摘要: 本刊是我国实验动物科学与比较医学领域最早的一本专业学术期刊，严格遵守国家实验动物相关法律、法规和标准，包括但不局限于《实验动物管理条例》（2017年3月1日修订版）和《实验动物福利伦理审查指南》（GB/T 35892—2018）等，同时参考借鉴国际生物医学期刊关于动物实验研究报告的相关指南共识（如ARRIVE 2.0、IGP 2012、IAVE Guidelines 2010等）。

摘要: 选用合适的实验动物安乐死方法是保障动物福利的重要环节。本刊在三审三校过程中常发现实验动物安乐死方法选用不当导致退稿的情况。现根据国家标准GB/T 39760—2021 《实验动物安乐死指南》和《2020版美国兽医协会动物安乐死指南解析》[《实验动物与比较医学》 2021, 41（3）:195-206]，针对实验动物体内研究论文中常见安乐死方法，说明如下：1.二氧化碳（CO₂）不能用于犬、猫、非人灵长类等中大型实验动物安乐死，用于啮齿类动物（断乳后）和兔（应提前麻醉）时，需注意安乐死容器内的CO₂充盈速率达标。

摘要: 椎间盘突出症是骨科的高发疾病，而作为其关键病理基础的椎间盘退行性病变（intervertebral disc degeneration,IDD）是一个以细胞外基质进行性降解、结构破坏与生物力学功能丧失为特征的复杂病理过程，不仅在人群中呈现出更高的患病率，更是导致全球人类慢性腰背痛与功能障碍的首要原因，造成了巨大的社会经济负担。尽管构建IDD动物模型对探索该疾病病理机制与推动转化研究具有重要意义，但目前关于IDD的病因与病理生理机制尚未完全阐明，且人类与常见实验动物在脊柱解剖、生物力学及退变病程上存在显著差异，加之现有的IDD动物模型繁杂多样且缺乏统一标准。因此，本指南系统梳理了啮齿类动物、非人灵长类动物以及兔、绵羊/山羊、猪、犬等不同动物的IDD模型，重点阐述三类主流模型的建模原理：诱发性模型（如纤维环/髓核/终板损伤和机械力学损伤）可控性强、周期短，适用于模拟急性损伤与快速筛选疗法；自发性模型能更好地模拟人类与年龄相关的自然退变进程；基因修饰模型则为解析特定分子通路提供了有力工具。指南深入剖析了这些模型的关键技术要点、可重复性与临床相关性，并比较其优势、局限及适用研究场景，旨在引导研究者进行“以科学问题为导向”的精准模型选择。同时，为提升研究结果的深度与可比性，本指南提出了涵盖影像学、组织学、生物化学与分子生物学、生物力学及疼痛行为学等多维度的IDD动物模型实验终点评估体系与推荐观察时间窗，并明确了贯穿实验全程的“替代、减少、优化（replacement,reduction,refinement,3Rs）”伦理原则与动物福利要求。此外，指南还展望了结合单细胞组学、多尺度力学分析及加强疼痛表型评估等未来研究方向。本指南旨在为研究者在具体科学问题与资源条件约束下，如何规范化选择与应用IDD动物模型提供一套系统化、标准化的方法学框架，以期减少研究间的异质性，提升临床前研究成果的转化效率，促进本领域的高质量发展，最终为开发延缓乃至逆转IDD的创新疗法提供坚实的科学基础。

摘要: 胃溃疡（gastric ulcer,GU）是消化系统的常见病、多发病和顽固性疾病之一。脾胃虚寒是GU最常见且难以治愈的一种证型，是医学研究领域的重点和难点。因此，构建科学合理且符合临床实际的脾胃虚寒型GU动物模型并制定客观有效的评价标准，对于深入研究GU的发病机制和治疗方法具有重要意义。本文通过系统梳理相关文献，对脾胃虚寒型GU动物模型的制备方法进行了全面介绍：首先介绍西医GU病理模型的构建方法，如幽门结扎法、水浸-束缚应激法、乙醇诱导法、乙酸诱导法等；阐述中医脾胃虚寒证候模型的建立方法，包括饮食失节法、苦寒泻下法、过度劳倦法、耗气破气法和过食酸味法等；重点讲述脾胃虚寒型GU病证结合模型的构建方法，包括双因素造模法和三因素造模法。同时，从多个角度总结了脾胃虚寒型GU动物模型的评价指标，包括动物体征表征（外观症状、动物行为和代谢指标）、组织形态与分子生物学相关指标（胃功能、氧化应激、炎性因子、其他细胞因子、凝血4项、肠道菌群检测），力求构建一个综合性的评价体系。本文进一步从方药反证的角度，通过分析方剂的药物组成和药理作用效果，推断其治疗的疾病动物模型所属的证型，从而验证动物模型是否构建成功。通过本文综述，以期为构建与临床实际高度契合、体现中医药特色的GU中医证候动物模型提供有力参考，从而推动GU中医证候研究和中医药治疗GU方法的深入探索，促进中医药在GU治疗中的应用和发展。

