摘要: 支气管哮喘（简称哮喘）是一种以气道炎症、气道高反应性和气道重塑为特征的常见的慢性呼吸系统疾病，其发病机制复杂且具有异质性，涉及遗传、免疫、环境等多种因素。目前针对哮喘的治疗手段相对有限，深入探究哮喘的发病机制、探寻有效的治疗方法以及开发新型药物已成为当务之急。因此，哮喘动物模型的建立至关重要。然而，至今仍没有一种理想的哮喘动物模型能够全面、准确地复刻人类哮喘发生与发展的所有特征。本文对近5年来哮喘动物模型建立方法的研究进展进行了系统梳理，详细综述了常见实验动物（如小鼠、大鼠、豚鼠）、常见致敏剂（包括卵清蛋白、屋尘螨、脂多糖、甲苯二异氰酸酯），以及用常见实验动物及致敏剂建立哮喘动物模型的方法，并对这些模型的优缺点和适用范围进行了客观评价。本文总结了哮喘模型的评价指标，涉及行为学、肺功能、病理学、免疫学、药效学等多个方面。难治性哮喘动物模型的建立方式虽尚未完善，但通过相关文献检索，总结了难治性哮喘动物模型造模的几种思路，旨在为相关研究提供有价值的参考。根据现有的科学技术，笔者推测未来哮喘动物模型的研究将更加聚焦于临床相关性、技术创新以及多学科融合。具体而言，未来哮喘动物模型将通过多重致敏原联合诱导并应用基因编辑等新技术，提升模型的临床相关性，实现模型的多样化与个性化，并使用生物成像、传感技术动态监测哮喘气道炎症及气道重塑等相关反应，甚至可利用芯片技术寻找动物模型替代方法，最终致力于开发出更能模拟人类哮喘复杂性和异质性的多因素复合模型。

摘要: 目的 研究db/db小鼠口腔菌群的改变，为探寻2型糖尿病与口腔微生态的联系提供实验基础。方法 选取8只10周龄雄性db/db小鼠为糖尿病实验组，8只10周龄雄性db/m小鼠为正常对照组。适应性喂养5 d后，在相同饲料饲养的第6天和第37天行尾静脉采血，测定两组小鼠的空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）水平和口服葡萄糖耐量（oral glucose tolerance test,OGTT），以验证糖尿病模型的可靠性。在相同饲料饲养的第15天采集两组小鼠两侧颊黏膜、舌背与舌腹、口底黏膜、上腭硬区黏膜、上下颌牙龈的龈上区域的口腔菌群样本，提取口腔微生物的基因组DNA后，使用GeneAmp 9700热循环仪对其中16S核糖体RNA（16S ribosomal RNA,16S rRNA）基因的V3^V4区进行扩增，然后在Illumina MiSeq平台上通过双标引扩增和测序对口腔菌群结构进行评估，然后应用QIIME（version 1.6.0）软件进行生物信息学分析。结果 实验开始后第6天和第37天的FBG水平和OGTT检测结果均显示db/db小鼠比db/m小鼠表现出明显的2型糖尿病症状。α多样性分析显示两组小鼠的口腔菌群在多样性上无显著差异（P>0.05），而在丰富度上差异显著（P<0.05）。主坐标分析显示db/db小鼠的口腔菌群结构与db/m小鼠存在显著差异（P<0.05），物种组成分析以及LEfSe分析显示db/db小鼠口腔菌群在门水平以变形菌门（p_Proteobacteria）为主的相对丰度显著上升（P<0.05），而在属水平上变形杆菌属（g_Proteus）和肠球菌属（g_Enterococcus）的相对丰度极显著上升（P<0.001）。结论 2型糖尿病db/db小鼠的口腔菌群结构和丰富度均较血糖正常的对照小鼠出现了显著变化。

