摘要: 实验动物是医学研究的“活”工具，通过动物实验可以不断认识生命规律、揭示疾病本质、发现防治疾病的疫苗和药物，为人类相关领域的科技发展发挥重要作用。实验动物所处的环境条件，对动物的健康和质量，以及对动物实验结果，有直接的影响。对环境条件控制程度越高，实验结果就越具有质量上的保证。因此，实验动物设施环境控制是保障实验动物享有所需环境条件及有效开展动物实验的重要一环。本文通过分析四川省内实验动物设施环境检测的现状，简要梳理了四川省内实验动物设施的数量、设施面积等基本情况，详细统计了四川省内各检测机构开展实验动物设施环境检测的能力，结合国家标准、主管部门要求及实验动物设施使用单位的质量控制需要，总结了实验动物设施环境的检测要求。在实验动物设施检测指标的分析中，从四川省40家实验动物设施屏障环境的检测数据可得出，静压差是最容易出现不合格情况的检测指标，其次是照度和换气次数。同时，本文以屏障环境为例，总结出实验动物设施环境检测过程中的检测人员、检测仪器、检测方法、技术材料、检测环境、检测报告6个方面的常见问题并提出针对性建议。以上建议有助于更好地控制实验动物设施的环境，为行业内相关检测机构、实验动物生产和使用单位提供经验借鉴与参考。

摘要: 动物实验是生命科学与医学研究的重要环节，但单一动物实验研究因样本量小、设计异质性高、重复性差等固有局限，其结果的外推性与可靠性常受到质疑，从而影响了研究成果向临床的有效转化。系统评价（systematic reviews,SR）和Meta分析（meta-analysis）是整合现有研究证据、提升结论稳健性的关键方法。然而，目前应用于动物实验领域的SR和Meta分析在实施过程与报告撰写上尚缺乏统一规范，导致其研究质量参差不齐，在一定程度上削弱了其证据价值。为解决此问题，本文系统梳理了动物实验SR与Meta分析的报告撰写流程，并提出一套兼顾科学性与实用性的规范化建议。文章内容覆盖了从研究前期准备[包括构建PICO （population,intervention,comparison and outcome）问题、评估可行性与方案预注册]到报告主体各部分的撰写要点。在核心的方法学章节，本文详细论述了如何基于PRISMA （Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-analysis）声明，并结合ARRIVE指南（Animal Research:Reporting of in Vivo Experiments）、SYRCLE（Systematic Review Centre for Laboratory Animal Experimentation）动物实验风险评估工具等相关指南与工具，具体实施文献检索、纳入和排除标准制定、数据提取与偏倚风险评估等环节。对于结果呈现，文章提出了借助流程图与特征表进行清晰、透明化展示的策略。在讨论部分，本文重点探讨了如何科学解读合并效应、深入分析异质性来源和评估发表偏倚影响，并审慎论述动物实验结果向临床外推的有效性与局限性。此外，本文还建议引入GRADE （Grading of Recommendations Assessment,Development and Evaluation）方法对最终的证据质量进行综合分级。本文对报告撰写全流程进行了模块化解析，期望为相关领域研究者提供一份清晰、可行的实践指南，以促进动物实验SR和Meta分析的规范化发展，提升其在科研决策与转化医学中的应用价值。

摘要: 本栏目上期文章《无替代，何谈取消》^[1]已从宏观层面梳理了动物实验的替代现状。本篇进一步阐述现阶段已获得国际认可的非动物实验替代方法及其适用范围。1非动物实验替代概述近年来，美国食品药品监督管理局（Food and Drug Administration,FDA）相继出台《FDA现代化法案2.0》（The FDA Modernization Act 2.0）及多项旨在推动动物实验替代的激进政策^[2]。例如，新任FDA局长马蒂·马卡里（Marty Makary）提出在单克隆抗体药物研发中，优先采用非动物实验策略，并启动“逐步取消强制性动物试验”路线图^[3]。与此同时，随着计算机模拟、类器官培养、器官芯片、人工智能或机器学习等新兴技术的快速迭代，“去动物化”研发前景备受媒体与普通公众关注^[4]。在这一时期，不少普通公众乃至部分科学界、医药界、实验动物产业界等相关领域的人士对“动物实验即将被全面替代”抱有乐观预期。

