摘要: 【目的】山槐Albizia kalkora是美国白蛾Hyphantria cunea幼虫的低适合度寄主植物。本研究旨在探究美国白蛾幼虫取食对山槐诱导防御的影响以及山槐诱导防御对第2批美国白蛾幼虫适合度的影响。【方法】美国白蛾4龄幼虫分别以低密度(low-density, LD)(30头/株)和高密度(high-density, HD)(50头/株)取食山槐后第7和21天时，测定山槐受损叶片和健康叶片中营养物质(氨基酸、可溶性糖和总蛋白质)及次生物质(单宁、总酚、总黄酮、木质素和总生物碱)的含量；利用RT-qPCR检测山槐受损叶片和健康叶片中类黄酮生物合成通路关键基因(PGT1,CHS7和ANR)及α-亚麻酸代谢通路关键基因(AOC2,OPCL1和LOX2S)的表达量；第2批美国白蛾3龄幼虫取食已受损山槐叶片第3和7天时测定幼虫死亡率、体重、体长和头壳宽，利用RT-qPCR测定其生长发育相关基因(GADD45和MYC)、能量代谢相关基因(HK1和OGDH)、消化酶基因(TRY7,AMY2和LIP10)和解毒酶基因(GST18,CARE14和CYPAE178)的表达量。【结果】美国白蛾4龄幼虫取食山槐叶片后，各处理组在不同时间点山槐叶片中可溶性糖和总蛋白质含量与未取食的对照(CK)组比均显著下降。美国白蛾4龄幼虫取食山槐叶片后第7天时，LD和HD取食胁迫组山槐受损叶片中的总酚、总黄酮和木质素含量与CK组比显著升高，LD取食胁迫组受损山槐叶片中单宁含量与CK组比显著升高，HD取食胁迫组健康山槐叶片中总酚和总黄酮含量与CK组比显著升高。美国白蛾4龄幼虫取食山槐叶片后第21天时，LD和HD取食胁迫组受损山槐叶片中单宁和总黄酮含量与CK组比显著升高，LD取食胁迫组健康山槐叶片中总生物碱含量与CK组比显著升高，且HD取食胁迫组健康山槐叶片中单宁、总酚和总生物碱含量与CK组比显著升高。美国白蛾4龄幼虫取食后第7天时山槐受损叶片和健康叶片中ANR和CHS7的表达量与CK组比均显著上调，取食后第21天时山槐受损叶片和健康叶片中PGT1和CHS7的表达量与CK组比均显著上调，取食后第7和21天时山槐受损叶片和健康叶片中OPCL1和LOX2S的表达量与CK组比均显著上调，取食后第21天时山槐受损叶片和健康叶片中AOC2的表达量与CK组比显著上调。取食经LD和HD幼虫取食而激活诱导防御山槐的叶片后第3和7天，第2批美国白蛾幼虫的体重、体长和头壳宽与CK组比均显著降低，且伴随着幼虫死亡率在一定程度上的上升。取食后第3和7天LD取食胁迫组第2批美国白蛾幼虫中GADD45的表达量与CK组比显著上调，取食后第7天时LD和HD取食胁迫组第2批美国白蛾幼虫中MYC的表达量与CK组比均显著上调。取食后第3和7天LD和HD取食胁迫组第2批美国白蛾幼虫中TRY7,AMY2,LIP10,HK1,OGDH,GST18,CARE14和CYPAE178的表达量与CK组比均显著下调。【结论】美国白蛾幼虫取食激活了山槐的诱导防御，而第2批美国白蛾幼虫无法对山槐的诱导防御形成有效的反防御策略，这可能是山槐属于美国白蛾幼虫低适合度寄主植物的重要原因。

摘要: 【目的】本研究旨在探究海拔和季节变化对重庆四面山中华蜜蜂Apis cerana cerana粉源植物组成及多样性的影响。【方法】野外采集重庆四面山不同海拔梯度(500, 700, 900, 1 100和1 300 m)及不同月份(3, 5, 7, 9和11月)中华蜜蜂蜂箱中新鲜巢脾的蜂粮，提取蜂粮粉源植物DNA进行ITS2区PCR扩增，利用Illumina PE250二代高通量测序技术进行测序，利用生物信息学方法分析中华蜜蜂的粉源植物组成、丰度和多样性。【结果】共注释到重庆四面山中华蜜蜂粉源植物30目61科128属162种，其中木本植物101种(占比62.35%)、草本植物51种(占比31.48%)和藤本植物10种(占比6.17%)。