摘要: 目的 为小鼠尾静脉注射提供一种新方法，旨在提高效率与成功率。方法 选取120只SPF级C57BL/6J野生型小鼠，随机分成4组：笼盖压制注射组、固定器灯照注射组、常规远端尾静脉注射组、近端尾静脉注射组(实验组),每组30只。实验组采用尾静脉固定器固定小鼠并用特定手法固定尾部，使用胰岛素注射器对小鼠进行近端尾静脉穿刺注射，记录多种穿刺方法的穿刺成功率，采用SPSS 27.0软件分析各组间的统计学差异。结果 相较于笼盖压制法、固定器灯照法、常规远端尾静脉注射法，近端尾静脉注射法的成功率显著提高(P<0.05)。结论 本方法操作准确、高效、便捷，为小鼠尾静脉注射操作提供了一种高效率、高成功率的新方法。

摘要: 目的 探讨蒺藜水提物重复给药后对大鼠体质量、血液指标及组织病理学的影响。方法 将120只SD大鼠(雌雄各半)随机分为对照组和蒺藜水提物低、中、高剂量组。对照组灌胃给予动物饮用水，低、中、高剂量组分别每日灌胃给予蒺藜水提物8.50、17.0、34.0 g生药/(kg·bw),连续给药30 d,观察给药期及恢复期大鼠的一般状况、大鼠体质量、血液指标及肝组织病理学改变。结果 给药期间各组大鼠均未出现明显不良反应，体质量增长正常。给药30 d后，与对照组比较，雄鼠中、高剂量组红细胞(RBC)升高(P<0.05,P<0.01)、红细胞平均体积(MCV)降低(P<0.05,P<0.01);恢复期雌鼠低剂量组血小板(PLT)降低(P<0.01),雄鼠低剂量组平均血红蛋白量(MCH)降低(P<0.05)。恢复期雌鼠低、中、高剂量组丙氨酸转氨酶(ALT)降低(P<0.05,P<0.05,P<0.01);中剂量组γ-谷氨酰转肽酶(GGT)降低(P<0.05)。组织病理学检查发现，给药30 d肝组织病理学检查可见低、中剂量组灶状炎细胞浸润，高剂量组灶状炎细胞浸润及大量的脂肪细胞，肝细胞脂肪变性；恢复期低、中剂量组病变程度明显比给药期减轻，未见脂肪变性；高剂量组可见肝灶状炎细胞浸润及大量脂肪细胞。结论 长期大剂量给予蒺藜水提物可导致大鼠肝病理学改变，其肝毒性具有剂量和时间依赖性，其最大无毒性剂量为17.0 g/(kg·bw)(临床用量的100倍)。临床使用蒺藜水提物时需严格控制剂量和疗程，并密切监测肝功能相关指标。

摘要: 目的 探讨电针对高脂饮食诱导的雌性生长期大鼠脏器系数和卵巢芳香化酶(CYP19A1)基因及蛋白表达的影响。方法 21日龄SD雌性大鼠，随机分为对照组6只，予普通饲料喂养；模型组6只，予高脂饲料喂养，不做任何治疗；电针组6只，高脂饲料喂养并选取“三阴交”“丰隆”“足三里”给予电针治疗，连续干预14 d。每周测量大鼠体质量和体长，治疗结束后，分别采用电子天平称重法测量大鼠体质量、肝质量、卵巢质量和子宫质量，并计算肝系数(肝质量/体质量)、卵巢系数(卵巢质量/体质量)和子宫系数(子宫质量/体质量);采用荧光定量PCR法检测大鼠卵巢CYP19A1 mRNA的表达水平；Western blot法检测大鼠卵巢组织CYP19A1蛋白的表达水平。结果 与对照组比较，模型组体质量、Lee’s指数明显升高(P<0.05),脏器系数明显升高(P<0.05),卵巢CYP19A1 mRNA、蛋白的表达明显升高(P<0.05);与模型组比较，针刺组大鼠体质量、Lee’s指数明显降低(P<0.05),脏器系数及卵巢CYP19A1 mRNA、蛋白的表达显著下调(P<0.05)。结论 电针可以降低高脂饮食诱导的雌性生长期肥胖大鼠的Lee’s指数和脏器系数，下调卵巢CYP19A1 mRNA及蛋白的表达水平，从而调节雌性生长期肥胖大鼠性发育水平。

