摘要: 动物实验在生物医药研究中广泛用于安全性评估、毒理学分析、疗效验证以及机制探索。近年来，由于动物实验伦理审查制度日趋严格、动物福利意识不断提升，同时为了推动更高效、低成本的药物研发，美国在2022年9月通过了食品药品监督管理局（Food and Drug Administration,FDA）现代化法案2.0，首次取消了新药临床前研究必须进行动物实验的联邦强制要求。2025年4月FDA进一步提出，将在单克隆抗体等药物研发中采用人工智能计算模型、类器官毒性测试、3D微生理系统等一系列“新的替代方法”，从而逐步取代传统的动物试验模式。在这些新兴技术中，生物3D打印模型因其高仿生、高重现性和可规模化等特性，逐渐成为动物模型的重要替代和补充手段。本综述系统梳理了生物3D打印技术在生物医药领域的研究与应用进展：首先概述了生物3D打印的关键组成，包括生物材料的选择与功能化设计、多种打印策略的原理及特点，分析其在构建多细胞空间结构、微环境调控和细胞命运引导方面的优势；其次，介绍了生物3D打印模型在药物研发中的典型应用，包括通过构建肿瘤、传染病和罕见病等疾病模型实现对药效的高通量筛选，以及通过构建肝脏、心脏等器官特异性模型进行药物毒理学研究；再者，进一步探讨了生物3D打印在组织工程领域的应用范围，涵盖骨/软骨、皮肤、血管等多种功能性组织的构建，以及在再生替代等方面的最新进展。此外，本文还分析了生物3D打印模型与动物模型在疾病发生发展和药物作用机制、精准医疗、药物研发以及组织再生研究等领域的互补优势，讨论了二者交叉应用在提升建模准确性与生理相关性方面的潜力与挑战。综上，生物3D打印作为一种新兴的体外造模与制造技术，正逐步建立起涵盖疾病建模、药物筛选、毒性预测与组织再生的完整应用体系。

摘要: 肌萎缩侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis,ALS）是一种不可逆的致死性神经退行性疾病，其发病率与人口老龄化进程呈正相关。ALS以运动神经元的渐进性丧失为特征，导致患者肌肉无力、萎缩直至呼吸衰竭。ALS的致病机制涉及遗传和环境等多种因素，其中遗传因素尤为重要。目前已发现多个与ALS相关的致病基因，如铜锌超氧化物歧化酶1编码基因（Cu/Zn superoxide dismutase,Cu/Zn SOD1，又称SOD1）、转录反应DNA结合蛋白43编码基因（transactive response DNA-binding protein 43,TDP-43）、肉瘤融合蛋白基因（fused in sarcoma,FUS）、9号染色体开放阅读框72基因（chromosome open reading frame 72,C9orf72）等，这些基因的突变不仅见于家族性ALS中，也在散发性ALS中被发现。基于发现的ALS风险基因，通过多种方式建立了ALS动物模型，如转基因模型、基因敲入或敲除模型和腺相关病毒过表达模型，这些模型模拟了包括运动神经元丢失、泛素化包涵体形成及神经肌肉接头退变等人类ALS部分典型病理特征，但这些模型仍存在局限性：（1）单一基因突变模型难以全面模拟临床上散发性ALS的复杂多因子致病特征；（2）模式动物与人类在神经退行性疾病的微环境调节机制和病变速率上存在明显差异，这可能影响疾病表型的准确重现和药物效果的评估。为更全面地研究ALS的病理机制并推动有效药物的研发，构建和优化ALS疾病动物模型显得尤为关键。本综述归纳常用的ALS基因突变小鼠模型，分析各类基因修饰小鼠模型的表型和病理特征，包括常见转基因、基因点突变敲入、基因敲除以及通过腺相关病毒载体介导的过表达小鼠模型等；通过对比上述模型的优缺点，进一步讨论了其在ALS病理机制研究和药物开发中的具体应用情况，以期为ALS研究的模型选择提供参考。