摘要: 心血管疾病（cardiovascular diseases, CVD）具有较高的发病率、致残率和致死率等特点，是全球人类死亡的主要原因之一。血管重构是指在生理或病理条件下血管结构和功能的改变，通常发生在机体受损修复、疾病发展等过程。通过探究血管重构的机制有助于人们深入了解CVD的演变过程，从而开发出更为有效的早期诊疗方案，为CVD的防治提供新思路。血管重构的造模方法是研究血管重构的基石，血管重构模型用于多种疾病机制研究已取得了显著进展，尤其在动脉粥样硬化、高血压及血管重构等领域的应用中具有重要意义。常见的血管重构模型动物包括大鼠、小鼠、猪等，研究手段涵盖了机械损伤、药物干预、遗传改造等。不同类型的动物模型各有优势，如小鼠和大鼠模型适用于基因研究和高通量筛选，兔和猴模型因其接近人类病理而更有助于模拟临床条件下的血管重构。其中，大鼠模型因具有经济、易操作等特点而活跃在医疗保卫战的“一线”。当前血管重构模型主要依赖于经典方法 （如颈动脉球囊损伤法、结扎法和动脉钳夹术），并联合新兴的饮食法（如高脂饮食、高盐饮食）来构建。根据不同的实验需求选择不同的大鼠建模方法并结合使用可以有效模拟血管重构的不同机制，为CVD的研究提供可靠的动物模型。此外，这些大鼠模型能够反映不同病理状态下的血管反应，为药物研发和疾病治疗策略的制定提供重要的实验依据。尽管这些大鼠模型为血管重构的研究提供了宝贵的工具，但仍面临模型差异性大、可重复性差及与临床表现存在差异等问题，未来的研究应致力于改进现有模型的精确性和可靠性，以发展新的动物模型。本文以大鼠为例总结了目前血管重构模型的研究进展、模型类型以及其在实验中的应用，特别是在CVD和血管重构研究中的价值，并且通过回顾不同大鼠血管重构模型的优缺点，为未来血管重构相关的研究提供理论参考。

摘要: 探讨中医证候动物模型不同的构建方法及其优劣势，并针对现有构建方法存在的问题提出优化策略，以期为构建既保有中医证候本质又符合现代科研规范的中医证候动物模型提供参考。本文以“中医”“证候”“动物模型”为关键词检索并阅览知网、万方以及维普数据库中有关中医证候动物模型的文章，继而系统梳理了当前中医证候动物模型主要构建方法的理论依据、技术特点及存在问题，并针对存在的问题提出相应的优化措施。中医证候动物模型的构建方法包括中医病因病机构建法、现代医学病因病理构建法以及中西医病证结合构建法。中医病因病机构建法以整体观为指导，通过模拟六淫致病、情志失调等外因来构建证候模型；该方法虽契合中医理论内涵、操作简便且可控性强，但存在造模成功率低、病因-证候拟合度不足等问题。现代医学病因病理构建法基于微观病理机制，采用药物干预、手术建模等可控性强的技术手段；该方法虽具有客观指标明确、可重复性优的特点，但存在偏离中医“证”的本质、安全性不足等缺陷。中西医病证结合法在证候本质还原度与技术可行性上呈显著互补性，在方法论上实现了中医基础理论与临床辨证思维的系统融合，并整合现代医学的客观评价体系，提升了西医病理机制与中医证候演变规律的临床吻合度；然而，该方法仍面临证候辨识标准模糊、疾病进展模拟失真等共性挑战。中医证候动物模型的构建虽面临理论适配性差、技术标准化欠佳等问题，但在验证方药疗效和推动中医药国际化方面仍具有不可替代的价值。未来应通过优化动物选择、完善制备方法理论依据、规范造模因素设置、明确造模成功标准等措施优化中医证候动物模型的构建。