摘要: 目的 比较分析现行国家标准生化标记法与一代测序检测小鼠SNP分子标记法在BALB/c小鼠遗传质量评价中的异同，为近交系小鼠的遗传质控提供参考。方法 利用14个小鼠常规生化标记位点和35个SNP常用遗传分析位点，对同一批BALB/c小鼠进行遗传质量检测，从结果评价、变异检出度、染色体覆盖率、动物福利、操作便捷性、方法重复性等方面对两种方法进行比较。结果 两种方法均可检出6只BALB/c中2、5、6号小鼠出现了变异，但生化标记法仅检出了4个位点的纯合变异，SNP分子标记法检出了9个位点的纯合变异和3个位点的杂合变异。进一步比较发现，SNP标记法在染色体覆盖率、动物福利、操作便捷性、方法重复性上均优于生化标记检测法。结论 SNP标记法在近交系小鼠遗传质控评价中比现行国家标准生化标记检测法更具优势，可作为近交系实验动物的标准化遗传质控技术。

摘要: 目的 确定小鼠细小病毒(MVM)有效灭活时间，保证实验室能力验证样本的生物安全性；通过MVM核酸检测能力验证实施计划，了解我国实验动物相关检测机构的检验能力，促进实验动物质量检测水平和能力的提高。方法 通过采取不同温度和不同时间对已知病毒滴度的MVM进行水浴加热灭活。经过灭活的病毒一部分用于病毒滴度的检测，一部分通过荧光PCR方法用于核酸的检测。取MVM核酸阴性的小鼠粪便混悬液作为阴性样品，将灭活的病毒加入到MVM核酸阴性的小鼠粪便混悬液中制备能力验证阳性样品。样品经过均一性、稳定性检验合格后，采用随机编号，发放给参加单位，并对参加单位提交的结果进行汇总分析。结果 当灭活温度达100℃,灭活时间不超过1 h,能有效灭活病毒，同时核酸检测结果批内变异系数均<5%,差异不显著。参加单位结果满意率为96.4%(27/28)。结论 当灭活温度达100℃,灭活时间不超过1 h, MVM核酸序列保留完整，核酸检测结果不影响实验。参加实验室有96.4%具备了MVM核酸检测能力，有3.6%的实验室能力有待提高；还有少部分实验室在操作规范和原始记录的书写规范方面有待提升。

摘要: 目的 克服犬致病性大肠埃希菌（CPEC）传统检测方法不足，建立快速、灵敏、特异的TaqMan探针实时荧光定量PCR（qPCR）方法，用于CPEC的精准诊断。方法 针对CEPC保守毒力基因eaeA,构建qPCR检测方法，梯度稀释建立标准曲线，确定线性范围和最低检出限，评估其特异性、重复性。用45份临床样本与常规PCR对比验证。结果 构建的qPCR方法标准曲线线性关系良好（R²=0.99）,Y=-3.406x+40.14,最低检出限10 copies/μL,对其他常见病原菌无交叉反应。重复性实验表明，组内与组间变异系数均低于3%。临床样本检测中，qPCR方法检出15例阳性，两种方法一致性达93.3%。结论 本研究成功建立了一种灵敏度高、特异性强的TaqMan探针qPCR检测方法，可为犬类感染早期诊断及流行病学监测提供有效技术支持。

摘要: 目的 建立基于环境介质的小鼠肝炎病毒(MHV)快速监测方法，实现实验动物屏障环境的病原早期预警。方法 分析MHV的保守序列，对特异重组酶介导等温扩增(RAA)引物及CRISPR/Cas13a反应的crRNA进行设计和优化，建立用于检测MHV的RAA-CRISPR/Cas13a检测体系，并验证其特异性、敏感性。为进一步验证其实用性，将该检测体系应用于动物环境粉尘样本的检测。结果 针对实验动物生存环境的粉尘样本，建立了基于重组酶介导等温扩增(RAA)结合CRISPR/Cas13a技术的MHV快速检测方法。特异性实验结果表明，该方法对仙台病毒(SeV)、呼肠孤病毒3型(Reo-3)、小鼠肺炎病毒(PVM)、小鼠脑脊髓炎病毒(MEV)及小鼠诺如病毒(MNV)等常见小鼠病毒均无交叉反应；对MHV检测具有高度特异性，最低检测限可达10 copies/μL,具有优越的检测灵敏度。采用PCR法为对照进行临床样本验证，160份随机粉尘样本进行平行检测，两种方法检测结果完全一致，共检出26份核酸阳性样本。结论 基于环境粉尘的RAA-CRISPR/Cas13a检测体系为实验动物设施病原监测提供了新的思路及高效灵敏的技术支持。

