摘要: 【目的】α-半乳糖苷酶A(α-galactosidase A, GLA)在生物体内生长发育、营养吸收及应对逆境响应中发挥重要作用，尽管在动植物中已有较多研究，但其在螨类中的功能尚未见报道。本研究旨在探讨GLA基因在二斑叶螨Tetranychus urticae取食寄主植物过程中的作用，为害螨防控策略提供重要的理论依据。【方法】基于二斑叶螨基因组与唾液蛋白组获得基因TuGLA的全长开放阅读框序列，并利用Expasy, Clustal, Jalview和MEGA等进行生物信息学分析；采用RT-qPCR检测TuGLA在二斑叶螨不同发育阶段(卵、幼螨、前若螨、后若螨和雌成螨)及取食菜豆叶片不同时间点(1, 3, 6, 9, 12和24 h)和取食不同寄主植物(菜豆、番茄、黄瓜、玉米、棉花和烟草)叶片12 h时的雌成螨中的表达量；利用RNAi饲喂雌成螨dsTuGLA沉默TuGLA,计算5 d内死亡率和产卵量及对菜豆叶片的取食为害面积。【结果】二斑叶螨TuGLA(GenBank登录号：XP＿015794636.1)的编码序列(coding sequence, CDS)全长为1 275 bp,编码424个氨基酸，预测其蛋白分子质量为48 kD,理论等电点5.01; TuGLA的N端第1-18氨基酸位为信号肽序列，无跨膜结构域。TuGLA与叶螨属螨类GLA亲缘关系最近。TuGLA在二斑叶螨各发育阶段均有表达，在成螨时期表达量最高。TuGLA在二斑叶螨雌成螨取食菜豆叶片9 h时的表达量最高；与取食菜豆叶片12 h时的对照组雌成螨中TuGLA的表达量相比，取食番茄、黄瓜、玉米、棉花和烟草叶片12 h时雌成螨中TuGLA的表达量显著上调。沉默TuGLA后二斑叶螨雌成螨的5 d内死亡率和产卵量较dsGFP对照组的分别显著升高和下降，在24 h内对菜豆叶片的取食为害面积较dsGFP对照组的显著下降。且沉默TuGLA后的二斑叶螨取食菜豆叶片3 d内的死亡率比dsGFP对照组的死亡率显著升高。【结论】二斑叶螨取食不同寄主植物以及取食时长将诱导TuGLA的表达。经RNAi沉默TuGLA后可显著影响二斑叶螨的存活率、产卵量和对寄主植物的为害程度。本研究的结果为深入探究二斑叶螨的取食机制提供了理论依据。

摘要: 【目的】探索采用性诱和花香诱捕作为草地螟Loxostege sticticalis成虫监测方法的可行性及其理论依据。【方法】田间调查、解剖和分析性诱、花香诱捕和网捕草地螟雌蛾卵巢和雄蛾精巢的发育状态，记录和分析卵量、诱蛾量及田间调查的种群数量以及其与迁飞状态的关系。【结果】草地螟雄蛾精巢与日龄之间的关系密切，其回归方程为y=1.289-0.1288x+0.003516x²。2020-2023年在河北康保田间试验中发现，当性诱能诱捕到雄蛾时，雌蛾交配率为66.7%～100%,Ⅳ级卵巢占比44.1%-95.4%;不能诱捕到雄蛾时雌蛾交配率为0%-30.3%,Ⅳ级卵巢占比0%～3.6%。在内蒙古自治区克什克腾旗大石门镇2024年6月12日至6月22日期间，花香诱捕的雌蛾的平均交配率（94.3%±2.3%）,显著高于网捕雌蛾的平均交配率（76.2%±5.3%）。花香诱捕与网捕的雌蛾平均交配次数没有差异。花香诱捕的雌蛾卵巢中的剩余卵量为（169.8±15.4）粒，显著低于网捕雌蛾卵巢中的剩余卵量[（267.9±20.7）粒]。性诱雄蛾精巢平均体积最大[（0.21±0.01） mm³],其次为网捕雄蛾精巢体积[（0.19±0.02） mm³],花香诱捕雄蛾精巢体积最小[（0.15±0.01） mm³]。性诱和花香诱捕草地螟成虫数量与其生理状态密切相关，性诱到的成虫是正在求偶的雄蛾，花香诱捕的是已经交配和产卵过或部分产卵的雌蛾以及已经交配的雄蛾。因此，迁入代和本地繁殖代的雄蛾对性信息素敏感和反应强烈，而迁出代的雌蛾卵巢发育级别低，雄蛾发育也不成熟，没有显示出对性信息素和花香气味的嗅觉行为反应。2020-2024年在河北康保和内蒙古的克什克腾旗不同季节的大量田间试验验证了这一关系。【结论】性诱和花香诱捕相结合可以帮助分析田间草地螟的生理状态，并判断其田间迁飞状态以及下一代的种群动态。

