摘要: 目的 通过组织实施换气次数检测实验室能力验证计划，探索实验动物设施环境领域能力验证方式，初步了解相关实验室在标准应用及检测水平的现状，规范换气次数检测方法，确保检测结果的准确性和可靠性。方法 2023年9—11月，中国食品药品检定研究院负责组织开展实验动物设施换气次数检测的实验室能力验证计划（编号NIFDC-PT-417）。此次能力验证计划的现场测试分为两个部分：笔试和实际操作。笔试采用开卷形式，判断题着重考察参加者对标准条款的掌握情况，应用题则是通过构建模拟检测场景考察实验人员对数据处理的应用；实际操作按照中国合格评定国家认可委员会（China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS）相关准则，通过分割水平样品对的形式，准备2个实验房间作为能力验证样品。2个房间均按照CNAS相关要求，经过均匀性、稳定性测试，并且测试结果合格。参与能力验证的实验室需要对这2个实验间各进行3次测试，要求在规定时间内完成换气次数的检测和计算，并提交本次检测的结果报告单和原始记录。结果 共有27家实验室报名并参加本次能力验证，均在规定时间内反馈结果，所有参测实验室的结果均被评定为满意。结论 本次能力验证客观且科学地评估了国内部分实验室在换气次数方面的检测能力，有效地促进了行业整体检测水平的提升，为监管部门规范检测机构提供了技术支撑，为委托单位购买检测服务提供了可靠的参考依据。通过本次能力验证，组织方发现部分实验室对仪器的校准及校准结果的利用不够充分，未来需进一步完善相关标准，以提高检测的准确性和可靠性。

摘要: 目的 应用长链酰基辅酶A合成酶1 (acyl-CoA synthetase long-chain family member 1,ACSL1)抑制剂Triacsin C联合高脂饮食建立新的高血糖肥胖小鼠心功能减退模型，以模拟肥胖相关2型糖尿病患者脂肪组织和心功能的变化。方法 将20只SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组：Con组（对照组，腹腔注射柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液）和TC组（实验组，腹腔注射Triacsin C）。连续注射4周后，2组小鼠均给予高脂饲料喂养，自实验开始每8周监测小鼠体重及糖耐量。以空腹血糖>8 mmol/L或餐后2 h血糖>15 mmol/L视为造模成功。观测2组小鼠左心室舒张末期内径（left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD）、左心室收缩末期内径（left ventricular endsystolic diameter,LVESD）、舒张末期室间隔厚度（end-diastolic interventricular septal thickness,EDIVS）、左心室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）和左心室短轴缩短分数（left ventricular short-axis fractional shortening,FS）等心功能指标的变化。HE染色后观测小鼠附睾白色脂肪组织（white adipose tissue,WAT）及背部棕色脂肪组织（brown adipose tissue,BAT）形态和面积的变化；采用免疫荧光法分析棕色脂肪组织血管内皮标志蛋白CD31和棕色脂肪组织标志蛋白UCP1的变化；采用蛋白质印迹法检测小鼠心肌组织中ACSL1表达的变化。结果 Con组和TC组小鼠空腹血糖分别为（8.14±1.43） mmol/L和（8.18±0.85） mmol/L (P>0.05)，餐后2 h血糖浓度分别为（19.8±4.01） mmol/L和（22.60±3.97） mmol/L (P<0.05)，表明本研究中两组糖尿病小鼠模型均造模成功。与Con组相比，TC组小鼠葡萄糖耐量较差，LVEDD、LVEF和FS下降明显（P<0.05）,WAT及BAT面积明显增大（P<0.05）,CD31、UCP1的表达量明显减少（P<0.05），心肌组织ACSL1表达明显减少（P<0.05）。结论 Triacsin C联合高脂饮食制备新型高血糖肥胖小鼠心功能减退模型是可行的，较单纯高脂饮食诱导2型糖尿病模型出现明显的棕色脂肪组织白色化、胰岛素抵抗及心功能减退现象。

