰,肝血窦狭窄,甚至消失,肝细胞发生严重的脂肪变性,14月龄胶原纤维轻度增多,16月龄胶原纤维进一步明显堆积。结论 使用普通鼠饲料饲喂至16月龄的雄性长爪沙鼠能够出现典型且稳定的血脂异常性状,为研究复制与人类相似病变的自发型高脂血症动物模型提供基础支持。

  • 高萍; 赵丽薇; 李瑞生; 李晓娟; 李爱民
    实验动物科学 2024年第41卷第6期 DOI:
    关键词: SIRT3;;类风湿关节炎;;免疫紊乱;;软骨损伤
    摘要: 目的 利用CRISPR技术敲除SIRT3胶原来诱导建立类风湿关节炎大鼠模型,分析对其免疫紊乱和软骨损伤的影响。方法 实验分成WT组(野生型)、KO组(CRISPR技术敲除SIRT3)、WT-RA组(野生型类风湿关节炎大鼠模型)、KO-RA组(CRISPR技术敲除SIRT3类风湿关节炎大鼠模型)。检测大鼠胸腺指数和脾指数,Western blot方法检测SIRT3、MMP-2、MMP-3、MMP-9蛋白表达,流式细胞术分析CD4<sup>+</sup>/T淋巴细胞和CD8<sup>+</sup>/T淋巴细胞百分比,ELISA法检测血清中Th1(TNF-α、IFN-γ)和Th2(IL-4、IL-10)细胞因子。结果 与WT组比较,WT-RA组SIRT3、CD4<sup>+</sup>、CD4<sup>+</sup>/CD8<sup>+</sup>、胸腺指数、脾指数、TNF-α、IFN-γ、MMP-2、MMP-3、MMP-9水平显著升高,CD8<sup>+</sup>、IL-4、IL-10水平显著降低(P<0.05)。与KO组比较,KO-RA组CD4<sup>+</sup>、CD4<sup>+</sup>/CD8<sup>+</sup>、胸腺指数、脾指数、TNF-α、IFN-γ、MMP-2、MMP-3、MMP-9水平显著升高,CD8<sup>+</sup>、IL-4、IL-10水平显著降低(P<0.05)。与WT-RA组比较,KO-RA组SIRT3、CD4<sup>+</sup>、CD4<sup>+</sup>/CD8<sup>+</sup>、胸腺指数、脾指数、TNF-α、IFN-γ、MMP-2、MMP-3、MMP-9水平显著降低,CD8<sup>+</sup>、IL-4、IL-10水平显著升高(P<0.05)。结论 利用CRISPR技术敲除SIRT3缓解胶原诱导的类风湿关节炎大鼠造成的免疫系统的紊乱和软骨组织的损伤。

  • 任美丹; 朱金墙
    实验动物科学 2024年第41卷第6期 DOI:
    关键词: 类器官;;动物实验;;实验动物伦理;;实验动物替代技术
    摘要: 实验动物伦理问题一直是动物实验中不可忽视的问题,并越来越受关注。随着实验动物“3R”(替代、减少、优化)原则及各种保障实验动物福利法律法规的实施,发展实验动物替代技术势在必行。近年来各种类器官技术飞速发展,并展现出巨大优势,有望成为解决实验动物伦理问题的办法之一。本文综述了动物实验中存在的问题以及类器官的发展与应用,以期为实验动物替代技术的发展以及实验动物伦理问题的解决提供新的思路。

  • 陈文轩; 罗小英; 全志浩; 胡学瀚; 胡晶
    实验动物科学 2024年第41卷第6期 DOI:
    关键词: 高凝状态;;小鼠模型;;高脂饮食
    摘要: 目的 探究高脂饲料喂养KM小鼠造成小鼠血液高凝状态的可行性,为高凝状态的研究提供合适、简便的动物造模方法。方法 将KM小鼠随机分为对照组和实验组两组:对照组用普通饲料喂养,实验组用高脂饲料(脂肪供能占比60.65%)喂养。于第30天测量小鼠体质量并采尾静脉血测定小鼠活化部分凝血酶原时间(activated partial thromboplastin time, APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time, PT),通过比较对照组与实验组小鼠血液凝血指标的差异,判断高脂饲料喂养是否能够造成小鼠血液高凝状态的发生。结果 在相同的饲养条件及采血止血方式下,相较于对照组,实验组通过高脂饲料喂养30 d后,KM小鼠体质量明显升高(P<0.001),PT、APTT明显缩短且有统计学意义(均P<0.01),实验组小鼠血液呈现高凝状态。结论 通过高脂饲料喂养可成功构建PT、APTT缩短的小鼠高凝状态模型。