摘要: 【目的】为了解决中华蜜蜂Apis cerana cerana人工授精后精子转移率低的问题，延长授精蜂王在蜂群中产受精卵的时间。【方法】选取中华蜜蜂7日龄的处女蜂王分别注射1, 3和5μL精液，每个剂量包括处理组和对照组，每组5头蜂王。处理组蜂王在授精完成后立即在其腹部末端套上塑料装置，对照组蜂王腹部末端则不套上塑料装置。24 h后，统计处理组和对照组每一蜂王的受精囊内精子数量。【结果】中华蜜蜂授精后的蜂王套上塑料装置进行的物理阻隔可显著提高精子向其受精囊的转移率，特别是蜂王被授精低剂量精液时具有显著优势。精子向受精囊的转移率由传统人工授精时的约11%提高至43%,授精蜂王产受精卵的时间明显延长。应用该方法成功解析了中华蜜蜂的体色遗传规律：中华蜜蜂体色由1对等位基因控制，黄色为显性，黑色为隐性，F₁代杂合蜂王与黑色雄蜂回交子代的三型蜂体色分离比均呈现稳定的1∶1,符合孟德尔遗传规律。【结论】本研究优化的精子转移方法可显著提高人工授精后中华蜜蜂蜂王侧输卵管内精子向受精囊的转移率，特别适用于授精低剂量精液（例如单雄授精）,可成功应用于体色遗传规律的研究中，为中华蜜蜂的选育与种质资源保护提供了理论基础与技术支撑。

摘要: 【目的】本研究旨在超微结构和基因组水平上对一色草蟋蝉Tettigetta isshikii成虫贮菌体、脂肪体和其他组织中的专性共生菌及兼性共生菌多样性与功能进行研究，更深入理解半翅目(Hemiptera)头喙亚目(Auchenorrhyncha)昆虫与内共生菌的共生关系。【方法】野外采集一色草蟋蝉雌雄成虫，采用透射电子显微镜和荧光原位杂交等技术明晰雌成虫贮菌体、脂肪体、卵巢、受精囊、唾液腺、锥形体、滤室和肠道及雄成虫精巢中共生菌Karelsulcia,Hodgkinia和沃尔巴克氏体Wolbachia的分布。对一色草蟋蝉雌成虫贮菌体和脂肪体及雄成虫精巢中的共生菌进行宏基因组测序和组装，通过基因组注释分析其功能。采用最大似然法和贝叶斯法分析一色草蟋蝉和其他昆虫中Wolbachia的系统发育关系，明确其系统地位。【结果】一色草蟋蝉雌成虫贮菌体中含有专性共生菌Karelsulcia和Hodgkinia,而属于F超群的兼性共生菌Wolbachia不仅存在于雄成虫精巢小管上皮细胞的细胞质和细胞核中，还存在于精子和雌成虫脂肪体的细胞核中。基因组注释分析表明，Karelsulcia和Hodgkinia的基因参与宿主必需氨基酸和维生素的合成，而Wolbachia的基因则参与核黄素代谢、血红素通路以及嘌呤和嘧啶的生物合成。Wolbachia在精子细胞核内增殖并可导致细胞核破裂。系统发育关系表明Wolbachia属于F超群，与节肢动物和线虫的Wolbachia亲缘关系最近。【结论】本研究揭示了一色草蟋蝉成虫贮菌体中共生菌Karelsulcia和Hodgkinia的潜在营养功能，并发现Wolbachia对宿主昆虫可能既有益又有害的独特现象，研究结果有助于进一步解析蝉科(Cicadidae)昆虫与共生菌间的复杂共生关系和协同演化。