摘要: 脓毒症是机体因感染和免疫失调引起的多脏器功能衰竭综合征，影响心脏、肺脏、肾脏、肝脏、大脑等多个重要器官，致死率极高。建立各器官功能衰竭综合征相应的动物模型是明确其发病机制、研究潜在有效药物及评估治疗方案有效性与安全性不可或缺的一环。本文首先对脓毒症相关脏器损伤的经典造模方式进行总结，指出脓毒症的经典造模方式包括破坏肠道屏障组织完整性和植入病原体或毒性药物。前者主要包括盲肠结扎穿刺法、升结肠植入支架法和盲肠结扎切口法，后者根据模拟临床感染途径的不同分为腹腔注射、静脉注射和气道内给药，其中以盲肠结扎穿刺法和脂多糖腹腔注射最为常见。其次，本文归纳总结了脓毒症致心肌损伤、急性肺损伤、急性肾损伤、急性肝损伤、脓毒症相关脑病的动物模型常见的造模方法和模型评估方法，指出几乎所有器官损伤都用到了经典造模方式，对不同器官损伤模型根据发病机制的不同进行了相应的补充。比如，除经典造模方式外，气管内滴注脂多糖进行脓毒症致急性肺损伤的造模方式更能模拟肺屏障功能损伤；盲肠结扎穿刺法后气管内给予假单胞菌进行二次打击的脓毒症致急性肾损伤造模方式能表现出更严重的急性肾损伤；半乳糖胺腹腔注射是较为成熟的脓毒症致急性肝损伤的造模方式；颅内注射脂多糖是脓毒症致脑功能障碍可行的造模方式。另外，除造模方式不同外，根据实验目的的不同，给药时间、给药剂量和实验时间节点也均存在差异。本综述通过对脓毒症致心肌病、急性肺损伤、急性肾损伤、急性肝损伤、脑功能障碍的动物模型研究进展进行介绍，以期为动物模型的选择和实验设计的优化提供一定参考。

摘要: 目的 通过1例新西兰白兔系统性淀粉样变性的病理学诊断，为实验动物淀粉样变性的诊断提供参考。方法 在一项为期6个月的重复滴眼给药毒性试验中，发现1只新西兰白兔的常规大体解剖检查异常，随后将其各脏器组织制作成石蜡切片，进行苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色和刚果红染色，于光学显微镜和偏振光显微镜下观察其病理组织学特征。结果 大体解剖后肉眼形态观察见该例动物的脾脏偏大，肺脏颜色和质地改变。对各脏器组织进行HE染色后显示：脾脏组织结构被破坏，脾脏白髓周围被致密淀粉样沉积物以结节环的形式包围，白髓可见压力性萎缩；颌下淋巴结、肠系膜淋巴结以及回肠、圆小囊、蚓突、空肠、盲肠和直肠亦可见淀粉样蛋白沉积。刚果红染色显示，各受影响脏器组织内淀粉样蛋白呈鲑鱼粉色，在偏振光显微镜下呈现特殊的苹果绿双折光。结论 该例新西兰白兔的各脏器组织病理特征符合系统性淀粉样变性的诊断特征。

摘要: 目的 比较6种复合固定液对金黄仓鼠视网膜组织石蜡切片的影响，优化金黄仓鼠视网膜组织石蜡切片的固定方法。方法 取18只雄性SPF级金黄仓鼠，随机分为6组，每组3只。每只动物经腹腔注射戊巴比妥钠麻醉后，分别使用4%多聚甲醛、Bouin's、Carnoy、Davidson's、Zenker和Helly固定液进行心脏灌注固定。将每只动物的眼球组织取出后制作眼杯，并投入对应的复合固定液中固定，48 h后取出进行石蜡包埋，并将包埋块在切片机下切片，然后进行苏木精-伊红（hematoxylin and eosin,HE）染色。在光学显微镜下观察视网膜组织细胞的形态学特征并进行双盲法评分，统计分析各种复合固定液的固定效果和染色质量。结果 Davidson's固定液固定后的切片中，视网膜完整无断裂，各层结构清晰，细胞核形态良好，视网膜与巩膜、葡萄膜连接紧密；4%多聚甲醛、Bouin's和Carnoy固定液固定的切片中均有不同程度的视网膜断裂以及视网膜与巩膜脱离现象；Zenker和Helly固定液固定后的切片质量最差，视网膜组织脱落明显，裂隙大，各层细胞不清晰，染色淡。对视网膜细胞形态特征进行双盲法评分后，SPSS 27.0软件分析结果显示：6种固定液的平均得分差异有统计学意义（P<0.001），其中Davidson's固定液>4%多聚甲醛>Bouin's固定液>Carnoy固定液>Helly固定液>Zenker固定液；Zenker固定液和Helly固定液与其他4种试剂的平均得分相比均有显著差异（P<0.001），其他试剂之间两两相比无明显差异（P>0.05）。结论 Davidson's固定液染色效果最佳，4%多聚甲醛和Bouin's固定液染色效果次之，Carnoy固定液染色效果较差，Zenker固定液和Helly固定液染色效果最差。据此提示，金黄仓鼠视网膜组织的固定首选Davidson's固定液，其次为4%多聚甲醛、Bouin's和Carnoy固定液。