  • 刘甦苏; 杨远松; 吴勇; 赵皓阳; 王锡岩; 梁春南; 范昌发
    实验动物科学 2024年第41卷第6期 DOI:
    关键词: 脊髓灰质炎病毒;;qPCR方法;;病毒载量;;小鼠模型
    摘要: 目的 建立减毒的脊髓灰质炎病毒(poliovirus, PV) Sabin株的荧光定量PCR检测方法,为PV病毒载量检测提供快速、精准的检测方法。方法 首先,针对PV的3个血清型VP1基因编码特异序列构建标准质粒;其次,将经PCR鉴定和测序分析验证的质粒按10倍稀释制作标准曲线,从而建立检测PV的SYBR Green荧光定量PCR(qPCR)方法,并验证该方法的特异性、敏感性和重复性;最后,将本方法用于检测经减毒活疫苗株感染人源化小鼠模型组织中的病毒载量。结果 经PCR鉴定和测序分析,标准质粒序列正确;PV 3种血清型的标准曲线特异性好,log拷贝数与Ct值具有良好的线性关系,相关性系数(R)均大于0.99,扩增效率在99%~110%,检测灵敏度为10 copies/μL,高于普通PCR 100倍。荧光定量PCR反应的扩增曲线呈S型,且熔解曲线主峰单一,表明特异性较好,扩增条件可靠。应用该方法检测感染后hPVR小鼠模型的不同组织的病毒载量,发现仅在脊髓和脑组织中检测出PV,呈现神经组织噬性。结论 本文建立的SYBR Green荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏度和重复性,可用于检测感染的hPVR小鼠模型组织中的病毒载量,为后续研究PV发病机制及PV疫苗体内安全性及有效性提供了可靠的实验方法。

  • 乔彦华; 彭博雅; 陈柏安; 卢静
    实验动物科学 2024年第41卷第5期 DOI:
    关键词: 长爪沙鼠;;SPF封闭群;;繁殖特性;;生长曲线
    摘要: 目的 了解SPF级封闭群长爪沙鼠的生长发育及繁殖性能,进一步完善其生物学特性,为长爪沙鼠标准化研究及相关科研工作提供数据参考。方法 从饲养在屏障环境中的SPF级封闭群长爪沙鼠群体中随机挑选44对繁殖性能良好的长爪沙鼠进行配种,记录并统计相关繁殖信息。随机挑选出生后的长爪沙鼠80只(雌雄各半),定期称重并绘制1~77日龄生长曲线。结果 长爪沙鼠窝产仔数主要分布在4~9只,占总胎数的84.2%。胎间隔主要分布在24~35 d,占总胎数的72.1%。初产日龄主要分布在82~134 d,占总雌鼠量的77%。离乳率为100%的胎数占总胎数的79%。结论 屏障环境中饲养的SPF级封闭群长爪沙鼠繁殖性能良好,母性良好且产后即可交配受孕。长爪沙鼠最适离乳日龄为25日龄。25~42日龄长爪沙鼠体质量增长最快。42~77日龄雄性长爪沙鼠体质量显著大于雌性。

  • 陈玥; 苏丹; 贵文娟; 孙效容
    实验动物科学 2024年第41卷第5期 DOI:
    关键词: 树鼩;;消化系统;;肝炎;;组织学
    摘要: 目的 观察人与正常成年树鼩消化系统主要组织器官的组织学特性,为树鼩作为人类疾病动物模型在消化系统中的应用提供组织学依据。方法 正常成年树鼩6只,雌雄各半,动物安乐死后大体解剖,取材舌、食管、肝、胆囊、胰腺、胃、胃幽门腺、十二指肠和空肠组织等消化系统主要组织器官,固定后常规包埋切片进行HE染色。观察树鼩消化系统主要器官的组织学特征。结果 树鼩消化系统主要器官组织学特点基本与人类似,其中舌、食管、肝、胆囊、胃、胃幽门腺、十二指肠、空肠形态结构与人相似度高。但树鼩消化系统组织中食管和胰腺与人略有差异,人食管肌层较厚,树鼩食管肌层较薄。人胰腺中胰岛形状以球形为主,树鼩胰腺中胰岛形状多变,以长梭形和椭圆形为主,球形为辅。结论 树鼩消化系统主要器官与人类似,结合树鼩基因学特点,树鼩作为消化代谢系统尤其是各类病毒性肝炎和糖尿病等疾病的易感动物可广泛运用于消化系统疾病实验动物的研究。