在目水平，蔷薇目(Rosales)植物种类最多(21种),其次是壳斗目(Fagales)和菊目(Asterales),分别有19和15种。基于可操作分类单元(operational taxonomic units, OTUs)的中华蜜蜂粉源植物组成分析发现：总占比超过1%的粉源植物有17种，排名前5的依次是茅栗Castanea seguinii、细齿叶柃Eurya nitida、盐麸木Rhus chinensis、甘蓝Brassica oleracea和黄毛楤木Aralia chinensis,占比分别是18.9%, 11.3%, 8.5%, 6.3%和5.3%。中华蜜蜂粉源植物alpha多样性分析结果显示：重庆四面山中华蜜蜂粉源植物多样性随海拔增加呈现先增加后减少的趋势；5月份中华蜜蜂粉源植物多样性最低，而其他月份间粉源植物多样性无显著差异。【结论】重庆四面山中华蜜蜂粉源植物资源丰富，粉源植物多样性随月份变化不明显，而随海拔呈现先增加后减少的趋势。本研究揭示了重庆四面山中华蜜蜂粉源植物组成及多样性的时空变化特征，为进一步研究和保护该地区中华蜜蜂种群提供了新视角，也为当地养蜂人选择合适的蜂场位置、保证花粉资源稳定供应、提高蜜蜂成活率和增加蜂产品产量提供了新思路。

摘要: 【目的】本研究旨在探究蜜蜂慢性麻痹病毒(chronic bee paralysis virus, CBPV)侵染对中华蜜蜂Apis cerana cerana免疫和肠道菌群的影响。【方法】采用注射CBPV RNA的方式使中华蜜蜂新出房成年工蜂感染CBPV,统计存活率；qRT-PCR检测CBPV侵染后中华蜜蜂工蜂体内CBPV基因组拷贝数和15个免疫相关基因(PGRP-S2,Cactus1,Toll,PGRPLC-like,Relish,Defensin1,Hymenoptaecin,SP14,PPO,Dicer,HSP70,HSP90,Stat,Stam和PISA3)的表达量；利用宏基因组测序检测中华蜜蜂工蜂感染CBPV后的肠道菌群结构的变化，并对肠道菌群进行alpha多样性分析和beta多样性分析。【结果】相对于注射1×PBS的对照组，感染CBPV的中华蜜蜂成年工蜂存活率逐渐降低，在感染第7天时的累计存活率降低到了27%;感染第1-4天CBPV基因组拷贝数急剧稳步增加，第4天时CBPV基因组拷贝数增加了10～6倍。同时，CBPV显著激活中华蜜蜂Toll免疫通路基因，尤其抗菌肽基因Defensin1和Hymenoptaecin的表达量在CBPV侵染的第1-5天均显著上调，在侵染第5天，上调倍数超过10倍。宏基因组测序结果显示CBPV侵染影响中华蜜蜂工蜂肠道菌群结构，显著改变肠道菌群多样性，尤其蜜蜂乳杆菌Lactobacillus apis和Snodgrassella alvi的相对丰度在CBPV侵染后较对照显著下调。【结论】CBPV侵染能引起中华蜜蜂工蜂死亡，激活抗菌肽基因的表达，显著减少其肠道中有益菌的相对丰度，研究结果为也为建立蜜蜂新的健康管理策略和防控措施提供重要的理论基础。

摘要: 【目的】鹿眼蛱蝶浓核病毒(Junonia coenia densovirus, JcDV)通过漏扫描方式编码4个病毒结构蛋白(viral structural protein, VP) VP1, VP2, VP3和VP4。本研究旨在探究JcDV的4个结构蛋白基因(vp1-4)在草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫体内的表达特征，为深入研究病毒结构蛋白VP1-4的功能及其组装机制提供依据。