摘要: 2025年8月，“十四五”时期国家重点出版物出版专项规划项目“世界兽医经典著作译丛”之《实验动物医学》（第3版）（Laboratory Animal Medicine,Third Edition）由中国农业出版社重磅出版发行。该书由中国疾病预防控制中心（中国预防医学科学院）组织，中国实验动物学会实验动物医师工作委员会（CCLAM）的卢选成博士、李秦博士、庞万勇博士领衔主译，国内外实验动物医学领域专家学者共计74人共同翻译。原著由美国实验动物医学会（ACLAM）组织编写，自1984年首版问世以来，历经2002年第2版与2015年第3版的系统修订，代表着实验动物医学领域的最高学术水平，是该领域全球范围内公认的权威工具书。

摘要: 目的 基于胎鼠独特的肺组织生理结构和现有的大鼠肺组织固定方法，探索胎鼠肺组织病理学研究所需的取材与固定方法。方法 对6只妊娠20.5 d的成年SD大鼠实行剖宫产，获得胎鼠。在每只孕鼠所产胎鼠中选取4只体重、生命体征与呼吸状态相近的健康存活胎鼠，按照随机数表法随机分为直接取肺浸润组、气管内灌注后取肺浸润组、胎鼠整体浸润组和气管内灌注后胎鼠整体浸润组。为系统对比分析不同固定方法下肺组织的解剖形态，对4组胎鼠的肺组织样本进行取材、灌注和固定处理后，观察各组肺组织的大体形态；经过石蜡切片及苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色后，在光学显微镜下观察肺整体、肺泡和肺支气管的组织学形态。结果 胎鼠直接取肺浸润组的肺门不清晰、肺组织分叶不明显、形状不规则，肺内空腔小，肺泡与肺支气管皱缩。气管内灌注后取肺浸润组的肺门清晰，肺组织分叶明显、形状规则，肺内空腔大，肺泡与肺支气管饱满。胎鼠整体浸润组与气管内灌注后胎鼠整体浸润组均能看到肺脏、心脏和皮肤等器官，肺组织分叶明显、形状不规则，肺叶边缘有破损。其中胎鼠整体浸润组胎鼠胸廓扁平，肺内空腔小，肺泡与肺支气管皱缩；而气管内灌注后胎鼠整体浸润组胎鼠胸廓饱满，肺内空腔大，肺泡与肺支气管较饱满。结论 气管内灌注后取肺浸润法在胎鼠肺组织原始形态还原度及石蜡切片、染色和组织病理学观察与分析等方面皆优于直接取肺浸润法、胎鼠整体浸润法和气管内灌注后胎鼠整体浸润法，且该方法中包埋、切片和染色等操作流程简便、耗材节省。因此，对于大鼠胎儿期的肺组织病理学观察，推荐使用气管内灌注后取肺浸润法进行固定。

摘要: 药物非临床生殖毒性试验多选用大鼠、家兔和食蟹猴等哺乳动物，而动物妊娠是目前影响非临床生殖毒性试验的关键环节，本文主要针对动物妊娠环节中存在的难点及应对方法进行讨论。大鼠可应用于生育力评估与早期胚胎发育毒性试验（Ⅰ段）、胚胎-胎仔发育毒性试验（Ⅱ段）和围产期毒性试验（Ⅲ段），可以通过阴道涂片法确定雌性大鼠的动情周期。在雌、雄大鼠按1∶1比例合笼过夜后，次日通过阴道栓检查来确认大鼠是否发生交配行为。家兔一般应用于胚胎-胎仔发育毒性试验（Ⅱ段），可通过观察雄性家兔和处于发情期的雌性家兔合笼后是否发生交配行为来确定受孕时间。家兔在生殖毒性动物试验中常出现雌兔发情不典型、不同批次间家兔发情情况差异显著、交配失败等问题，可通过延长光照时间、增加蛋白质摄入、选择合适的交配方式、改变饲养环境（雌兔和雄兔邻近饲养）等方式改善。非人灵长类动物一般应用于围产期毒性试验（Ⅲ段），准确判断雄性非人灵长类动物是否性成熟是其药物非临床生殖毒性试验的难点之一，可通过综合评估动物年龄、体重和睾丸体积等指标来判断它们是否性成熟。一般雄性猕猴年龄在4.5岁以上，体重大于4.5 kg，单侧睾丸体积超过10 mL，双侧睾丸总体积大于20 mL则表示性成熟。关于雌性非人灵长类动物是否妊娠，可通过超声检查是否能观察到明显孕囊进行判定，但这需要经验丰富的临床兽医制定完善的B超检查方法。综上所述，在非临床生殖毒性动物研究中，应根据不同种属动物的生殖系统解剖学特性，选择适合的检测/观察方法和结果判定标准，以确保动物成功交配，使非临床生殖毒性试验顺利开展。