摘要: 目的 研究不同光照时长对发育期NIH小鼠体重和学习记忆能力的影响。方法 实验选取体重相近的发育期NIH小鼠40只，雌雄各半。小鼠经每天12 h光照时长适应性饲养1周后，被随机分为每天0、6、12、18、24 h光照时长组，每组8只，实验周期为7周，其中前5周为不同光照时长条件下的饲养阶段，后2周为行为学实验阶段。通过体重监测以及T型迷宫、新位置识别和八臂迷宫等行为学实验，分析光照时长对小鼠体重和学习记忆能力的影响。结果 在光照处理期间，各组小鼠间的体重变化无显著差异（P>0.05）；在光照处理第2周和第3周，每天24 h光照时长组小鼠的体重增长量显著高于每天0 h和6 h光照时长组（P<0.05）。在光照处理5周后，T型迷宫实验中，每天0 h光照时长组小鼠的潜伏期时间极显著长于每天12 h光照时长组（P<0.01）；每天24 h光照时长组小鼠的潜伏期时间显著长于每天12 h光照时长组（P<0.05）。新位置识别实验中，每天12 h光照时长组小鼠的辨别指数和新位置观察时间均长于其他组，且与每天18 h光照时长组差异极显著（P<0.01），与每天24 h光照时长组差异显著（P<0.05）；八臂迷宫实验中，每天12 h光照时长组小鼠找到饲料的时间、参考记忆错误比率和工作记忆错误比率均短于每天0 h光照时长组，且差异显著（P<0.05）；而每天24 h光照时长组小鼠的工作记忆错误比率高于每天12 h光照时长组，且差异显著（P<0.05）。结论 每天24 h光照会影响NIH小鼠的体重增长，而每天光照时长超过18 h或低于6 h会减弱NIH小鼠的学习记忆能力。

摘要: 目的 建立大鼠中重度膝骨关节炎模型，为中重度膝关节炎发病机制及其防治方法研究奠定基础。方法 选用30只雄性SD大鼠，随机分为3组：假手术组、模型8周组、模型20周组，每组各10只。模型8周组和模型20周组大鼠通过手术切断右膝关节前后交叉韧带和内侧副韧带，去除内外侧半月板，术后大鼠可自由活动。假手术组大鼠仅切开皮肤，暴露关节，不进行手术处理。分别于术后8周和20周进行Micro-CT观察，分析大鼠股骨骨质疏松情况；大鼠安乐死后，对膝关节面进行大体观察，并采用Pelletier评分表对关节面软骨进行评分。膝关节取材，进行HE染色和番红O-固绿染色，观察软骨形态变化，并使用改良Mankin's评分法对关节面组织病理情况进行评分。通过免疫组织化学染色法检测Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13 (matrix metalloproteinase 13,MMP13)表达情况，以此反映膝关节软骨的合成分解代谢情况。结果 模型8周组和模型20周组大鼠膝关节的关节面软骨破坏严重，Pelletier评分及改良Mankin's评分均明显高于假手术组（均P<0.01）。模型20周组大鼠的Pelletier评分及改良Mankin's评分均明显高于模型8周组（P<0.01）。模型8周组和模型20周组大鼠经Micro-CT观察可见膝关节面不平整，骨赘形成，出现骨质疏松的表现；且模型20周组大鼠的膝关节周围有较多游离体形成。免疫组织化学染色提示模型组大鼠的膝关节组织中MMP13表达量增多，Ⅱ型胶原表达量减少，提示关节软骨合成分解代谢平衡被破坏。结论 通过手术切断大鼠膝关节前后交叉韧带和内侧副韧带并去除内外侧半月板的方法可成功构建中重度膝关节炎大鼠模型，影像学检查发现膝关节骨赘、骨质疏松及游离体，病理学观察发现关节软骨减少甚至消失，而且软骨合成分解代谢平衡破坏。

摘要: 目的 利用小型猪多个系统组织结构和功能接近于人类的特性，建立模拟失重动物模型，观察其病理生理学变化，为航空航天失重环境研究提供新方法。方法 选取9头普通级小型猪，随机分为实验组（n=7）和对照组（n=2）。实验组小型猪使用定制金属笼固定，帆布吊带悬挂使其后肢离地去负荷，身体与地面呈-20°角，模拟失重30 d （每天24 h）。通过采集不同时间点各组小型猪的体重、血容量、血生化指标等数据，对其基础体征的变化进行统计分析。实验结束后，对小型猪实施安乐死并解剖取材，对心血管、骨骼、骨骼肌等各系统组织脏器进行HE、Masson染色后的组织病理学观察，并对各动脉血管厚度、骨骼肌肌纤维直径进行统计分析。同时，采用蛋白质免疫印迹法检测骨骼肌肌肉萎缩蛋白包括肌环指蛋白1 (muscle-specific RING finger protein 1,MuRf-1)和肌萎缩素1 (muscle atrophy F-box,MAFbx，又称Atrogin-1)的表达量，并采用免疫组织化学染色法检测脑内星形胶质细胞激活相关蛋白即胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的表达量，以反映各系统的病理生理学功能变化。结果 后肢去负荷造模后，实验组小型猪体重显著下降（P<0.001），血容量也显著下降（P<0.01）。实验期间，实验组小型猪的血红蛋白、红细胞比容和红细胞计数水平显著降低（P<0.05），随后逐渐恢复；丙氨酸氨基转移酶和γ-谷氨酰转移酶表达水平呈现先下降（P<0.05）后回升的趋势，白蛋白水平显著下降（P<0.001），球蛋白水平显著上升（P<0.01），肌酐水平显著下降（P<0.05）。实验组小型猪腓肠肌的平均肌纤维直径显著缩短（P<0.05），肌纤维直径分布左移，小直径肌纤维增多；同时腓肠肌、椎旁肌肉Atrogin-1的表达水平显著增加（P<0.05）。这些变化与航天失重对人和动物的影响基本一致。此外，实验组小型猪的脑皮质顶叶、额叶和海马区域部分神经元变性，小脑区域浦肯野细胞数量轻度减少，而海马区的GFAP阳性信号显著增强（P<0.05）。结论 -20°角后肢去负荷30 d的小型猪可作为一种新的模拟失重动物模型，用于航空航天领域相关研究。