摘要: 目的 拟从鳞状皮屑裸小鼠的皮肤上分离病原菌，并进行病原鉴定、溯源分析和致病性研究，以期为鳞状皮屑裸小鼠的病原体诊断提供新的思路。方法 对1只患鳞状皮屑皮肤病的裸小鼠的皮肤进行拭子采样，通过核酸检测、细菌分离培养、生化鉴定、16S rDNA基因扩增测序、全基因组测序构建系统进化树等方法鉴定菌株。然后取15只BALB/c裸小鼠，随机分为涂擦生理盐水的对照组、涂擦1.8×10～8 CFU/mL分离病菌液的高浓度组和涂擦1.8×10～7 CFU/mL分离病菌液的低浓度组，通过动物感染试验及HE染色观察皮肤组织病理学变化，进行该菌株的致病性分析。结果 送检裸小鼠的皮肤拭子样本中牛棒状杆菌核酸阴性，排除了牛棒状杆菌的感染。进一步分离培养的病原菌经高盐甘露醇琼脂平板和血琼脂平板培养以及革兰染色提示为革兰阳性葡萄球菌。16S rDNA测序和全自动微生物鉴定系统鉴定结果显示，该菌株为木糖葡萄球菌。全基因组测序后的系统进化树分析显示，该菌株与韩国叶菜分离株（GenBank GCA＿00207825.1）的亲缘关系最近。动物感染试验显示，高浓度和低浓度分离菌液分别感染17 d和20 d时裸小鼠头颈部和背部开始出现鳞状皮屑，之后逐渐扩散至其他部位；而且两组的皮屑症状均表现为一过性，分别持续7 d和3 d皮屑消失；高浓度组和低浓度组的感染率均为33.33%。与对照组相比，感染后的裸小鼠皮肤组织病理学观察未发现明显异常，提示该菌株对裸小鼠的致病力存在明显的个体差异。结论 从患鳞状皮屑裸小鼠皮肤上分离鉴定出1株木糖葡萄球菌菌株。该菌株是一种机会性感染病原体，临床表现为一过性的鳞状皮屑症状，组织病理学并未发生明显改变，并且裸小鼠对该菌株的敏感性存在个体差异。本研究结果为免疫缺陷小鼠或基因敲除小鼠的病原体诊断提供了数据支撑。

摘要: 类器官共培养模型（organoid co-culture model）作为一种重现三维微环境以研究细胞间相互作用的新型工具，近年来在生物医学研究中展现了显著的应用潜力。该模型通过模拟体内组织的微环境，能够为研究细胞间复杂互动提供更为精准的实验平台，尤其在肿瘤免疫逃逸机制、药物敏感性测试、神经退行性疾病的病理特征揭示等方面具有重要价值。然而，类器官共培养模型在标准化操作、规模化培养、伦理规范和未来发展方向等方面仍面临诸多挑战，特别是在实验动物学领域，如何有效地将类器官与传统实验动物模型相结合，以及如何在不同研究需求中选择合适的模型并探索其替代潜能，仍是当前亟待解决的问题。在伦理审批和动物实验替代方面，类器官共培养模型提供了一种更加符合“替代、减少、优化（replacement,reduction,refinement,3R）”原则的实验方案，可能成为替代传统实验动物模型的重要工具。为此，本文回顾了该领域的最新进展与面临的关键挑战，详细描述了类器官共培养模型的构建方法，并阐述了其在发病机制研究和药物筛选中的应用。文章还系统比较了类器官共培养模型与传统实验动物模型的差异，探讨了二者在具体应用场景中的选择依据。此外，本文讨论了类器官共培养模型在实验动物替代中的潜在价值，并展望了该技术未来的发展趋势。通过这些讨论，本文旨在推动类器官共培养技术的创新与发展，并为未来相关研究提供新的视角和科学依据。

摘要: 目的 建立大鼠骨关节炎模型，研究秦皮素对骨关节炎大鼠的抗炎作用及机制。方法 18只8周龄雄性SPF级SD大鼠随机分为3组：空白组大鼠右膝关节腔注射50μL生理盐水并连续1周；模型组和干预组大鼠右膝关节腔注射碘乙酸钠（monosodium iodoacetate,MIA）造模，干预组再注射秦皮素(5 mg·kg^-1·d^-1)并连续干预1周。药物干预后4周，采集腹主动脉血，安乐死动物后采集膝关节软骨。采用苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色和甲苯胺蓝染色进行膝关节软骨的组织病理学观察以及Mankin和OARSI评分，并用micro-CT扫描系统比较分析每组膝关节的骨体积分数、骨表面积密度和骨小梁数目。采用酶联免疫吸附试验法检测各组大鼠血清中多种炎症因子[肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）]以及软骨寡聚基质蛋白（cartilage oligomeric matrix protein,COMP）的表达。采用蛋白质印迹法测定膝关节软骨中丝裂原活化蛋白激酶p38（mitogen-activated protein kinase p38,p38 MAPK）、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38（phosphorylation-p38 MAPK,p-p38 MAPK）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）、磷酸化JNK氨基末端激酶（phosphorylation-JNK,p-JNK）的表达。结果 大鼠膝关节软骨切片染色显示，模型组的关节面缺损严重，干预组的软骨破坏相对减轻。micro-CT显示，干预组的骨体积分数、骨表面积密度和骨小梁数目均明显高于模型组（P<0.05）；模型组的Mankin评分明显高于空白组（P<0.05），干预组的Mankin评分明显低于模型组（P<0.05）；而干预组的OARSI评分明显低于模型组（P<0.05）。酶联免疫吸附试验结果显示，模型组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和COMP含量均明显高于空白组（均P<0.05），而干预组含量明显低于模型组（均P<0.05）。蛋白质印迹结果显示，干预组膝关节软骨组织中p-p38 MAPK和p-JNK表达水平明显低于模型组（均P<0.05），而模型组的p-p38 MAPK和p-JNK蛋白表达水平明显高于空白组（均P<0.05）。结论 秦皮素药物干预可能通过p38 MAPK通路对碘乙酸钠诱导的骨关节炎模型大鼠发挥治疗作用。

