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  • 佟巍; 郭智; 刘芸; 冯婷婷; 郭建国; 苏磊; 孔琪; 向志光
    实验动物科学 2024年第41卷第5期 DOI:
    关键词: 小鼠肺炎病毒;;口咽拭子;;消长规律
    摘要: 目的 评价分子病原学及血清学检测方法在小鼠肺炎病毒(PVM)检测中的适用性。方法 3周龄BALB/c和C57BL/6J小鼠雌雄各半,滴鼻感染PVM,在感染后1、2、3周,1、2、3月采集各实验鼠口咽拭子及尾尖血,分别应用PCR和ELISA方法进行检测。结果 两品系小鼠感染PVM病毒1周后,口咽拭子PVM核酸检出率为70%~100%,随后2周和3周检出率降低,CT值增高,1个月后无检出;外周血PVM抗体1周无检出,随后2、3周检出率为80%~100%,1至3月全部检出,且PVM抗体ELISA检测吸光度持续增高,2月和3月仍维持较高的抗体水平。结论 小鼠口咽拭子样品的PCR检测结合血清学检测技术,可应用于小鼠PVM的质量控制。

  • 关媛媛; 刘美怡; 王立英; 李明瑞; 郑艺; 李玲孺; 孙紫薇
    实验动物科学 2024年第41卷第5期 DOI:
    关键词: 餐后高三酰甘油血症;;小鼠模型;;降脂
    摘要: 目的 探索建立一种改良的餐后高三酰甘油血症的小鼠模型,以期更好地模拟人类饮食结构和习惯,为研究中医药防治餐后高三酰甘油血症及其相关疾病,以及相关保健品和药物的开发提供动物模型参考。方法 将32只SPF级5周龄雄性ICR小鼠经标准饲料适应性喂养1周后随机分为灌胃0.9%氯化钠溶液组、灌胃食用油组、组合灌胃食用油和30%果糖水组、腹腔注射P-407组,一共4组,每组8只。根据脂耐量实验的相关参考文献决定在灌胃120 min后取材,并利用全自动生化仪检测相关血清学指标(TG、TC、HDL和LDL)。根据实验结果,进行后续实验;24只SPF级5周龄雄性ICR小鼠经标准饲料适应性喂养1周后随机分为空白组(12只)和模型组(12只)。其中,空白组给予0.7 mL的0.9%氯化钠溶液灌胃,模型组给予0.5 mL的花生油和0.2 mL 30%果糖水灌胃。灌胃120 min后取材,并利用全自动生化仪检测糖脂相关生化指标(TG、TC、HDL、LDL、AST、ALT、GLU和ALP);超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒检测了血清SOD、MDA的含量以评估氧化应激水平;利用HE染色和油红O染色观察肝病理情况;透射电镜观察肝细胞内线粒体形态。结果 组合灌胃食用油和果糖水更符合人类餐后血脂升高的机制,可以显著升高餐后小鼠TG水平。在后续实验中,模型组小鼠相关生化指标血清TG、LDL、GLU、ALT、AST、ALP显著升高,HDL显著下降。模型组小鼠血清SOD水平显著降低,MDA水平显著升高。HE染色模型组肝细胞结构轻微改变,肝油红O染色可见脂滴聚集,透射电镜可见肝细胞内线粒体内质网与脂滴相随的现象。结论 通过花生油和30%果糖水组合灌胃,可以成功建立一种改良的餐后高三酰甘油小鼠模型,这种糖脂代谢紊乱可能与氧化应激和线粒体功能有关。

  • 罗霆宇; 李凯丽; 李昌文; 陈洪岩; 夏长友; 高彩霞
    实验动物科学 2024年第41卷第4期 DOI:
    关键词: 弓形虫;;荧光定量PCR;;应用
    摘要: 目的 建立实验动物弓形虫TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,并对其进行初步应用。方法 通过比对美国国家生物技术信息中心(NCBI)发表的弓形虫各毒株序列,选取其529 bp重复序列保守区域设计引物探针,建立弓形虫的荧光定量PCR方法。随后对方法的特异性和敏感性进行检验;取浓度为10~6~10<sup>2 </sup>copies/μL 10倍系列稀释的质粒标准品,每个浓度做3个平行,重复检测3次,计算组内和组间变异系数,评估方法的重复性和稳定性;用建立的荧光定量PCR方法及国标推荐的PCR方法检测14份犬组织样品和66份猪全血样品,以评估此方法在实际应用中的检测能力。结果 建立的弓形虫荧光定量PCR方法在10~8~10<sup>1 </sup>copies/μL范围Ct值与质粒浓度呈线性关系,标准曲线Slope为-3.285,R<sup>2</sup>值为1,扩增效率为101.663%。可检测到的弓形虫最低浓度为10<sup>1 </sup>copies/μL;与其他14种实验猪常见病原不发生交叉反应;重复检测10~6~10<sup>2 </sup>copies/μL质粒标准品,组内变异系数小于1.21%,组间变异系数小于0.62%。用建立的弓形虫荧光定量PCR方法和国标PCR方法对14份犬组织样品和66份猪全血样品进行检测,结果显示,弓形虫荧光定量PCR方法和国标PCR方法检测的阳性率分别为10%(8/80)和7.5%(6/80),阳性符合率达到100%。结论 建立的弓形虫荧光定量PCR方法可以有效地检测弓形虫,为实验动物弓形虫日常监测提供良好的方法。

