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  • 赵茜茜; 王珅; 卢相琴; 杨婷
    实验动物科学 2024年第41卷第3期 DOI:
    关键词: 单酯型生物碱类;;慢性心力衰竭;;心肌细胞自噬;;PI3K/AKT通路
    摘要: 目的 分析单酯型生物碱类对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞的保护作用及对PI3K/AKT通路的影响。方法 将100只大鼠随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、低剂量组(C组)、中剂量组(D组)和高剂量组(E组),每组20只。C、D、E组在慢性心力衰竭模型建模成功后给予附子浓缩液灌胃,剂量分别为2.79、5.57、11.14 g/kg。灌胃6周后检测各组大鼠病理组织学变化、超声心动图指标、心肌细胞凋亡率,心肌组织促凋亡蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶8(Caspase-8)表达量,心肌细胞自噬蛋白、BNP、AI、PO<sub>2</sub>、IL-6、TNF-α水平及PI3K/AKT通路蛋白表达量。结果 B~E组超声心动图指标室间隔收缩末期厚度(IVSs)、室间隔舒张末期厚度(IVSd)、左心室后壁收缩末期厚度(LVPWs)、左心室后壁舒张末期厚度(LVPWd)。心肌细胞凋亡率,Bax、Caspase-8表达量,IL-6、TNF-α水平,心肌细胞自噬蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/Ⅰ,BNP及AI水平均高于A组,LVEF、Bcl-2表达量、PO<sub>2</sub>水平、心肌细胞自噬蛋白P62及p-PI3K、p-AKT表达量均低于A组(P<0.05);C~E组IVSs、IVSd、LVPWs、LVPWd、心肌细胞凋亡率及Bax、Caspase-8表达量,IL-6、TNF-α水平、自噬蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/Ⅰ、BNP及AI水平低于B组,LVEF、Bcl-2表达量、PO<sub>2</sub>水平、心肌细胞自噬蛋白P62及p-PI3K、p-AKT表达量高于B组(P<0.05);随着附子浓缩液剂量的增加,IVSs、IVSd、LVPWs、LVPWd、心肌细胞凋亡率、Bax、Caspase-8表达,IL-6、TNF-α水平、心肌细胞自噬蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/Ⅰ、BNP及AI水平降低,LVEF及Bcl-2表达、PO<sub>2</sub>水平、心肌细胞自噬蛋白P62及p-PI3K、p-AKT表达量升高(P<0.05)。结论 单酯型生物碱类通过上调p-PI3K、p-AKT蛋白表达量,激活PI3K/AKT通路,缓解心力衰竭恶性进展,且呈剂量依赖性。

  • 李琳钰; 姚新欣; 刘俊伶; 陶倩倩; 杨娟
    实验动物科学 2024年第41卷第3期 DOI:
    关键词: 肌酸激酶同工酶CK-MB;;急性心肌梗死;;基因工程抗体
    摘要: 目的 构建异源二聚体CK-MB重组蛋白并制备其特异性基因工程抗体,以此作为CK-MB定量检测试剂盒的诊断原料,从而辅助临床急性心肌梗死的早期诊断,提高诊断的准确性。方法 通过共表达载体获取异源二聚体CK-MB并进行动物免疫,从而获取小鼠浆细胞;进一步使用单细胞光导系统分离抗原特异性小鼠单个B细胞,并通过单细胞PCR获取抗体轻重链的可变区基因序列后构建基因工程抗体。基于初步的功能验证筛选出候选抗体,并进一步通过棋盘滴定法探究最佳的配对方案,并利用双抗夹心ELISA原理初步组装CK-MB定量检测试剂盒。结果 成功获取CK-MB免疫原;通过单B细胞光导技术筛选出CK-MB抗原特异性小鼠单个浆细胞并制备出2株小鼠源基因工程抗体,且均具有识别天然CK-MB的能力;经由双抗夹心ELISA法筛选出两种配对方案,其拟合曲线的R<sup>2</sup>均大于0.99。结论 成功制备出靶向CK-MB的小鼠源基因工程抗体,经由ELISA初步验证抗体的特异性和亲和力,为进一步开发高特异性、高灵敏度的CK-MB新型定量检测试剂盒奠定了坚实基础。

  • 曲子涵; 马海钊; 张野; 刘英豪; 郅晓宇; 李宝杰; 张红石
    实验动物科学 2024年第41卷第3期 DOI:
    关键词: PCPA;;失眠模型;;行为学评价
    摘要: 目的 通过观察对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠大鼠模型在造模成功后一周内,各类行为学实验中的学习记忆能力改变,验证PCPA失眠模型稳定性。方法 30只SD大鼠随机均分为空白组和模型组,空白组正常饲养,对模型组大鼠腹腔注射PCPA建立失眠模型,建模后第1周进行Morris水迷宫实验等5项大鼠行为学监测。结果 与空白组比较,模型组大鼠睡眠潜伏期显著延长(P<0.01),睡眠持续时间显著缩短(P<0.01);在水迷宫实验中,模型组大鼠寻台时间延长(P<0.01);巴恩斯迷宫实验中,模型组大鼠测试探索期的目标洞口停留总时间显著缩短(P<0.01);避暗实验中,模型组错误次数增多(P<0.05),且潜伏期显著延长(P<0.01);高架十字迷宫实验中,模型组大鼠开臂停留时间显著缩短(P<0.01);旷场实验显示模型组大鼠在中央区域的停留时间、直立次数和运动总距离均低于空白组,其中中央区域的停留时间具有显著差异(P<0.01)。结论 PCPA失眠模型具有较高的可重复性和稳定性,可以作为睡眠和记忆相关研究的基础模型。