摘要: 目的 开发α-1,3半乳糖苷转移酶基因敲除（α-1,3-galactosyltransferase gene-knockout,GTKO）/人CD55(human CD55 ,hCD55)转基因的基因编辑异种器官移植供体猪并进行功能验证。方法 利用成簇的规律间隔的短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）/CRISPR相关蛋白核酸酶9(CRISPR-associated nuclease 9,Cas9)、PiggyBac转座子技术和体细胞克隆技术，构建GTKO/hCD55基因编辑的滇南小耳猪，通过Sanger测序、实时荧光定量PCR、流式细胞术、免疫荧光实验、重亚硫酸盐测序、抗原抗体结合实验和补体依赖的细胞毒性实验分析其表型及功能。结果 将基因编辑载体PX458和PiggyBac转染至野生型胎猪成纤维细胞后，经嘌呤霉素药物筛选获得48个单细胞克隆，挑选2个单细胞克隆进行体细胞克隆，获得2个妊娠33 d的胎猪。F01胎猪的α-1,3-半乳糖基转移酶（α-1,3-galactosyltransferase,GGTA1）基因型为-17 bp和野生型（wild type,WT）,F02胎猪的GGTA1基因型为-26 bp/+2 bp和-3 bp。两个胎猪的hCD55 mRNA表达量均显著高于WT猪（P<0.01），以F02胎猪作为供体细胞来源进行连续克隆后获得11头存活仔猪，鉴定均为GTKO/hCD55基因编辑猪。这些猪的α-Gal抗原表达缺失，但hCD55出现弱表达或不表达的情况。因此，对hCD55基因的CpG岛进行甲基化分析，结果表明在不表达hCD55的肾脏组织中h CD55基因的CpG岛被高甲基化，而表达hCD55的肾脏组织中hCD55基因的CpG岛未被甲基化或部分被甲基化。对h CD55基因的CpG岛进行密码子优化降低CG含量后，可实现hCD55基因的稳定表达。此外，抗原抗体结合实验表明人IgM结合到GTKO/hCD55基因编辑猪成纤维细胞的数量显著小于WT猪（P<0.01）；补体依赖的细胞毒性实验表明GTKO/hCD55猪的成纤维细胞成活率明显高于WT猪（P<0.01）。结论 成功获得了GTKO/hCD55基因编辑异种器官移植供体猪，并通过密码子优化降低了hCD55基因CpG岛的CG含量，从而有效避免甲基化导致的基因表达沉默。本研究可为供体猪的开发提供借鉴，将指导后续异种器官移植研究。

摘要: 目的 针对传统实验动物中心管理中存在的笼位调度效率低、人员行为监管不到位、设备老化难升级等问题，通过应用多模态大模型技术升级现有实验动物中心的信息系统，实现实验动物笼位状态的实时感知、实验人员行为的智能监管以及业务流程的自动化处理，从而提升管理效率与精细化水平。方法 浙江大学医学院附属第一医院实验动物中心提出一个基于人工智能的实验动物中心信息化升级方式，能兼容不同饲养设备。该系统架构自下而上依次包括硬件设施层、核心算法层和应用功能层。硬件设施层配备摄像头和高速网络传输设备，用于笼位和人员信息采集；核心算法层通过多阶段图像预处理技术和多模态大模型识别技术，实现图片信息抽取和识别；应用功能层将识别结果和已有动物中心信息相整合，生成实时笼位占有热力图，直观、清晰地展示实验动物中心的笼位使用密度分布情况。结果 基于人工智能的管理系统笼位识别准确率达98.5%，人员的实验服正确穿戴识别率为98.8%。每张图片平均处理时间约为3.7 s，笼位有效使用率提升23%，周转效率提高35%。此外，管理系统能够实时追踪并警告不规范行为，在通过智能化识别后，综合违规行为的发现次数暴露更多，违规行为发现率提升90.6%，持续使用3个月后，周平均违规行为较基线期下降54.0%。结论 将多模态大模型应用于实验动物管理领域，可实现笼位标识实时监控与自动化管理，提升管理效率和精确度。系统整合视觉识别和行为分析等多源数据，可构建对实验人员的全方位智能监管体系，为科研机构提供高效、精准、价廉的管理工具，推动实验动物管理的智能化发展。