【方法】采用免疫荧光检测在转染pJcDV质粒的Hi5细胞内VP1-4的亚细胞定位；利用RT-PCR检测JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后0, 3, 6, 12, 24, 48, 72, 96和120 h时vp1-4的表达量；采用Western blot检测JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后0, 24, 48, 72, 96和120 h时VP1-4的表达量；用免疫组织化学技术检测JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后0, 24和96 h时VP1-4的组织表达特性。【结果】VP1-4主要位于Hi5细胞质中，少量以多聚体形式分布于细胞核内；JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后3 h时可检测到vp1-4的转录并至少持续至120 h; JcDV侵染后24-120 h时可检测到VP1-4的表达；JcDV侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后96 h时在虫体的表皮和气管中可检测到VP1-4的表达，而肌肉和脂肪体中没有明显表达信号。【结论】JcDV在侵染草地贪夜蛾2龄幼虫后3和24 h时可分别检测到病毒结构蛋白基因vp1-4的转录和翻译，表明VP1-4可能在侵染早期已开始发挥重要功能；JcDV可侵染草地贪夜蛾幼虫的表皮和气管，可能是导致其死亡的原因之一。

摘要: 【目的】解析东方蜜蜂Apis cerana DNA甲基转移酶3（DNA methyltransferase 3, DNMT3） AcDNMT3的分子特征、系统进化及基因表达谱，为深入开展AcDNMT3的功能研究提供参考和基础。【方法】利用相关生物信息学软件预测和分析东方蜜蜂AcDNMT3的理化性质、分子特征、结构域、保守基序和系统进化。采用RT-qPCR检测AcDNMT3在东方蜜蜂工蜂不同发育阶段（卵、3日龄幼虫、1日龄预蛹、2日龄预蛹、4日龄蛹以及1, 2, 6, 12, 15和18日龄成虫）和工蜂成虫组织（触角、咽下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒腺）及蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis接种东方蜜蜂3日龄工蜂幼虫后4-6日龄幼虫肠道和东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae接种东方蜜蜂1日龄工蜂成虫后2-5日龄成虫中肠中的相对表达量。【结果】AcDNMT3含758个氨基酸，分子量约为88.24 kD,分子式为C₃₉₄₅H₆₁₈₂N₁₀₇₆O₁₁₃₄S₄₄,理论等电点为8.32,平均亲水指数为-0.454。AcDNMT3与腺苷同型半胱氨酸酶（A0A2A3ECJ8）等10个蛋白具有潜在的互作关系。东方蜜蜂、西方蜜蜂Ap.mellifera、大蜜蜂Ap.dorsata、黑大蜜蜂Ap.laboriosa、欧洲熊蜂Bombus terrestris、巴西无刺蜂Frieseomelitta varia、果树壁蜂Osmia lignaria、大分舌蜂Colletes gigas、行军蚁Eciton burchellii、黄褐尼氏蚁Nylanderia fulva、阿根廷蚁Linepithema humile、红火蚁Solenopsis invicta、小黄家蚁Monomorium pharaonis和埃氏扁胸切叶蚁Vollenhovia emeryi的DNMT3含有4个相同的结构域（PWWP＿DNMT3, ADDz＿Dnmt3, Dcm domain和PWWP domain）及5个相同的保守基序（Motif1, Motif2, Motif3, Motif4和Motif5）。