摘要: 目的 通过原核表达和纯化得到树鼩Vasorin(VASN)重组蛋白，以此蛋白免疫小鼠制备抗树鼩VASN单克隆抗体，并初步评估其应用价值。方法 采用反转录聚合酶链式反应（reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）法体外扩增树鼩VASN基因全长序列，将树鼩VASN基因片段插入到p ET-30a载体中，构建pET-30a-VASN重组质粒，用Bam HⅠ和SalⅠ对重组质粒进行双酶切鉴定，并通过测序进一步鉴定其正确性；将测序正确的重组质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞中，利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl β-Dthiogalactoside,IPTG）诱导表达重组蛋白VASN；通过SDS-PAGE分离蛋白VASN，并利用KCl纯化重组蛋白VASN；用纯化的重组蛋白VASN对BALB/c小鼠进行4次免疫，并通过酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测小鼠血清抗体效价；取血清抗体效价达到1∶10 000以上的小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，先利用含黄嘌呤、氨基蝶呤及胸腺嘧啶核苷（hypoxanthine-aminopterin-thymidine,HAT）的培养基筛选杂交瘤细胞，随后通过ELISA筛选出能够分泌特异性抗体的阳性杂交瘤细胞株，并通过有限稀释法进行亚克隆，获得单克隆杂交瘤细胞株；通过腹水诱生法制备大量VASN单克隆抗体，利用rProtein G纯化抗体，采用ELISA和蛋白质印迹法检测单克隆抗体的结合常数和体外反应的特异性。结果 成功扩增出树鼩VASN基因并构建了树鼩pET-30a-VASN重组质粒，重组质粒经测序得到的序列与树鼩VASN目的基因序列完全一致；重组蛋白VASN主要以包涵体的形式存在，纯化后的蛋白纯度达到90%，符合后续免疫实验的要求；利用重组蛋白VASN 4次免疫小鼠后，小鼠血清抗体效价达1∶729 000；利用杂交瘤技术及有限稀释法获得单克隆阳性杂交瘤细胞株，通过腹水诱生和纯化得到单克隆抗体，ELISA测定单克隆抗体的结合常数值达2.59×10～7 L/mol；蛋白质印迹法结果显示，树鼩VASN单克隆抗体能与树鼩VASN重组蛋白结合，与猪视黄醇结合蛋白4重组蛋白、人源VASN-富含亮氨酸重复序列重组蛋白以及牛血清白蛋白均无结合反应；而抗树鼩VASN单克隆抗体能特异性识别树鼩心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和肌肉组织中的VASN蛋白，且条带明显、背景清晰。免疫组织化学检测结果显示，该单克隆抗体可以识别蛋白VASN mRNA表达水平较高的树鼩脾脏、肺脏和树鼩永生化成纤维细胞中的VASN蛋白。结论 成功制备了抗树鼩VASN的单克隆抗体，该抗体可用于树鼩永生化成纤维细胞、树鼩脾脏组织和肺脏组织的免疫组织化学检测，为进一步探索VASN在树鼩模型中的功能提供了重要的工具。

摘要: 目的 采用两种浓度的乙醇溶液损伤构建宫腔粘连（intrauterine adhesions,IUA）小鼠模型，通过表型比较优化更稳定的IUA造模方法。方法 将20只8周龄的雌性C57BL/6N小鼠随机分为2组，即95%乙醇损伤组和50%乙醇损伤组。利用自身对照法，向左侧子宫角灌注乙醇溶液制作IUA模型，向右侧灌注生理盐水作为假手术。每组分别于造模后第7天和第15天各安乐术处死5只小鼠，摘取子宫，通过苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察子宫内膜病理变化，Masson染色观察子宫内膜纤维化程度。利用实时荧光定量PCR检测子宫组织中纤维化标志物和促炎因子的表达情况。结果 造模后第7天，与假手术侧相比，小鼠损伤侧子宫明显失去弹性，炎症浸润显著增强，且纤维化程度显著增高（P<0.05）;95%乙醇损伤组小鼠的右侧子宫内膜厚度显著下降（P<0.05），而50%乙醇损伤组小鼠的右侧内膜厚度无明显改变（P>0.05）;50%乙醇损伤组的右侧子宫组织纤维化标志分子Ⅳ型胶原α1链（collagen typeⅣalpha 1 chain,Col4A1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)，以及促炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达水平均显著升高（P<0.05），而95%乙醇损伤组的右侧子宫组织相同指标虽有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。造模后第15天，与假手术侧相比，两个乙醇损伤组的子宫组织病理学变化均不明显；50%乙醇损伤组子宫组织中Col4A1、TGF-β、TNF-α和IL-1β的表达水平仍显著升高（P<0.05），而95%乙醇损伤组子宫组织仅IL-1β显著升高（P<0.05）。结论 向子宫角灌注95%乙醇溶液制作IUA小鼠模型的子宫组织病理学改变比50%乙醇损伤组明显，适合进行组织病理学研究。但灌注50%乙醇溶液后小鼠子宫组织中纤维化标志物和促炎因子表达水平升高较95%乙醇损伤组更明显，提示50%乙醇溶液构建的IUA小鼠模型更适合分子病理学研究。