摘要: 【目的】山槐Albizia kalkora是美国白蛾Hyphantria cunea幼虫的低适合度寄主植物。本研究旨在探究美国白蛾幼虫取食对山槐诱导防御的影响以及山槐诱导防御对第2批美国白蛾幼虫适合度的影响。【方法】美国白蛾4龄幼虫分别以低密度(low-density, LD)(30头/株)和高密度(high-density, HD)(50头/株)取食山槐后第7和21天时，测定山槐受损叶片和健康叶片中营养物质(氨基酸、可溶性糖和总蛋白质)及次生物质(单宁、总酚、总黄酮、木质素和总生物碱)的含量；利用RT-qPCR检测山槐受损叶片和健康叶片中类黄酮生物合成通路关键基因(PGT1,CHS7和ANR)及α-亚麻酸代谢通路关键基因(AOC2,OPCL1和LOX2S)的表达量；第2批美国白蛾3龄幼虫取食已受损山槐叶片第3和7天时测定幼虫死亡率、体重、体长和头壳宽，利用RT-qPCR测定其生长发育相关基因(GADD45和MYC)、能量代谢相关基因(HK1和OGDH)、消化酶基因(TRY7,AMY2和LIP10)和解毒酶基因(GST18,CARE14和CYPAE178)的表达量。【结果】美国白蛾4龄幼虫取食山槐叶片后，各处理组在不同时间点山槐叶片中可溶性糖和总蛋白质含量与未取食的对照(CK)组比均显著下降。美国白蛾4龄幼虫取食山槐叶片后第7天时，LD和HD取食胁迫组山槐受损叶片中的总酚、总黄酮和木质素含量与CK组比显著升高，LD取食胁迫组受损山槐叶片中单宁含量与CK组比显著升高，HD取食胁迫组健康山槐叶片中总酚和总黄酮含量与CK组比显著升高。美国白蛾4龄幼虫取食山槐叶片后第21天时，LD和HD取食胁迫组受损山槐叶片中单宁和总黄酮含量与CK组比显著升高，LD取食胁迫组健康山槐叶片中总生物碱含量与CK组比显著升高，且HD取食胁迫组健康山槐叶片中单宁、总酚和总生物碱含量与CK组比显著升高。美国白蛾4龄幼虫取食后第7天时山槐受损叶片和健康叶片中ANR和CHS7的表达量与CK组比均显著上调，取食后第21天时山槐受损叶片和健康叶片中PGT1和CHS7的表达量与CK组比均显著上调，取食后第7和21天时山槐受损叶片和健康叶片中OPCL1和LOX2S的表达量与CK组比均显著上调，取食后第21天时山槐受损叶片和健康叶片中AOC2的表达量与CK组比显著上调。取食经LD和HD幼虫取食而激活诱导防御山槐的叶片后第3和7天，第2批美国白蛾幼虫的体重、体长和头壳宽与CK组比均显著降低，且伴随着幼虫死亡率在一定程度上的上升。取食后第3和7天LD取食胁迫组第2批美国白蛾幼虫中GADD45的表达量与CK组比显著上调，取食后第7天时LD和HD取食胁迫组第2批美国白蛾幼虫中MYC的表达量与CK组比均显著上调。取食后第3和7天LD和HD取食胁迫组第2批美国白蛾幼虫中TRY7,AMY2,LIP10,HK1,OGDH,GST18,CARE14和CYPAE178的表达量与CK组比均显著下调。【结论】美国白蛾幼虫取食激活了山槐的诱导防御，而第2批美国白蛾幼虫无法对山槐的诱导防御形成有效的反防御策略，这可能是山槐属于美国白蛾幼虫低适合度寄主植物的重要原因。

摘要: 【目的】本研究旨在探究海拔和季节变化对重庆四面山中华蜜蜂Apis cerana cerana粉源植物组成及多样性的影响。【方法】野外采集重庆四面山不同海拔梯度(500, 700, 900, 1 100和1 300 m)及不同月份(3, 5, 7, 9和11月)中华蜜蜂蜂箱中新鲜巢脾的蜂粮，提取蜂粮粉源植物DNA进行ITS2区PCR扩增，利用Illumina PE250二代高通量测序技术进行测序，利用生物信息学方法分析中华蜜蜂的粉源植物组成、丰度和多样性。【结果】共注释到重庆四面山中华蜜蜂粉源植物30目61科128属162种，其中木本植物101种(占比62.35%)、草本植物51种(占比31.48%)和藤本植物10种(占比6.17%)。在目水平，蔷薇目(Rosales)植物种类最多(21种),其次是壳斗目(Fagales)和菊目(Asterales),分别有19和15种。