摘要: 目的 观察比较不同浓度环磷酰胺（cyclophosphamide, CTX）诱导小鼠早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency,POI）模型的效果并探讨损伤机制。方法 32只6～8周龄的C57BL/6J雌性小鼠按体重随机区组法分为4组，每组8只，分别用75 mg/kg CTX、120 mg/kg CTX、120 mg/kg CTX+12 mg/kg白消安（Busulfan）和同体积生理盐水腹腔单次注射来建立POI模型，测定每组小鼠的卵巢系数、血清中雌二醇（estradiol,E₂）和卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）水平，并通过蛋白质印迹法检测不同造模浓度条件下卵巢组织内NAD依赖性蛋白脱酰酶5（NAD-dependent deacetylase sirtuin-5,SIRT5）和叉头框蛋白O3a（forkhead box protein O3a,FOXO3a）蛋白表达水平的变化规律。筛选最佳造模浓度后，将40只6～8周龄的C57BL/6J雌性小鼠按体重随机区组法分为5组，每组8只；以生理盐水作为对照，用120 mg/kg CTX造模后第1、2、7、14天，通过蛋白质印迹法检测不同造模时间内卵巢组织中SIRT5和FOXO3a蛋白表达水平的变化规律。结果 与生理盐水对照组比较，不同浓度的CTX（75 mg/kg和120 mg/kg）和120 mg/kg CTX+12 mg/kg Busulfan均可以诱导小鼠出现POI损伤，其中120 mg/kg CTX造模小鼠的卵巢系数（P<0.001）和E₂水平变化较小（P<0.05）,120 mg/kg CTX+12 mg/kg Busulfan组小鼠被毛粗糙，光泽度下降，反应迟钝，状态最差。与生理盐水对照组相比，75 mg/kg CTX造模组小鼠的卵巢组织中FOXO3a表达显著下调（P<0.05）,SIRT5表达没有显著变化（P>0.05），而120 mg/kg CTX造模组的SIRT5（P<0.05）和FOXO3a（P<0.05）表达均显著下调。120 mg/kg CTX造模后第2和7天，SIRT5（P<0.01）和FOXO3a（P<0.001）表达均显著下调，且第7天时表达水平变化最大（SIRT5,P<0.000 1;FOXO3a,P<0.000 1）。结论 120 mg/kg CTX诱导小鼠POI模型的卵巢损伤小于75 mg/kg CTX诱导的POI模型，并且120 mg/kg CTX造模第7天的SIRT5和FOXO3a表达变化最为显著，其作用机制可能与SIRT5-FOXO3a通路活性受抑制相关。

摘要: 目的 椎体成形术全称为经皮穿刺椎体成形术（percutaneous vertebroplasty,PVP），是临床上向病变椎体内注入骨水泥以达到强化椎体的技术。骨水泥的安全性和有效性研究是其临床应用的基础，本研究采用椎体成形术来评价和比较实验猪体内Tecres和不透射线骨水泥的安全性和有效性，并确定适合猪的穿刺方法以及临床前评价骨水泥安全性和有效性的方法。方法 将24头实验用猪（体重60～80 kg）随机分为试验组（A组）和对照组（B组）：A组为Tecres骨水泥组，B组为不透射线骨水泥组，每组12头。在C型臂X射线机的监视下，采用单侧椎弓根入路法经皮穿刺将Tecres骨水泥或不透射线骨水泥植入到猪的第1腰椎（L1）和第4腰椎（L4）中，分别于术后在4周和在26周采用安乐死的方法处死动物，取其L4椎体进行抗压强度测试，取其L1椎体进行硬组织病理学检查，观察植入部位的炎症反应、骨坏死情况以及骨整合程度。结果 在骨水泥植入术后第4周和第26周时，A、B两组之间椎体抗压强度的测试结果均无显著差异（P>0.05）。光学显微镜下的（×100）观察结果显示，术后第4周时，A、B两组均可见骨水泥被增生的纤维组织包裹，周边有淋巴细胞浸润，骨水泥与骨组织结合，骨小梁排列紊乱，成骨细胞及少量类骨质形成。术后第26周时，A、B两组均可见骨水泥，以及新生骨组织矿化、骨小梁融合、骨小梁结构规整致密且连续性好，未见明显的炎症反应。结论 在实验猪椎骨内，Tecres和不透射线骨水泥的抗压强度、引起的炎症反应、对骨的破坏以及与骨的整合程度均未见明显差异，均具有良好的生物相容性和成骨特性，表明用椎体成形术在猪体内评价骨水泥的安全性和有效性是科学的。