  • 蒋辉; 李银银; 李长龙; 霍学云; 郭萌; 陈振文; 李胜利; 吕建祎; 杜小燕
    实验动物科学 2024年第41卷第2期 DOI:
    关键词: 比格犬;;微卫星DNA;;群体遗传结构;;遗传信息;;遗传检测
    摘要: 目的 采用比格犬微卫星位点对多地小型比格犬群体进行遗传检测和群体结构分析,并评价所选位点是否适用于封闭群比格犬遗传质量控制。方法 选取前期验证的微卫星位点20个,采用其已优化的PCR条件,对来自3个公司(西安、北京和江苏)的小型比格犬群体进行PCR扩增和STR扫描,经基因分型后计算群体遗传参数并进行群体遗传结构分析。结果 西安、北京和江苏三地小型比格犬群体在20个微卫星位点的平均有效等位基因数分别为5.45、6.80、6.10,平均杂合度为0.585 2、0.653 8、0.663 1,香农指数为1.177 4、1.384 4、1.349 8,多态性信息含量分别为0.539 7、0.614 7、0.618 1,说明三群体遗传多态性信息丰富,群体遗传多样性高。所选20个微卫星位点既能反映群体多态性,又能体现各群体的特征。结论 3个比格犬群体的多态性较高,达到了封闭群要求。所选20个微卫星位点比较适合用于比格犬遗传质量检测。

  • 刘媛媛; 程旭; 陈芸; 万娟; 胡曼丽; 张鑫
    实验动物科学 2024年第41卷第2期 DOI:
    关键词: 胰腺炎;;胰腺处方粮;;白藜芦醇;;血浆代谢组学;;代谢稳态
    摘要: 目的 本研究旨在制备添加富含白藜芦醇的蓝莓提取物的自研犬胰腺处方粮,并系统性地评价其对健康田园犬机体状态和代谢稳态的调节和改善作用。方法 采用自研处方粮和对照饲料分别喂养健康犬8周,对实验0周和8周犬开展身体检查、全血细胞计数、血清生化检测,并收集血浆进行非靶向代谢组学检测。结果 与对照组相比,自研处方粮喂养8周犬除总胆固醇降低外,其他生理生化指标未表现出异常,且血浆代谢组学分析发现自研处方粮可促进健康犬的谷胱甘肽、精氨酸代谢等过程。结论 上述代谢过程被报道与胰腺炎发生明确相关,提示自研处方粮具有保护胰腺、调节代谢平衡的潜在功能。

  • 王洪; 魏杰; 邢进; 王吉; 冯育芳; 李晓波; 付瑞; 肖镜
    实验动物科学 2024年第41卷第2期 DOI:
    关键词: 能力验证;;实验动物;;实验室质量控制
    摘要: 目的 分析我国实验动物质量检测能力现状,探讨实验动物质量检测能力验证组织实施现状,研究影响能力验证满意率的关键因素。方法 通过Excel2010和Powerpoint2010软件进行实验室数量、项次、满意率以及频次的变化分析。结果 2013—2021年共实施27个能力验证计划,包括22种检测能力参数,发放92种生物样本。共有70家实验室参加552个项次,整体满意率达到90.22%。结论 持续参加能力验证活动可以提升实验室的检测能力。

  • 刘师佳; 高硕磊; 覃尧; 张红
    实验动物科学 2024年第41卷第2期 DOI:
    关键词: BALB/c小鼠;;围手术期;;镇痛;;美洛昔康;;动物福利
    摘要: 目的 为了降低肿瘤切除术过程中小鼠的围手术期疼痛,保障动物福利最大化和研究数据的准确性,本研究探究美洛昔康对荷瘤小鼠的围手术期镇痛作用。方法 所有BALB/c小鼠均采用舒泰和右美托嘧啶的麻醉方案,分为对照组(A组)和美洛昔康注射组(B组)。采用面部表情评分系统和疼痛行为频率评估小鼠的疼痛程度;监测小鼠的体质量以及脏器的组织病理学方法评估其围手术期安全性。结果 B组小鼠的麻醉诱导时间较A组缩短,苏醒时间较A组显著延长(P<0.01);术后3 d内,B组小鼠的面部表情评分和疼痛行为频率较A组显著降低;两组小鼠的主要脏器和肠道组织在组织病理学上均无明显病变,体质量无显著差异,B组小鼠全部存活。结论 舒泰和右美托嘧啶麻醉方案联合美洛昔康可以缩短BALB/c小鼠的麻醉诱导时间并使其缓慢苏醒,显著地降低了小鼠的围手术期疼痛,且是安全的。