摘要: 职业健康安全管理体系作为现代企业管理制度之一，越来越受到人们的重视。近年来，职业健康安全管理体系在各个领域不断完善和发展，逐渐成为企业竞争力的重要指标。目前，国际实验动物评估和认可委员会（Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care International，简称AAALACInternational）和中国合格评定国家认可委员会（China National Accreditation Service for ConformityAssessment,CNAS）均对实验动物相关的职业健康管理提出了要求。而在国内实验动物行业，由于各机构对职业健康相关的法律法规不够熟悉，缺乏经验丰富的管理人员，实验动物机构的职业健康安全管理体系发展相对滞后，尚处于发展初期。本文通过总结作者在实验动物机构建立职业健康安全管理体系的实践经验，首先介绍了国内外有关实验动物的职业健康安全法律法规、我国实验动物机构常见职业病及其危害因素，然后从建立职业健康安全管理制度、开展职业健康安全培训、从业人员职业健康检查、职业病危害因素现场检测、落实建设项目职业病防护设施“三同时”制度、建立及维护职业健康档案、建立职业危害告知管理制度、建立职业病危害事故应急救援预案等方面指出实验动物机构进行职业健康安全管理体系建设的要点，以供行业内作参考。

摘要: 重症肌无力（myasthenia gravis,MG）是一种自身免疫性疾病，主要表现为骨骼肌无力，严重时可累及呼吸功能。目前，西医治疗MG以免疫抑制剂为主，但长期用药的不良反应显著；而中医治疗具有多靶点干预的优势。由于MG的发病机制尚未完全明确，因此建立契合中西医临床特征的动物模型对机制研究及新药开发至关重要。本文系统梳理了MG的中西医病因病机、诊断标准及动物模型研究进展。西医认为MG发病与遗传易感性、环境因素及自身抗体介导的突触后膜损伤密切相关；中医则将其归为“痿证”，病机为先天禀赋不足与后天失养。西医诊断需综合典型症状、疲劳试验、血清抗体检测及电生理检查；中医诊断则以主症结合次症及舌脉辨证分型。现有动物模型以实验性自身免疫性重症肌无力（experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG）和被动转移重症肌无力（passive transfer myasthenia gravis,PTMG）为主。其中，电鳐乙酰胆碱受体（acetylcholinereceptor,AChR）诱导的EAMG模型与西医诊断标准吻合度较高，但中医次症吻合度不足；人工合成AChR多肽模型应用广泛，但中医证候吻合度低；肌肉特异性酪氨酸激酶（muscle-specific tyrosine kinase,MuSK）、低密度脂蛋白受体相关蛋白4(low density lipoprotein receptor associated protein 4,LRP4)诱导模型及转基因模型创新性强，但临床吻合度偏低。模型评估需结合行为学、电生理及免疫指标，而中医证候模型尚缺系统性构建。笔者认为，未来研究需融合中医病因学造模法与西医病理机制，构建病证结合模型，并建立基于“以方验证”的中医证候评价体系，结合新兴技术提升模型科学性与实用性。本文将为优化MG动物实验设计、推动中西医结合研究提供理论依据，也为中药复方疗效评价及机制探索奠定基础。