摘要: 目的 优化通过注射人肝肿瘤细胞株构建原位癌裸小鼠模型的条件，并探索适宜的给药治疗时间。方法 选用稳定表达萤光素酶报告基因（LUC）的人肝细胞癌Hep3B与肝母细胞瘤HepG2细胞株，使用小动物活体成像系统分析萤光素酶发光强度与肝肿瘤细胞数量之间的线性相关性，验证人源肝肿瘤细胞的发光效率。在5周龄雌性BALB/c裸小鼠的肝叶原位接种不同浓度（8×10～6、2.4×10～7、7.2×10～7个/mL）、不同重悬介质（PBS、Matrigel）的人肝肿瘤细胞悬液HepG2-LUC和Hep3B-LUC（共12组，每组7只），分别构建人肝肿瘤裸小鼠原位癌模型。每7 d为1个周期记录各组小鼠体重，用小动物活体成像系统定期监测原位肿瘤的生长过程，观察肿瘤生长趋势。接种肿瘤细胞后第35天剖取小鼠肝脏，制备病理切片，进行苏木精-伊红（hematoxylin and eosin,HE）染色观察组织病理学变化。结果 两种人肝肿瘤细胞株的发光强度均与细胞数量呈正相关（R²=0.983 1,R²=0.970 5），适宜用于原位癌模型的构建。HepG2-LUC高浓度组，HepG2-LUC+Matrigel低、中、高浓度组，Hep3B-LUC中、高浓度组与Hep3B-LUC+Matrigel低、中、高浓度组均成功造模。HepG2-LUC+Matrigel高浓度组较低浓度与中浓度组小鼠的体重显著下降（P<0.05）,Hep3B-LUC+Matrigel高浓度组较低浓度与中浓度组小鼠的体重也显著下降（P<0.05）。成功造模组小鼠的荧光发光强度随时间呈指数型增长（R²>0.950 0），且在移植后14 d发光强度至少可达到1.0×10～7 p/（s·cm²·sr）。HepG2-LUC低、中浓度组和Hep3B-LUC低浓度组小鼠肝脏未见明显的病理学变化，其余组肝脏肿瘤和肝细胞病变明显。结论 对于HepG2-LUC细胞株，推荐肝叶原位注射2.4×10～7个/mL （50μL）且与Matrigel重悬的混合细胞液体造模，并于造模后第7天给药或采取预后措施；而对于Hep3B-LUC细胞株，推荐肝叶原位注射7.2×10～7个/mL （50μL）(不与Matrigel重悬混合)造模，并于造模后的第14天给药或采取预后措施。

摘要: 目的 观察干扰素受体缺失小鼠（AG129）睾丸自发性肿瘤，为该品系小鼠的应用研究提供依据。方法 AG129小鼠种群饲养于SPF屏障环境中，正常饲养繁殖，在离乳的3周龄小鼠中发现其中一只雄性小鼠睾丸异常肿大，同窝内其他小鼠无相似情况，对该例小鼠自发的睾丸肿瘤进行持续观察，于9周龄时对小鼠安乐死，并解剖，观察肿瘤组织大体形态并取材，肿瘤组织经石蜡切片后进行HE染色。结果 小鼠经过持续数周观察发现，肿瘤组织随小鼠日龄增长逐渐增大；解剖后肿瘤组织被包囊包裹，表面光滑，切开包囊后，肿瘤内组织形态不规则，部分质地坚硬，部分柔软；HE染色结果显示，肿瘤组织由多胚层组织发育而成，内部有神经组织、骨组织、肌肉组织和脂肪组织等，形态结构不规则。结论 结合肿瘤发生发展，大体形态结构，病理切片HE染色结果，初步诊断该例小鼠睾丸肿块为小鼠未成熟型畸胎瘤。