摘要: 实验动物是生命科学研究的基石，其作为人类生理、病理及疾病治疗的替代模型，在基础研究、药物开发和转化医学中具有不可替代的作用。肠道菌群是由细菌、真菌、病毒以及单细胞生物等构成的复杂微生物类群，其定植于宿主肠道内，与宿主正常生理代谢功能的维持和生命健康密切相关。有研究表明，肠道菌群组成结构的素乱可引发肥胖、糖尿病、高血压、炎症性肠病以及阿尔茨海默病等多种疾病。因此，针对实验动物开展肠道菌群的特征性分析不仅有助于提升实验结果的可靠性，而且将有助于动物实验结果的转化应用。性别差异是生物学研究中的重要变量，其对实验动物的生理功能、代谢特征及肠道菌群组成均具有显著影响。然而，研究人员在较多生物学研究中存在明显的实验动物性别偏好性，这极大地限制了研究结果的普适性。本文对小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔、犬、猫、非人灵长类动物、小型猪和鸡这10种生命科学实验中常用的实验动物的肠道菌群组成结构特征进行归纳总结，并对部分实验动物肠道菌群的性别差异进行分析。此外，针对实验动物与人类肠道菌群的对比分析，还为基于实验动物的比较医学研究提供了新视角。综上，相关研究成果在加深科研人员对不同实验动物肠道菌群特征及其性别差异性认识的同时，也将为科学研究中实验动物的选用、性别特异性疾病动物模型的构建和结果分析提供指导和借鉴。

摘要: 目的 报告2019年某实验猴养殖场中食蟹猴群暴发犬瘟热病毒的诊断情况。方法 针对2019年底中国华南地区某实验猴养殖场送检的21只患病食蟹猴（出现面部红疹、皮屑、流鼻涕和腹泻等症状）的血清、皮肤红疹拭子和1只病死猴的抗凝全血、肝、肺、皮肤组织，共46份样品，采用实时荧光定量PCR法检测犬瘟热病毒基因片段，采用免疫组织化学染色法检测肺组织中犬瘟热病毒核蛋白表达。将病死猴的皮肤组织研磨过筛，取滤液接种于单层MDCK细胞系中培养分离病毒，将分离的病毒进行全基因组测序鉴定，采用Clustal Omega工具对亚洲不同犬瘟热病毒分离株进行比对和同源性分析，构建遗传发育树，并对其进行遗传进化分析。结果 经临床追溯，患病的食蟹猴出现了与麻疹病毒感染食蟹猴类似的症状，剖检病死猴可见肺部有红色病变，大肠黏膜有明显出血。实时荧光定量PCR检测患病猴血清、皮肤红疹拭子及病死猴各组织样本中的犬瘟热病毒核酸结果均呈阳性，由标准曲线公式计算出皮肤组织中的病毒载量最高；免疫组织化学染色病死猴的肺组织显示犬瘟热病毒核蛋白聚集在肺泡上皮细胞、肺支气管和细支气管处；从病死猴皮肤组织中分离出1株犬瘟热病毒株，遗传进化分析表明其与越南犬中发现的亚洲1型CDV/dog/HCM/33/140816株亲缘关系最近，基因相似度达到98.86%。结论 综合临床症状、核酸检测、病毒蛋白免疫组织化学法及全基因组测序分析结果，诊断该猴场的食蟹猴感染了犬瘟热病毒，建议将犬瘟热病毒纳为饲养猴群的监测项目之一。本研究还为进一步分析犬瘟热病毒的分子生物学特性提供了基础。