基于可操作分类单元(operational taxonomic units, OTUs)的中华蜜蜂粉源植物组成分析发现：总占比超过1%的粉源植物有17种，排名前5的依次是茅栗Castanea seguinii、细齿叶柃Eurya nitida、盐麸木Rhus chinensis、甘蓝Brassica oleracea和黄毛楤木Aralia chinensis,占比分别是18.9%, 11.3%, 8.5%, 6.3%和5.3%。中华蜜蜂粉源植物alpha多样性分析结果显示：重庆四面山中华蜜蜂粉源植物多样性随海拔增加呈现先增加后减少的趋势；5月份中华蜜蜂粉源植物多样性最低，而其他月份间粉源植物多样性无显著差异。【结论】重庆四面山中华蜜蜂粉源植物资源丰富，粉源植物多样性随月份变化不明显，而随海拔呈现先增加后减少的趋势。本研究揭示了重庆四面山中华蜜蜂粉源植物组成及多样性的时空变化特征，为进一步研究和保护该地区中华蜜蜂种群提供了新视角，也为当地养蜂人选择合适的蜂场位置、保证花粉资源稳定供应、提高蜜蜂成活率和增加蜂产品产量提供了新思路。

摘要: 【目的】本研究旨在探究蜜蜂慢性麻痹病毒(chronic bee paralysis virus, CBPV)侵染对中华蜜蜂Apis cerana cerana免疫和肠道菌群的影响。【方法】采用注射CBPV RNA的方式使中华蜜蜂新出房成年工蜂感染CBPV,统计存活率；qRT-PCR检测CBPV侵染后中华蜜蜂工蜂体内CBPV基因组拷贝数和15个免疫相关基因(PGRP-S2,Cactus1,Toll,PGRPLC-like,Relish,Defensin1,Hymenoptaecin,SP14,PPO,Dicer,HSP70,HSP90,Stat,Stam和PISA3)的表达量；利用宏基因组测序检测中华蜜蜂工蜂感染CBPV后的肠道菌群结构的变化，并对肠道菌群进行alpha多样性分析和beta多样性分析。【结果】相对于注射1×PBS的对照组，感染CBPV的中华蜜蜂成年工蜂存活率逐渐降低，在感染第7天时的累计存活率降低到了27%;感染第1-4天CBPV基因组拷贝数急剧稳步增加，第4天时CBPV基因组拷贝数增加了10～6倍。同时，CBPV显著激活中华蜜蜂Toll免疫通路基因，尤其抗菌肽基因Defensin1和Hymenoptaecin的表达量在CBPV侵染的第1-5天均显著上调，在侵染第5天，上调倍数超过10倍。宏基因组测序结果显示CBPV侵染影响中华蜜蜂工蜂肠道菌群结构，显著改变肠道菌群多样性，尤其蜜蜂乳杆菌Lactobacillus apis和Snodgrassella alvi的相对丰度在CBPV侵染后较对照显著下调。【结论】CBPV侵染能引起中华蜜蜂工蜂死亡，激活抗菌肽基因的表达，显著减少其肠道中有益菌的相对丰度，研究结果为也为建立蜜蜂新的健康管理策略和防控措施提供重要的理论基础。

摘要: 【目的】鹿眼蛱蝶浓核病毒(Junonia coenia densovirus, JcDV)通过漏扫描方式编码4个病毒结构蛋白(viral structural protein, VP) VP1, VP2, VP3和VP4。本研究旨在探究JcDV的4个结构蛋白基因(vp1-4)在草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫体内的表达特征，为深入研究病毒结构蛋白VP1-4的功能及其组装机制提供依据。