AcDNMT3与西方蜜蜂的DNMT3在进化树上聚为一支。AcDNMT3在东方蜜蜂工蜂卵、幼虫、预蛹和蛹中差异表达，在2日龄预蛹中的表达量最高且显著高于卵、3日龄幼虫、1日龄预蛹和4日龄蛹中的表达量。AcDNMT3在东方蜜蜂1, 2, 6, 12, 15和18日龄工蜂成虫体内差异表达，在1日龄成虫体内的表达量最高且显著高于2, 6, 12, 15和18日龄成虫体内的表达量。AcDNMT3在东方蜜蜂工蜂成虫触角、毒腺、脑、中肠、脂肪体、表皮和咽下腺中差异表达，在触角中的表达量最高，而在中肠中的表达量最低。蜜蜂球囊菌接种东方蜜蜂3日龄工蜂幼虫后4日龄工蜂幼虫肠道中AcDNMT3的表达量比对照显著下调。东方蜜蜂微孢子虫接种东方蜜蜂1日龄工蜂成虫后2, 4和5日龄工蜂成虫中肠中AcDNMT3的表达量比对照显著上调，而3日龄工蜂成虫中肠中AcDNMT3的表达量比对照极显著下调。【结论】AcDNMT3可能是亲水性蛋白、胞内蛋白和非跨膜蛋白；DNMT3在东方蜜蜂和上述其他昆虫中高度保守；东方蜜蜂与西方蜜蜂的DNMT3同源性最高；AcDNMT3潜在参与东方蜜蜂工蜂发育、幼虫应答蜜蜂球囊菌侵染和成虫应答东方蜜蜂微孢子虫侵染。

摘要: 【目的】本研究旨在丰富中华蜜蜂Apis cerana cerana 14-3-3ζ基因的基本信息，为其进一步的功能研究提供参考和依据。【方法】通过PCR扩增14-3-3ζ基因的编码序列(coding sequence, CDS),再进行TA克隆和Sanger测序；使用相关软件预测14-3-3ζ的理化性质和分子特征，并对14-3-3ζ进行系统进化分析；利用RT-qPCR检测14-3-3ζ基因在中华蜜蜂不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫)、刚出房工蜂成虫不同组织(触角、中肠、脂肪体、咽下腺、脑、表皮和毒腺)及蜜蜂球囊菌Ascospaera apis接种中华蜜蜂工蜂3日龄幼虫后4, 5和6日龄幼虫肠道中的表达量。【结果】成功克隆到中华蜜蜂14-3-3ζ基因的CDS,含744个核苷酸，编码247个氨基酸，中华蜜蜂14-3-3ζ的分子量约为28.0 kD,含26个磷酸化位点、 4个结构域和1个保守基序，不含跨膜结构域与信号肽；中华蜜蜂、西方蜜蜂Ap.mellifera、黑大蜜蜂Ap.laboriosa、小蜜蜂Ap.florea、芦蜂Ceratina calcarata、火红熊蜂Bombus pyrosoma、地熊蜂B.terrestris、苜蓿切叶蜂Megachile rotundata、壁蜂Osmia lignaria和东南蓝莓蜂Habropoda laboriosa 14-3-3ζ均包含4个相同的保守基序和1个相同的结构域(14-3-3＿1),中华蜜蜂和西方蜜蜂的14-3-3ζ在系统进化树上聚为一支。14-3-3ζ基因在中华蜜蜂卵中的表达量显著高于3日龄幼虫、1和2日龄预蛹及4日龄蛹中的表达量，在中华蜜蜂各日龄工蜂成虫体内的表达量无显著差异；14-3-3ζ基因的表达量在中华蜜蜂刚出房工蜂成虫毒腺中最高，且显著高于触角、中肠、咽下腺、脑、表皮和脂肪体中的表达量；蜜蜂球囊菌接种中华蜜蜂工蜂3日龄幼虫后，14-3-3ζ基因在中华蜜蜂工蜂4, 5和6日龄幼虫肠道中的表达量与对照组比显著下调。【结论】中华蜜蜂14-3-3ζ基因在工蜂的毒腺和卵中特异性高量表达，幼虫肠道中14-3-3ζ基因的表达在蜜蜂球囊菌侵染过程中被激活，14-3-3ζ是一种潜在的亲水性、非跨膜和胞内蛋白，中华蜜蜂与上述其他10种蜂的14-3-3ζ较为保守，中华蜜蜂和西方蜜蜂的14-3-3ζ之间亲缘关系最近。