  • 赵迎峰; 马畅; 刘彪; 尤金炜; 张旭亮; 恽时锋
    实验动物科学 2024年第41卷第5期 DOI:
    关键词: 小鼠细小病毒;;小鼠肝炎病毒;;小鼠诺如病毒;;多重PCR检测方法
    摘要: 目的 建立一种同时检测小鼠细小病毒(MVM)、肝炎病毒(MHV)和诺如病毒(MNV)的多重PCR检测方法。方法 分别根据MVM、MHV和MNV基因保守区应用软件设计特异性引物,构建在同一反应体系中可同时检测MVM、MHV和MNV的多重PCR检测方法,验证其特异性、敏感性及重复性,并进行初步检测应用。结果 通过优化PCR扩增条件成功建立多重PCR检测方法,特异性实验结果表明,该方法可同时扩增MVM、MHV和MNV的目的片段,片段大小与预期相符,未出现非特异性片段;敏感性测试显示,MVM、MHV和MNV三种病毒的最低检测下限为10~2、10~4、10~2 copies/μL;重复性实验显示该方法在不同时间、不同场所应用的重复性稳定。应用该方法对287份小鼠结肠匀浆样品进行检测,与单重PCR检测结果完全一致。结论 所建立的MVM、MHV和MNV三种病毒多重PCR检测方法具有特异性高、敏感性强和重复性优的特点,适用于三种病原体感染的临床样品检测和大量样品的流行病学调查。

  • 刘燕; 李宇轩; 李杰; 何青鋆; 张淑静
    实验动物科学 2024年第41卷第5期 DOI:
    关键词: 动物运动轨迹;;旷场实验;;规范化研究;;技术经验
    摘要: 目的 本研究旨在探讨旷场实验操作的要求和注意事项,并通过动物运动轨迹分析系统的应用,优化实验流程,以提高数据的可靠性和实验效率。方法 通过对已发表的期刊论文进行综合分析,识别出旷场实验中常见的操作不规范及数据解读不准确的问题。随后,基于动物运动轨迹分析系统,提出旷场实验的标准化操作程序和注意事项,并进行详实的解读。结果 分析发现,当前旷场实验中存在实验数据稀缺、不可靠,甚至无有效数据可用的情况,主要由于操作不规范和结果解读不准确。通过实施标准化的操作流程和使用先进的运动轨迹分析系统,能够显著提升实验数据的质量和可靠性。结论 规范化旷场实验操作和正确使用动物运动轨迹行为学分析软件是获得高质量实验数据的关键。实施这些改进措施可以减少实验资源的浪费,提高研究的科学性和有效性。

  • 郑薇; 夏祺悦; 刘科亮; 罗玲
    实验动物科学 2024年第41卷第5期 DOI:
    关键词: SD大鼠;;抗凝比例;;凝血酶原时间;;活化部分凝血活酶时间
    摘要: 目的 探讨不同抗凝比例对SD大鼠凝血结果的影响。方法 SD大鼠80只,雌雄各半。腹腔静脉采血,部分进行血钙(Ca<sup>2+</sup>)、血细胞比容(HCT)和血小板(PLT)的检测,其余按照枸橼酸钠抗凝管1∶2、1∶4、1∶6、1∶8和1∶10的抗凝比例,进行凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)的检测,并分析结果。结果 SD大鼠的Ca<sup>2+</sup>和HCT与人类正常值相近,但PLT远大于人类PLT的正常值范围。APTT随着抗凝剂量增加时间延长,各抗凝组间差异有统计学意义(P<0.05),PT随着抗凝剂量增加时间延长,各抗凝组与1∶2或1∶4组间差异有统计学意义(P<0.05)。APTT在抗凝比1∶8~1∶10时凝固曲线基线期缩短,PT在抗凝比1∶2~1∶4时凝固曲线有异常波动。结论 SD大鼠最优抗凝比应适当高于人类,在1∶6左右能降低不合格标本的检出率,给动物实验提供更可靠的检测结果。