  • 潘宁静; 朱烨; 杨洁; 石芸; 杨慧欣
    实验动物科学 2024年第41卷第2期 DOI:
    关键词: 筑巢材料;;筑巢;;繁育性能;;C57BL/6JGpt小鼠;;BALB/cNj-Foxn1<sup>nu</sup>/Gpt小鼠
    摘要: 目的 探究三种筑巢材料及放置量对小鼠筑巢与繁育性能的影响。方法 C57BL/6JGpt(B6)小鼠、BALB/c Nj-Foxn1<sup>nu</sup>/Gpt(BALB/c-nu)小鼠随机各分为12组,每组36只(雄雌1∶2配繁),分别添加2、4、6、8 g 4种克重的拉菲草、纸棉、擦手纸筑巢材料,合笼后一周进行筑巢评分,每周统计总活产仔数、总离乳数、小鼠离乳体质量,持续统计5个月。结果 (1)两种品系小鼠拉菲草组、擦手纸组筑巢评分均显著优于纸棉组(P<0.05),筑巢评分与筑巢材料放置量无显著关联(P>0.05)。(2)两种品系小鼠总活产仔数、总离乳数与筑巢材料种类均无显著关联(P>0.05);B6小鼠6 g擦手纸组总活产仔数、总离乳数显著优于2 g擦手纸组(P<0.05);BALB/c-nu小鼠2 g擦手纸组总活产仔数显著优于6 g擦手纸组(P<0.05),2 g筑巢材料组总离乳数均显著优于8 g筑巢材料组(P<0.05);两种品系小鼠离乳体质量与筑巢材料种类、放置量均无显著关联(P>0.05)。结论 两种品系对不同筑巢材料及放置量存在差异。

  • 高明; 张楠; 李怀银; 金娟; 谢澎
    实验动物科学 2024年第41卷第2期 DOI:
    关键词: 固定液;;金黄地鼠;;海马神经元;;石蜡切片
    摘要: 目的 比较不同固定液对光镜下金黄地鼠海马体神经元的影响,为金黄地鼠海马体神经元固定液的选择提供参考。方法 将21只11周龄雄性SPF级金黄地鼠随机分为7组,分别使用4%多聚甲醛、10%中性甲醛、Bouin’s、Carnoy、Davidson’s、Zenker、Helly溶液进行心脏灌注,剥离脑壳取出完整大脑,在对应的固定液中固定48 h,并制作成石蜡切片,经HE染色后在光镜下观察海马体神经元的形态特征。通过匈牙利3DHISTECH公司数字切片扫描系统测量尺测量神经元细胞直径,比较固定液对细胞收缩的影响。结果 4%多聚甲醛、10%中性甲醛、Bouin’s溶液展现了良好的固定效果,固定后的大脑硬度适中,HE染色后的切片着色适中、色泽鲜艳、神经元各种细胞形态对比清晰,4%多聚甲醛因固定后切片无龟裂而更为理想。不同固定液固定后的海马体神经元存在细胞收缩方面的极显著差异(P<0.01),使用Carnoy、Davidson’s固定后的神经元各种细胞收缩最严重。结论 4%多聚甲醛、10%中性甲醛、Bouin’s溶液是金黄地鼠海马体神经元较为理想的固定液,4%多聚甲醛溶液建议作为首选。

  • 赵琪; 刘永涛; 周超; 兰艳丽; 汪溪洁; 李彩云
    实验动物科学 2024年第41卷第2期 DOI:
    关键词: 非人灵长类;;保定;;应激;;皮质酮;;内啡肽;;5-羟色胺
    摘要: 目的 考察恒河猴猴椅保定30 min连续5次适应性对应激激素水平的影响。方法 约3岁恒河猴,雌雄各15只,分3组,每组10只,雌雄各半进行猴椅保定适应性训练,每间隔1 d训练1次,每次训练30 min。组1:不进行适应性训练组,组2:单纯适应性训练组,组3:给予零食和安抚训练组。共训练5次,每次训练结束对3组所有动物采血分析。结果 与组1相比,组2和组3在多次猴椅保定适应性训练后可见猴血清皮质酮(CROT)显著性降低(P<0.05或P<0.01),组3的猴β-内啡肽(β-EP)显著降低(P<0.05或P<0.01),组3于第1和第5次适应性训练后5-羟色胺(5-HT)升高(P<0.01)。结论 进行猴椅保定的适应性训练能显著降低恒河猴的应激压力,让动物趋于习惯或适应坐猴椅保定的操作。在适应性训练中,给予正向强化的训练方式让受试者在减少应激和攻击性表现更显著,适应性保定训练3~4次就可以让应激压力降到恒定水平。