  • 池亚菲; 彭博雅; 马俊; 李梦; 陈柏安; 仵毅; 卢静
    实验动物科学 2024年第41卷第4期 DOI:
    关键词: 长爪沙鼠;;卵巢;;子宫;;睾丸;;附睾;;性成熟
    摘要: 目的 深入探究长爪沙鼠性成熟过程中生殖系统的发育情况,为其性成熟的确切时间提供直接研究证据。方法 本研究选取6~14周龄长爪沙鼠共150只,按6、8、10、12和14周龄分为5组,每组雌雄各15只,称量体质量并采集卵巢、子宫、睾丸、附睾样本,测量各样本组织湿重并计算脏器指数;镜下观察卵巢外观形态;细胞计数仪检测精子数量;每组随机选取6个样本进行HE染色,观察卵巢、睾丸、附睾的组织发育情况。结果 雌性沙鼠10周龄时卵巢湿重和卵巢指数均明显增加,且10~14周龄期间无明显变化,子宫湿重和子宫指数均呈阶段性变化;镜下观察外观,10周龄、12周龄、14周龄组黄体发生率分别为46.7%、60%、73.3%;组织切片显示,10周龄起可见明显黄体。雄性沙鼠在6~10周龄阶段睾丸湿重随周龄的增长而逐渐增加,10周龄后无明显变化;睾丸指数在8及12周龄时明显增加,14周龄时明显减小;6~12周龄阶段附睾湿重和附睾指数均随周龄的增长而逐渐增加,14周龄时附睾湿重无明显变化,附睾指数明显减小。细胞计数仪结果显示,6周龄时精子数量为0,10周龄与8周龄相比,附睾内精子数量明显增加,10~14周龄期间无明显变化。组织切片显示,8周龄起,睾丸和附睾内开始出现少量精子,10周龄起可见大量精子。结论 随着周龄的增长,雌性沙鼠卵巢在10周龄左右卵泡开始发育成熟并排出卵子,达到性成熟,具备繁殖能力。雄性沙鼠8周龄左右开始产生精子,进入初情期,10周龄左右睾丸发育稳定,精子达最大数量,达到性成熟,此后附睾继续发育,12周龄左右发育稳定。

  • 张莹; 周子娟; 郭怡君; 候正梓檀; 王靖宇; 董建一
    实验动物科学 2024年第41卷第4期 DOI:
    关键词: 肠道菌群;;宏基因测序;;菌群分析
    摘要: 目的 采用宏基因测序技术进行导盲犬和淘汰犬肠道菌群功能差异性分析。方法 对15只犬进行测序(导盲犬9只,淘汰犬6只),应用基因数目、肠道菌群多样性等方法进行分析。结果 导盲犬组特有25 630个基因,淘汰犬组特有10 527个基因。具有显著差异的上调基因2 266个,下调基因1 043个(P<0.05)。导盲犬组中,梭状芽孢杆菌目的丰度高于淘汰犬组;此外,两组犬样本中瘤胃球菌的丰度也存在差异。结论 导盲犬和淘汰犬的肠道菌群多样性均存在差异性,对犬的行为有一定的影响。

  • 姚桢; 张子微; 吴春淼; 张靖楠; 李庆华; 王振龙
    实验动物科学 2024年第41卷第4期 DOI:
    关键词: 间歇低氧;;Meta分析;;水迷宫
    摘要: 目的 本文针对现有Morris水迷宫实验结果进行分析,探讨间歇低氧对哺乳动物学习记忆能力的影响。方法 通过检索中国知网(CNKI)、维普、万方、Web of Science、PubMed、Elsevier等数据库,根据纳入及排除标准筛选文献,检索时间限定为建库到2023年2月25日。使用RevMan 5.3软件对提取的数据进行统计学分析,主要分析间歇低氧对鼠在Morris水迷宫实验中逃避潜伏期和跨越目标象限时间的影响。随后采用敏感性分析的方法对所纳入研究的质量进行评价。结果 本研究共纳入24篇文章,263个研究对象。Meta分析结果显示,在Morris水迷宫实验中,相较于对照组,在间歇低氧2周后鼠逃避潜伏期增长[SMD=4.17,95%CI(3.46,4.89),P<0.01];而鼠跨越目标象限时间缩短[SMD=-3.07,95%CI(-3.56,-2.58),P<0.01]。在间歇低氧4周后鼠逃避潜伏期长于对照组[SMD=8.03,95%CI(6.21,10.40),P<0.01];跨越目标象限时间缩短[SMD=-6.79,95%CI(-8.60,-4.99),P<0.01]。结论 在间歇低氧不同时间后,鼠在水迷宫中的逃避潜伏期增长;而跨越目标象限时间缩短,即表现出学习记忆能力受损。