【方法】采用免疫荧光检测在转染pJcDV质粒的Hi5细胞内VP1-4的亚细胞定位；利用RT-PCR检测JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后0, 3, 6, 12, 24, 48, 72, 96和120 h时vp1-4的表达量；采用Western blot检测JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后0, 24, 48, 72, 96和120 h时VP1-4的表达量；用免疫组织化学技术检测JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后0, 24和96 h时VP1-4的组织表达特性。【结果】VP1-4主要位于Hi5细胞质中，少量以多聚体形式分布于细胞核内；JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后3 h时可检测到vp1-4的转录并至少持续至120 h; JcDV侵染后24-120 h时可检测到VP1-4的表达；JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后96 h时在虫体的表皮和气管中可检测到VP1-4的表达，而肌肉和脂肪体中没有明显表达信号。【结论】JcDV在侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后3和24 h时可分别检测到病毒结构蛋白基因vp1-4的转录和翻译，表明VP1-4可能在侵染早期已开始发挥重要功能；JcDV可侵染草地贪夜蛾幼虫的表皮和气管，可能是导致其死亡的原因之一。

摘要: 【目的】解析东方蜜蜂Apis cerana DNA甲基转移酶3（DNA methyltransferase 3, DNMT3） AcDNMT3的分子特征、系统进化及基因表达谱，为深入开展AcDNMT3的功能研究提供参考和基础。【方法】利用相关生物信息学软件预测和分析东方蜜蜂AcDNMT3的理化性质、分子特征、结构域、保守基序和系统进化。采用RT-qPCR检测AcDNMT3在东方蜜蜂工蜂不同发育阶段（卵、3日龄幼虫、1日龄预蛹、2日龄预蛹、4日龄蛹以及1, 2, 6, 12, 15和18日龄成虫）和工蜂成虫组织（触角、咽下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒腺）及蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis接种东方蜜蜂3日龄工蜂幼虫后4-6日龄幼虫肠道和东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae接种东方蜜蜂1日龄工蜂成虫后2-5日龄成虫中肠中的相对表达量。【结果】AcDNMT3含758个氨基酸，分子量约为88.24 kD,分子式为C₃₉₄₅H₆₁₈₂N₁₀₇₆O₁₁₃₄S₄₄,理论等电点为8.32,平均亲水指数为-0.454。AcDNMT3与腺苷同型半胱氨酸酶（A0A2A3ECJ8）等10个蛋白具有潜在的互作关系。东方蜜蜂、西方蜜蜂Ap.mellifera、大蜜蜂Ap.dorsata、黑大蜜蜂Ap.laboriosa、欧洲熊蜂Bombus terrestris、巴西无刺蜂Frieseomelitta varia、果树壁蜂Osmia lignaria、大分舌蜂Colletes gigas、行军蚁Eciton burchellii、黄褐尼氏蚁Nylanderia fulva、阿根廷蚁Linepithema humile、红火蚁Solenopsis invicta、小黄家蚁Monomorium pharaonis和埃氏扁胸切叶蚁Vollenhovia emeryi的DNMT3含有4个相同的结构域（PWWP＿DNMT3, ADDz＿Dnmt3, Dcm domain和PWWP domain）及5个相同的保守基序（Motif1, Motif2, Motif3, Motif4和Motif5）。