摘要: 【目的】中华蜜蜂Apis cerana cerana形态受地理及生态差异影响。本研究旨在探究贵州省不同地区中华蜜蜂的形态差异，以期为其形态在不同地区之间的分化提供参考。【方法】选取贵州省内33个地区云贵高原型中华蜜蜂工蜂样本共7 524头，解剖后测量喙、足、背板、腹板和前翅相关形态参数值，再采用随机森林(random forest, RF)、神经网络(neural network, NN)和支持向量机(support vector machine, SVM)方法经参数调优后确定最佳形态分析模型和筛选变量重要性；根据变量重要性进行K-means无监督聚类分析；将重要变量与气温、降水量和植被值进行Pearson相关性分析。【结果】机器学习结果显示，当mtry为5,随机树为550时参数调优结果最佳；3个模型中SVM在精确率(precision)、召回率(recall)及F1分值上优于RF和NN;第3腹板蜡镜间距、第3腹板蜡镜长、第3腹板蜡镜宽和肘脉2、前翅长重要性值较高。聚类分析结果显示，织金、贞丰、赤水等共12个地区的中华蜜蜂工蜂样本聚为一类；纳雍、赫章和册亨等共8个地区的中华蜜蜂工蜂样本聚为另一类；息烽、平塘和罗甸等共13个地区的中华蜜蜂工蜂样本被聚在2类内。相关性分析结果显示，第3腹板蜡镜长与第3腹板蜡镜宽和前翅宽呈极显著正相关；第3腹板蜡镜宽与前翅宽呈极显著正相关；第3腹板蜡镜间距与3年春冬温差累积值呈显著负相关；翅脉2与3年春冬温差累积值呈显著负相关。【结论】基于机器学习的结果表明中华蜜蜂在贵州省内不同地区出现形态上的分化。SVM方法可为蜜蜂的分类提供新的思路，有助于理解中华蜜蜂形态在贵州省内的演化趋势，对推动保护地方中华蜜蜂种质资源具有指导意义。

摘要: 【目的】拟步甲科昆虫是一类适应性强、食性复杂和繁殖能力强的土栖类昆虫。本研究分析了不同地形条件下拟步甲科昆虫的多样性分布格局，以揭示地形因子对北祁连山拟步甲科昆虫分布的影响。【方法】2022年7-8月在北祁连山地区1 000-2 000, 2 000-3 000, 3 000-4 000及4 000 m以上4个海拔区间选取65个采集样地，采用主动捕捉法对拟步甲科昆虫物种组成和分布进行调查；利用典范对应分析(canonical correspondence analysis, CCA)及曲线回归拟合分析北祁连山拟步甲科昆虫多样性分布与地形的关系。【结果】经鉴定、统计得到拟步甲科昆虫成虫34属124种5 682头，其中，波氏东鳖甲Anatolica potanini与粗背伪坚土甲Scleropatrum horridum horridum为优势种，其个体数分别占总捕获个体数的14.4%和24.8%。在海拔2 000-3 000 m区间，拟步甲科昆虫Shannon-Wiener多样性指数及Simpson优势度指数最高；在海拔1 000-2 000 m区间，拟步甲科昆虫Margalef丰富度最高；在海拔3 000-4 000 m区间，拟步甲科昆虫Pielou均匀度最高；而海拔4 000 m以上，仅发现少量喜阴湿的琵甲族与刺甲族物种。CCA结果显示，海拔和坡度对拟步甲科昆虫的分布格局有显著影响，海拔解释力度最高。拟步甲科昆虫Margalef丰富度指数和Shannon-Wiener多样性指数均与海拔呈显著的线性关系。拟步甲昆虫的Margalef丰富度指数与坡度呈显著负相关；优势种波氏东鳖甲个体数与5个地形因子均不显著相关，波氏东鳖甲分布于CCA排序轴原点附近，因此在北祁连山的分布比较广泛；优势种粗背伪坚土甲个体数仅与海拔呈显著负相关。拟步甲科昆虫平面曲率与个体数呈显著的正态曲线分布关系。【结论】北祁连山拟步甲科昆虫的分布格局受海拔为主的多种地形因子综合作用的影响。