摘要: 目的 通过模拟排卵功能障碍型异常子宫出血（abnormal uterine bleeding-ovulatory dysfunction,AUB-O）病因，建立异常子宫出血大鼠模型，为异常子宫出血病理机制研究及治疗药物开发提供可靠的模型支持。方法 将24只成年（10周龄）雌性SD大鼠适应性饲养后，随机分为正常对照组（6只）和模型组（18只）。正常对照组大鼠在屏障环境中正常饲养；模型组大鼠在屏障环境中经背侧入路行双侧卵巢切除术，休养1周后开始造模用药。模型组造模第1～3天每日每只大鼠背部皮下注射雌二醇0.5 mg，第4～7天每日皮下注射孕酮5.0 mg；同时于第6天经背侧相同手术切口向双侧子宫腔各注射0.5 mL大豆油，于第8天行米非司酮（10 mg/kg）灌胃，造模期间持续观察大鼠所处动情周期的阶段及其变化趋势。造模后48 h内观察并记录大鼠子宫出血情况，米非司酮灌胃后0、12、24、36、48 h模型组动态收集血清和子宫组织样本，正常对照组在36 h同时取材。取材后分别进行HE染色、血清性激素ELISA测定、免疫组织化学检测、TUNEL凋亡染色、蛋白质印迹检测、转录组学测序和生物信息学分析，对异常子宫出血大鼠模型进行综合评价。结果 异常子宫出血大鼠表现为子宫出血，内膜剥脱损伤、复旧不全，内膜炎性细胞浸润、凋亡增强，间质、腺体和血管结构破坏。与正常对照组相比，异常子宫出血大鼠的血清卵泡刺激素、雌二醇和促黄体生成素水平明显升高（P<0.05）；子宫内膜血管密度明显降低（P<0.05）；血管内皮生长因子在子宫内膜剥脱处表达定性观察到明显增强，而在间质血管周围表达显著下降（P<0.01）；基质金属蛋白酶-9在内膜损伤部位表达定性观察到明显增强，而在未剥脱间质和腺体处表达显著降低（P<0.01）；子宫内膜间质细胞凋亡显著增强（P<0.01）；成纤维细胞生长因子2和内皮素-1在子宫组织中的表达水平均明显下降（P<0.05）。比较异常子宫出血大鼠与正常大鼠子宫组织的转录组测序结果，共筛选到4 723个差异表达基因，其中表达上调基因为2 191个，表达下调基因为2 532个；KEGG富集分析显示，差异基因显著富集在炎症、免疫凋亡、细胞信号转导、增殖分化和肌肉收缩等相关通路。结论 采用雌激素、孕激素和米非司酮序贯给药模拟AUB-O病因的方法，可成功建立异常子宫出血大鼠模型。该模型的子宫内膜损伤与炎症和凋亡相关，病理表现受血管收缩和内膜再生能力异常影响。该大鼠模型具有与临床非结构性病因异常子宫出血相近的病理特征，可以作为研究病理机制和治疗方法的有效模型。

摘要: 岁序更替，华章日新。回顾2024年，本刊出版工作稳扎稳打，保质保量地完成了全年6期超700页的出版任务。为了提升读者的阅读体验，本刊改用了视觉友好型的王子双胶本白书纸，让学术知识的传递更加舒适宜人。同时，新辟了实验动物学专家主笔的“科普讲坛”专栏，每期1篇，旨在打破实验动物科学与生物医学等其他学科之间的专业壁垒，让更广泛的交叉学科研究人员甚至大众了解实验动物与比较医学的发展历史和专业特点，更好地理解动物实验伦理和福利要求。为进一步提升期刊的学术引领力，本刊在不断完善编辑部初审、同行专家外审、主编及常务编委终审的三审机制基础上，继续加强约稿、组稿力度，推出了多篇具有较高行业影响力的优秀文献，包括：填补国内空白的中国首部神经疾病动物模型指南《自发性脑出血动物模型选择及临床前药物试验指南（2024年版）》，为神经疾病动物模型的研究和应用提供了权威的指导和规范；瞄准行业热点及难点的《中国实验猴产业的历史、现状、挑战与机遇》，引起了国内实验动物资源及科技产业工作者的广泛思考和积极讨论；借鉴国际指南ARRIVE、符合中国国情及相关法规标准的国内首份《动物实验与比较医学研究论文出版规范清单（2024年版）》，旨在进一步规范中国动物实验与比较医学研究论文的质量标准和出版流程，促进科技及期刊的高质量发展和国际交流。