AcDNMT3与西方蜜蜂的DNMT3在进化树上聚为一支。AcDNMT3在东方蜜蜂工蜂卵、幼虫、预蛹和蛹中差异表达，在2日龄预蛹中的表达量最高且显著高于卵、3日龄幼虫、1日龄预蛹和4日龄蛹中的表达量。AcDNMT3在东方蜜蜂1, 2, 6, 12, 15和18日龄工蜂成虫体内差异表达，在1日龄成虫体内的表达量最高且显著高于2, 6, 12, 15和18日龄成虫体内的表达量。AcDNMT3在东方蜜蜂工蜂成虫触角、毒腺、脑、中肠、脂肪体、表皮和咽下腺中差异表达，在触角中的表达量最高，而在中肠中的表达量最低。蜜蜂球囊菌接种东方蜜蜂3日龄工蜂幼虫后4日龄工蜂幼虫肠道中AcDNMT3的表达量比对照显著下调。东方蜜蜂微孢子虫接种东方蜜蜂1日龄工蜂成虫后2, 4和5日龄工蜂成虫中肠中AcDNMT3的表达量比对照显著上调，而3日龄工蜂成虫中肠中AcDNMT3的表达量比对照极显著下调。【结论】AcDNMT3可能是亲水性蛋白、胞内蛋白和非跨膜蛋白；DNMT3在东方蜜蜂和上述其他昆虫中高度保守；东方蜜蜂与西方蜜蜂的DNMT3同源性最高；AcDNMT3潜在参与东方蜜蜂工蜂发育、幼虫应答蜜蜂球囊菌侵染和成虫应答东方蜜蜂微孢子虫侵染。

摘要: 【目的】本研究旨在丰富中华蜜蜂Apis cerana cerana 14-3-3ζ基因的基本信息，为其进一步的功能研究提供参考和依据。【方法】通过PCR扩增14-3-3ζ基因的编码序列(coding sequence, CDS),再进行TA克隆和Sanger测序；使用相关软件预测14-3-3ζ的理化性质和分子特征，并对14-3-3ζ进行系统进化分析；利用RT-qPCR检测14-3-3ζ基因在中华蜜蜂不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫)、刚出房工蜂成虫不同组织(触角、中肠、脂肪体、咽下腺、脑、表皮和毒腺)及蜜蜂球囊菌Ascospaera apis接种中华蜜蜂工蜂3日龄幼虫后4, 5和6日龄幼虫肠道中的表达量。【结果】成功克隆到中华蜜蜂14-3-3ζ基因的CDS,含744个核苷酸，编码247个氨基酸，中华蜜蜂14-3-3ζ的分子量约为28.0 kD,含26个磷酸化位点、 4个结构域和1个保守基序，不含跨膜结构域与信号肽；中华蜜蜂、西方蜜蜂Ap.mellifera、黑大蜜蜂Ap.laboriosa、小蜜蜂Ap.florea、芦蜂Ceratina calcarata、火红熊蜂Bombus pyrosoma、地熊蜂B.terrestris、苜蓿切叶蜂Megachile rotundata、壁蜂Osmia lignaria和东南蓝莓蜂Habropoda laboriosa 14-3-3ζ均包含4个相同的保守基序和1个相同的结构域(14-3-3＿1),中华蜜蜂和西方蜜蜂的14-3-3ζ在系统进化树上聚为一支。14-3-3ζ基因在中华蜜蜂卵中的表达量显著高于3日龄幼虫、1和2日龄预蛹及4日龄蛹中的表达量，在中华蜜蜂各日龄工蜂成虫体内的表达量无显著差异；14-3-3ζ基因的表达量在中华蜜蜂刚出房工蜂成虫毒腺中最高，且显著高于触角、中肠、咽下腺、脑、表皮和脂肪体中的表达量；蜜蜂球囊菌接种中华蜜蜂工蜂3日龄幼虫后，14-3-3ζ基因在中华蜜蜂工蜂4, 5和6日龄幼虫肠道中的表达量与对照组比显著下调。【结论】中华蜜蜂14-3-3ζ基因在工蜂的毒腺和卵中特异性高量表达，幼虫肠道中14-3-3ζ基因的表达在蜜蜂球囊菌侵染过程中被激活，14-3-3ζ是一种潜在的亲水性、非跨膜和胞内蛋白，中华蜜蜂与上述其他10种蜂的14-3-3ζ较为保守，中华蜜蜂和西方蜜蜂的14-3-3ζ之间亲缘关系最近。