摘要: 目的 为保证研究数据的可靠性，建立SD大鼠90 d喂养试验的背景数据。方法 汇总2020—2023年国家药物安全评价监测中心的6个独立的SD大鼠90 d喂养试验中空白对照组动物（120只SPF级4周龄SD大鼠，雌雄各半，仅给予普通鼠全价颗粒饲料）的背景数据。检疫期结束后，继续观察大鼠90 d，之后腹腔注射舒泰（50 mg/mL）麻醉、取血、处死并解剖。通过分析空白对照组数据，建立SD大鼠相关背景数据库。结果 雄性和雌性大鼠的平均体重均稳步增长，雄性大鼠体重增长幅度更为明显。90 d内雄性和雌性大鼠平均体重分别增长至500 g和300 g以上。3周后，雄性大鼠每日平均摄食量基本稳定在25～28 g/只，雌性大鼠每日平均摄食量基本稳定在16～19 g/只。所有动物的食物利用率自实验第1周开始逐渐下降。白细胞分类计数结果中，雌性与雄性白细胞（white blood cell,WBC）、中性粒细胞（neutrophil,Neut）、淋巴细胞（lymphocyte,Lymph）、单核细胞（monocyte,Mono）的数值差异有统计学意义（P<0.001），但中性粒细胞百分率（neutrophil percentage,%Neut）、淋巴细胞百分率（lymphocyte percentage,%Lymph）、单核细胞百分率（monocyte percentage,%Mono）两性别之间差异无统计学意义（P >0.05）。雄性动物的平均红细胞数（red blood cell count,RBC）、血红蛋白浓度（hemoglobin,HGB）、红细胞比容（hematocrit,HCT）、血小板数（platelet count,PLT）、凝血酶原时间（prothrombin time,PT）和活化部分凝血激酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）高于雌性（P<0.05）。雄性大鼠平均丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、肌酸磷酸激酶（creatine phosphokinase,CK）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、葡萄糖（glucose,GLU）、甘油三酯（triglyceride,TG）数值显著高于雌性（P<0.05）。雄性动物的尿pH值在5.0～8.5，雌性动物尿pH值在6.5～9.0。绝大多数雄性动物的尿比重低于1.020，绝大多数雌性动物的尿比重低于1.015。雄性动物各脏器（肾上腺、生殖器官除外）质量均高于雌性（P<0.001），而雌性动物的脏体比（肾脏、生殖器官除外）高于雄性（P<0.001）。结论 总结国家药物安全评价监测中心6项90 d喂养试验中未给药对照组SPF级SD大鼠的体重、摄食量、血液学、血清生化各项指标的背景参考值范围，可为相关研究提供重要的参考数据。梳理大鼠背景性和自发性的组织病理学改变，有助于后续研究的规范化和标准化，以及对异常结果的评判分析。

摘要: 目的 探讨活体探头式激光共聚焦成像（probe-based confocal laser endomicroscopy,pCLE）技术在快速检测与评估小鼠消化道组织形态特征中的应用价值。方法 将12只6周龄的SPF级雄性昆明小鼠随机分为两组，其中6只使用乙醇体积分数为52%的红星牌二锅头白酒进行灌胃造模，另外6只使用生理盐水灌胃作为对照。连续灌胃28 d后，每组随机选取3只，经3%异氟烷吸入深度麻醉后颈椎脱臼处死，即刻剖取胃、十二指肠、空肠和直肠组织，浸入1%荧光素钠溶液染色，采用pCLE技术观察各组织黏膜表面的微观结构。剩余模型组和对照组小鼠经3%异氟烷吸入深度麻醉后，先后使用生理盐水、4%多聚甲醛溶液进行心脏灌流，剪取胃、十二指肠、空肠及直肠各组织进行脱水、切片和苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色，于光学显微镜下观察各节段组织的形态学变化。结果 pCLE观察显示，对照组小鼠消化道黏膜组织表面荧光染色均匀，胃小凹、肠绒毛及肠隐窝形状完整，排列紧密，边缘结构清晰；而模型组小鼠消化道黏膜发生肿胀和变形，并伴有荧光染色不均匀和荧光素渗漏的现象。此外，部分组织出现缺损或细胞脱落，相邻特征结构（如胃小凹、肠隐窝）之间的边界模糊。HE染色观察显示，对照组小鼠消化道组织结构正常，细胞排列整齐、无缺损，黏膜下腺体大小一致且无增生性改变，无明显炎性细胞浸润；而模型组小鼠部分消化道组织结构缺损，细胞排列紊乱稀疏，黏膜下腺体萎缩，并伴有明显的炎性细胞浸润。pCLE观察结果与HE染色的组织学特征一致。结论 pCLE能够实现对消化道黏膜结构特征的快速、实时、大范围、高分辨率显微成像，并且能更真实、全面地展示其生理及微观结构特征，该技术在小动物消化系统损伤的组织学评估研究中显示出良好的应用前景和实际应用价值。