摘要: 目的 运用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱（ultra-high-performance liquid chromatography coupled with quadrupole electrostatic field orbital trap-mass spectrometry,UHPLC-QE-MS）非靶向代谢组学分析法探讨不同海拔高原鼠兔肾脏低氧适应性代谢变化的潜在机制。方法 捕捉青海省果洛藏族自治州玛多县星宿海地区海拔4 360 m (MD组)和青海省海北藏族自治州门源地区海拔2 900 m (MY组)处的高原鼠兔各10只，经麻醉后采集血清样本，经安死术后采集肾脏样本，分别进行一般生理生化指标测定和代谢组学分析。其中一部分血清样本用于血液学分析，另一部分用于血气分析，剩余部分检测生化指标。肾组织样本中代谢物提取后，进行UHPLC-QE-MS分析，运用代谢组学主成分分析（principal component analysis,PCA）和正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA）方法分析差异代谢物，筛选标准为变量投影重要度（variable Importance in the projection,VIP）>1.5且倍数变化（fold change,FC）>1.5或VIP>1.5且FC<1/1.5。利用相关性分析热力图、差异显著性分析火山图、信号通路识别气泡图和矩形图分别分析差异代谢物及相关信号通路。结果 MD组高原鼠兔的红细胞计数、葡萄糖、尿素氮、尿酸和同型半胱氨酸含量高于MY组，而血红蛋白、血细胞比容、肌酐和二氧化碳结合力低于MY组，这表明不同海拔的高原鼠兔血液携氧能力存在明显差异。经主成分模式识别分析和OPLS-DA置换检验显示，MD组和MY组高原鼠兔肾脏代谢物具有明显的聚类型分布（R2Y=0.930,Q2=0.655）。按照筛选标准，并经数据库比对发现，不同海拔高原鼠兔的肾脏代谢物差异分子有46个，其中MD组高原鼠兔的蟾蜍二烯羟酸内酯、腺苷、腺嘌呤、薯蓣皂苷、盐酸小檗碱、鼠尾草酚和虾青素表达水平均显著升高（VIP>1.5,P<0.05），花生四烯酸、组胺和香豆素水平显著下降（VIP>1.5,P<0.05）。相关信号通路分析显示，缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成通路具有最大影响因子（P<0.05），而泛酸盐和辅酶A生物合成通路呈现最显著富集（P<0.05）。结论 不同海拔高原鼠兔肾脏差异代谢物氨基酸、泛酸盐及辅酶A通路可能参与高原鼠兔高原低氧适应代谢机制。

摘要: 目的 为定位豚鼠优势性状基因筛选遗传标志，探索豚鼠酪氨酸酶（tyrosinase,TYR）、黑素皮质素1受体（melanocortin 1 receptor,MC1R）基因多态性及其mRNA表达水平与毛色表型的关系。方法 选择自主培育的普通级豚鼠57只，依据毛色分为白（22只）、花（22只）和黑（13只） 3组。腹腔注射过量戊巴比妥钠对豚鼠施行安乐死后，取背部皮肤，提取组织中DNA。通过克隆测序，检测各组豚鼠TYR、MC1R基因外显子编码序列（coding sequence,CDS）的多态性，采用实时荧光定量PCR方法检测两个基因在皮肤组织中的mRNA表达，进而探讨两基因与豚鼠毛色的关系。结果 在TYR外显子Ⅰ的CDS区域发现1个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点，其碱基A被G替换。所有白色豚鼠的TYR基因呈G/G基因型；深色（花、黑）豚鼠无G/G基因型，多数为A/A型，少数为A/G型；黑色豚鼠的A/A基因型频率高于花色豚鼠。MC1R基因外显子有2 760 bp序列缺失，标记为-基因；非缺失样本标记为N基因。大部分白色豚鼠的MC1R基因呈-/-基因型；花色豚鼠以-/N为主；黑色豚鼠以N/N为主，-/N次之。白色豚鼠的TYR基因表达水平较高，花色豚鼠较低，黑色豚鼠居中，但三者无显著性差异（P>0.05）。白色豚鼠的MC1R基因表达水平非常低，花色及黑色豚鼠均极显著高于白色豚鼠（P<0.01），黑色豚鼠又显著高于花色豚鼠（P<0.05）。结论 豚鼠TYR与MC1R基因协同调控毛色。TYR基因的G位点突变可能导致豚鼠白化，MC1R基因的N位点改变影响毛色的深浅。