摘要: 【目的】测定药用植物白花丹中重要植物次生物质白花丹素对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda 2龄幼虫的毒力，并明确亚致死浓度(LC₂₅浓度)白花丹素对草地贪夜蛾亲代（F₀）和子一代（F₁）生长发育及解毒酶活性的影响。【方法】白花丹素通过饲料混毒法处理草地贪夜蛾2龄幼虫（蜕皮后的第2天）测定其对草地贪夜蛾的毒力，同时以LC₂₅浓度（0.343 mg/g）白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫，统计记录F₀代与F₁代幼虫历期、化蛹率、蛹历期、雌雄成虫寿命和成虫单雌产卵量，构建年龄-龄期两性生命表。LC₂₅浓度白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫24 h后，测定羧酸酯酶（carboxylesterase, CarE）、谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase, GST）和细胞色素P450单加氧酶（cytochrome P450 monooxygenase, CYP450） 3种解毒酶的活性。【结果】白花丹素对草地贪夜蛾2龄幼虫7 d内的致死中浓度(median lethal concentration, LC₅₀)和LC₂₅值分别为0.607和0.343 mg/g。与溶剂对照（0.1%丙酮）对比，LC₂₅浓度白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫后亲代（F₀）的化蛹率显著下降了25.13%,雌雄蛹历期分别显著缩短了1.29和1.08 d,成虫的单雌产卵量显著下降了47%,产卵期和成虫寿命分别显著降低了1.75和1.19 d;子代（F₁）的平均世代周期（mean generation time,T）显著缩短了0.91 d。LC₂₅浓度白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫24 h可显著诱导其体内CarE, GST和CYP450 3种解毒酶活性，分别为溶剂对照的1.28, 1.30和1.42倍。【结论】LC₂₅浓度白花丹素对亲代（F₀）草地贪夜蛾的生长发育和繁殖产生明显的不利影响，且处理草地贪夜蛾2龄幼虫24 h可显著提高3种解毒酶CarE, GST和CYP450酶活性，该结论有助于将植物次生物质白花丹素作为防治草地贪夜蛾的潜在生物防治手段。

摘要: 【目的】本研究旨在评估氟啶虫酰胺对异色瓢虫Harmonia axyridis 3龄幼虫捕食能力的影响。【方法】在室内采用指型管药膜法观测分析了0.146和0.292 mg/mL氟啶虫酰胺处理异色瓢虫3龄幼虫对其对棉蚜Aphis gossypii成虫的捕食能力(捕食量、瞬时攻击率、处理时间及搜寻效应)的影响。【结果】0.146和0.292 mg/mL氟啶虫酰胺处理异色瓢虫3龄幼虫后，其对棉蚜成虫的捕食功能反应符合Holling圆盘方程(Ⅱ型功能反应)。与丙酮处理的对照组相比，0.146和0.292 mg/mL氟啶虫酰胺处理对异色瓢虫3龄幼虫捕食功能反应参数和搜寻效应均产生了负面影响，且随着氟啶虫酰胺浓度的增加，对捕食和搜寻能力的影响也愈加显著。对照组及0.146和0.292 mg/mL氟啶虫酰胺处理组异色瓢虫3龄幼虫的瞬时攻击率分别为0.9260, 1.4451和2.1197;日最大捕食量分别为392.62, 52.63和32.15头；处理时间分别为0.0025, 0.0190和0.0311 h。【结论】氟啶虫酰胺处理异色瓢虫3龄幼虫对其对棉蚜成虫的捕食功能有负面影响。因此，为了更好地保护和利用天敌，在实施异色瓢虫防控棉蚜时，应考虑减少或不使用化学药剂。