摘要: 目的 获得五指山猪主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex,MHC）Ⅱ类分子基因序列，并分析其遗传信息，探究五指山猪MHC的生物学功能。方法 采集3头成年雄性五指山猪的脾脏样本，根据MHCⅡ类分子基因序列设计引物，采用RT-PCR法扩增五指山猪MHCⅡ类分子基因的编码序列，通过Sanger测序确定MHCⅡ类分子基因序列，利用生物信息学软件分析五指山猪MHCⅡ类分子基因的理化性质、系统进化关系、保守基序和结构域，以及染色体位置和共线性关系。结果 共鉴定出8个五指山猪MHCⅡ类分子基因，分别为SLA-DRA、SLA-DQA、SLA-DQB、SLA-DRB、SLA-DOB、SLA-DMB、SLA-DMA和SLA-DOA。Sanger测序后确定MHCⅡ类分子基因序列，并将序列上传至GenBank获得登录号，分别为PQ182796、PQ182797、PQ182798、PQ182799、PQ182800、PQ182801、PQ182802和PQ164779。系统进化树分析表明，五指山猪6个MHCⅡ类分子基因与杜洛克猪、梅山猪、大白猪和巴马猪等不同品种猪的MHCⅡ类分子基因不在同一个分支上。生物信息学分析表明，MHCⅡ类分子大部分为疏水性蛋白，其相对分子质量为27 700～30 000，归于同一亚区的基因含有相似的保守基序，其中SLA-DQB、SLA-DRB、SLA-DOB和SLA-DMB基因编码的4个MHCⅡ类分子包含MHCⅡβ保守结构域，SLA-DRA、SLA-DQA、SLA-DMA和SLA-DOA基因编码的4个MHCⅡ类分子包含MHCⅡɑ保守结构域。8个MHCⅡ类分子基因散在分布于五指山猪的7号染色体长臂上，与人的3个基因之间具有共线性关系，而与杜洛克猪的5个基因之间呈现共线性关系。结论 五指山猪的MHCⅡ类分子基因可能具有特殊的遗传学起源。

摘要: 随着国内实验动物行业的飞速发展，动物实验成为高校科研成果产出和课堂教学的重要辅助手段，实验动物从业人员队伍也日益壮大。虽然近年来国家开始重视实验动物从业人员职业健康，并出台了相关的法规政策，但是现阶段高校针对实验动物从业人员的职业健康风险防控还处于薄弱环节。因此，笔者围绕高校实验动物研究中心管理规范，通过走访、座谈以及学术交流，对国内9家普通高校实验动物从业人员的职业健康管理与防护现状进行了深入调研，揭示了高校实验动物从业人员面临的5大职业健康风险，包括实验动物过敏症、人兽共患传染病、机械性损伤、化学性刺激以及心理因素，指出当前高校普遍存在管理体系不健全、风险评估机制缺失和防护设施不足等核心问题。针对上述问题，本研究提出了三级防控体系：在高校层面，需健全制度并加大经费投入；在实验动物中心层面，应建立动物生物安全实验室，并强化危险源管控、应急预案演练与健康监护；在实验动物从业人员层面，需规范防护装备使用，参与职业健康培训，严格执行安全操作规程，及时上报职业暴露事件。在多方协作的基础上，笔者尝试分析并探讨构建国内普通高校科学、高效的职业健康保障体系的可行路径，以期为实验动物行业的可持续发展提供理论支撑与实践参考。

摘要: 非人灵长类因其与人类在遗传学和生理学上的高度相似性，成为生命科学研究和生物医药开发的关键性实验动物，不仅为神经系统疾病和传染病的机制研究提供理想平台，还被广泛用于大分子药物的临床前安全性评估，被誉为“金标准”。然而，这种生物学相似性也导致从业人员因接触非人灵长类实验动物或其组织、体液而面临较高的人兽共患病传播风险。结合近年来国内外人兽共患病暴发情况及国家生物安全法颁布实施的背景，本文综述了非人灵长类实验动物从业人员面临的职业风险因素（包括生物因素、化学因素、物理因素）、常见的人兽共患病及其病原体分类、传播途径、危害程度，以及从业人员职业危害暴露的处理方式，进而提出建立多维防控体系：(1)风险评估与应急处理，即通过职业健康安全委员会（Occupational Health and Safety Committee,OHSC）定期识别危险源，制定暴露后紧急处理流程；（2）管理体系优化，即完善设施设计、个人防护装备配置，并强化从业人员健康监护与疫苗接种；（3）技术培训与规范操作，即开展非人灵长类实验动物行为学、生物安全操作等专项培训，推广智能监控技术以减少攻击性事件等措施。本文旨在提高非人灵长类实验动物从业人员的健康安全意识，加强人员个人防护及专业技能操作的规范性指引，从而保障从业人员健康安全，降低职业暴露率，有效预防实验动物相关职业病。