摘要: 目的 通过检测肥胖型食蟹猴的一般身体指标与血糖、血脂的动态变化，探究各指标之间相关性，为肥胖食蟹猴模型研究提供参考依据。方法 选取5～17岁的正常雄性食蟹猴30只（体重指数<35 kg/m²且糖化血红蛋白含量<4.50%）和自发性肥胖雄性食蟹猴99只（体重指数≥35 kg/m²且糖化血红蛋白含量<4.50%），连续3年监测其腹围、皮脂厚度、体重、体重指数、空腹血糖、糖化血红蛋白以及血脂四项指标，并使用重复测量方差分析、简单线性回归和多元线性回归相关性分析方法分析各指标间的相关性。结果 与正常食蟹猴相比，肥胖食蟹猴的腹围、皮脂厚度、体重、体重指数和甘油三酯水平均显著升高（均P<0.05）；正常食蟹猴的皮脂厚度逐年上升，其余指标维持稳定。与第1年相比，肥胖食蟹猴第2年腹围、皮脂厚度、体重、体重指数、甘油三酯和空腹血糖水平显著升高（均P<0.05），且升高趋势在第3年持续存在（均P<0.05）。正常食蟹猴第2、3年的肥胖发生率分别为16.67%和23.33%，糖尿病的发病率均为16.67%。肥胖食蟹猴第2、3年糖尿病的发病率分别为29.29%、44.44%，其中在11～13岁群体发病率分别为36.36%、44.68%，大于13岁群体的发病率（分别为28.13%和51.35%）。相关性分析结果显示，糖尿病发病组食蟹猴的空腹血糖与年龄、腹围、皮脂厚度、体重、甘油三酯水平均显著相关（均P<0.05）。结论 长期肥胖可导致食蟹猴的一般身体指标及空腹血糖水平升高，并增加糖尿病的发病率；在肥胖引起的糖尿病食蟹猴中，其空腹血糖与年龄、体重、腹围、皮脂厚度、甘油三酯水平均高度相关，这对于预测自发性糖尿病的发生有一定意义。

摘要: 目的 利用肝螺杆菌（Helicobacter hepaticus,H.hepaticus）致维生素D受体（vitamin D receptor,VDR）缺陷小鼠肠纤维化，构建炎性肠病模型，初步探究其病理特征及发病机制。方法 用2×10～8 CFU的H.hepaticus菌液灌胃野生型和VDR^-/-雄性小鼠各5只(分别命名为WT和VDR^-/-小鼠感染组)，隔天1次，连续3次；同时设立未感染对照组，即野生型和VDR^-/-雄性小鼠各5只，灌胃等体积PBS。最后一次灌胃后第7天检测小鼠感染情况，确认感染后每周称量1次小鼠体重。于确认感染后第16周时剖检小鼠，采集并测量结肠组织长度，取粪便检测含水量；将结肠组织分成4份，一份做石蜡切片用于HE、阿尔辛蓝-过碘酸希夫（alcian blue-periodic acid Schiff,AB-PAS）、Masson和免疫组织化学染色，一份提取DNA后使用实时荧光定量PCR （real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RFQ-PCR）检测H.hepaticus定植水平以判断感染效果，一份提取RNA后采用反转录PCR （reverse transcription-PCR,RT-PCR）法检测细胞因子表达情况，另一份提取蛋白后采用蛋白质印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin,α-SMA）和白细胞介素（interleukin,IL）-33表达水平。结果 所有感染组小鼠经灌胃3次后均成功感染H.hepaticus。与VDR^-/-小鼠未感染对照组相比，VDR^-/-小鼠感染H.hepaticus 16周后体重明显减轻（P<0.05），并出现肠道出血情况，粪便含水量显著多于未感染对照组和WT小鼠感染组（P<0.05）。与WT小鼠感染组相比，VDR^-/-小鼠感染组的结肠组织经HE染色显示炎性细胞浸润，AB-PAS染色显示肠腺萎缩不规则、腺泡减少，Masson染色显示胶原面积增多。RT-PCR显示VDR^-/-小鼠感染组的结肠组织中IL-6、IL-33、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和α-SMA等炎症及纤维化相关基因的转录水平比WT小鼠感染组明显升高（P<0.000 1）；免疫组织化学法和蛋白质印迹结果显示IL-33和α-SMA蛋白表达水平也明显增多（P<0.001）。结论 VDR^-/-小鼠感染H.hepaticus后表现为更严重的炎症反应，出现黏膜炎性浸润、黏膜组织功能受损、胶原沉积等病变，提示炎性肠病模型构建成功。进一步研究发现VDR缺陷可能通过影响IL-33表达加剧了炎性肠病相关的肠纤维化进程。