  • 蔡利东; 田苗苗; 李乃馨; 王馨宇; 杨慧欣
    实验动物科学 2024年第41卷第4期 DOI:
    关键词: 多重荧光定量PCR方法;;培养法;;条件致病菌
    摘要: 目的 建立金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、绿脓假单胞菌三种条件性致病菌的多重荧光定量PCR(qPCR)检测方法。方法 选取金黄色葡萄球菌nuc基因、肺炎克雷伯杆菌phoE基因、绿脓假单胞菌gyrB基因设计特异性引物及探针,建立多重qPCR方法,并测试其特异性、灵敏度、标准曲线及重复性等性能指标。用该方法检测30个临床粪便样品、6个阳性参考品,检测结果与分离培养法结果进行对比,计算符合率。结果 多重qPCR检测方法对金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、绿脓假单胞菌的标准菌株基因组DNA均能稳定检出;对鼠伤寒沙门菌、嗜肺巴斯德杆菌、鼠棒状杆菌、支气管鲍特杆菌等病原微生物项目无非特异性扩增;针对金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、绿脓假单胞菌标准菌株基因组DNA的灵敏度分别为1.0×10<sup>-5</sup>、1.0×10<sup>-4</sup>、1.0×10<sup>-5</sup>ng/μL;批间差异、批内差异均小于2%,重复性良好;临床样品和阳性参考品的检测结果显示多重qPCR法与分离培养法的检测结果一致。结论 本研究成功建立了一种可同时、快速检测金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、绿脓假单胞菌的多重qPCR检测方法。

  • 董巧燕; 张文盛; 尚艳姣; 邱业峰; 陈菁青
    实验动物科学 2024年第41卷第4期 DOI:
    关键词: 实验动物;;配合饲料;;常规营养成分;;微量元素;;饲料标准化
    摘要: 目的 了解当前我国实验动物饲料质量现状,为标准化实验动物饲料生产提供依据。方法 选择市场占有率高、代表性强的五家不同来源饲料厂家生产的实验动物饲料,采用国标法对成品料常规营养成分进行测定比较分析。结果 不同厂家生产的鼠繁殖料、猴维持料、犬料、兔料、豚鼠料常规养分含量存在显著差异,饲料水分、粗蛋白、钙及磷含量均符合国标,个别厂家生产的鼠繁殖料、猴维持料、兔料存在灰分、粗纤维含量超标、粗脂肪含量偏低的情况。此外,五种饲料中微量元素含量不合格检出率高,主要为铁和碘含量的超标。结论 不同实验动物饲料生产厂家常规养分质量基本能达到国标要求,但缺乏对微量元素等指标的监测,导致产品不合格率高。因此,还需要加强和提升饲料标准化体系建设和质控监督等关键环节,确保实验动物饲料标准化和规范化。

  • 相磊; 王学文; 刘华蔚; 常平; 母晓丹; 胡敏
    实验动物科学 2024年第41卷第4期 DOI:
    关键词: 颞下颌关节;;胚胎发育;;模型动物
    摘要: 颞下颌关节(TMJ)是哺乳动物特有的滑膜关节,其发育过程与长骨关节有着显著的不同。TMJ胚胎发育研究已有近百年的历史,然而一方面人类TMJ胚胎发育研究的连续性受到限制,TMJ发育起始以及髁突骨化与生长方式等问题还尚未完全阐明;另一方面啮齿类动物作为TMJ发育研究的模式动物与人类TMJ还存在一定的差异,寻求与人更为接近的模式动物开展TMJ胚胎发育研究的脚步从未停止。本文从人类与动物模型两个方面对胚胎期TMJ的形态发育进行了综述。

  • 王金辉; 张勇; 董伟韬; 张全伟
    实验动物科学 2024年第41卷第4期 DOI:
    关键词: 抑郁症;;动物模型;;行为学评估
    摘要: 抑郁症因逐年升高的发病率已经受到了医学界的广泛关注。抑郁症发病因素极其复杂,因此在进行相关实验时构建相应抑郁症模型成为实验关键步骤。本文主要介绍常见小鼠抑郁症模型的构建方法,例如慢性不可预见性温和刺激模型,特殊药物所致抑郁模型,生命早期应激模型等,以及相关评估抑郁程度的行为学实验,例如强迫游泳实验、蔗糖偏好实验、喷溅实验等,为相关研究人员提供实验思路及方法。