摘要: 目的 建立A群轮状病毒（PoRVA）和塞内卡病毒（SVA）双重RT-qPCR检测方法，并对其进行初步应用。方法 通过比对A群轮状病毒和塞内卡病毒毒株序列，选取PoRVA NSP3基因、SVA VP1基因保守区域分别设计引物和探针，建立PoRVA和SVA双重RT-qPCR检测方法。随后对方法的特异性和敏感性进行检测；取浓度为10～6～10³copies/μL 10倍系列稀释的重组质粒标准品，每个浓度做3个平行，重复检测3次，计算组内和组间变异系数，评估方法的重复性和稳定性；用建立的双重RT-qPCR检测方法与《GB/T34756—2017猪轮状病毒病病毒RT-PCR检测方法》和《SN/T 5486—2022塞内卡病毒病检疫技术规范》的检测方法进行比对，并检测15份猪粪便样品和35份猪肛拭子样品，评估该方法的实际应用性。结果 建立的双重RT-qPCR方法在10～9～10～1 copies/μL范围Ct值与质粒浓度呈线性关系，PoRVA标准曲线Slope为-3.085,r²值为0.993,扩增效率为110.956%,SVA标准曲线Slope为-3.085,r²值为0.993,扩增效率为110.935%,可检测到的PoRVA和SVA最低限均为10～1 copies/μL;且与其他7种实验猪常见病原不发生交叉反应；重复检测10～6～10³copies/μL质粒标准品，组内变异系数小于0.15%,组间变异系数小于1.50%。用建立的双重RT-qPCR方法与《GB/T34756—2017猪轮状病毒病病毒RT-PCR检测方法》和《SN/T 5486—2022塞内卡病毒病检疫技术规范》方法检测15份猪粪便样品和35份猪肛拭子样品，结果显示，RT-qPCR检测出PoRVA阳性100%（50/50）,SVA阳性66%（33/50）,《GB/T34756—2017猪轮状病毒病病毒RT-PCR检测方法》检测阳性率100%（50/50）,《SN/T 5486—2022塞内卡病毒病检疫技术规范》检测阳性率24%（12/50）,阳性符合率达到100%。结论 本研究建立的双重RT-qPCR检测方法可以有效地检测PoRVA和SVA,可为猪群的疫病检测和日常监测提供技术支撑。

摘要: 目的 探讨生物安全型独立通风笼具(IVC)的各项指标的检测方法，对自主研发的生物安全型小鼠IVC的性能指标进行评价。方法 依据RB/T199—2015与DB23/T 2057.1—2017的检测方法，对某国外进口生物安全型IVC(IVC1)和自主研发的生物安全型IVC(IVC2)的各项性能指标进行检测，并判定其安全性。结果 IVC1与IVC2的各项指标均满足相关标准的要求，两者在气流速度、空气洁净度、落下菌、噪声、照度、温度及相对湿度的检测结果较为一致，但是与IVC1相比，IVC2在压差、换气次数、气密性指标存在一定的差距。结论 检测方法操作性强，可用于生物安全型小鼠IVC的现场检验，自主研发的生物安全型小鼠IVC性能优良，安全可靠，可用于高等级生物安全实验室高致病性病原感染动物的饲养。

摘要: 目的 本实验旨在探究大林姬鼠的发情周期及其发情周期不同阶段性激素水平的变化规律。方法 选取处于繁殖期的雌性大林姬鼠，采用外阴观察法和阴道脱落细胞涂片法相结合，确定大林姬鼠的发情周期。提取发情周期不同阶段的大林姬鼠血清，使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测雌激素、孕激素及促黄体生成素的浓度。同时，采用苏木精-伊红(HE)染色法观察大林姬鼠在发情周期不同阶段的子宫及卵巢形态学变化。最后，提取大林姬鼠子宫和卵巢组织，通过qPCR技术分析发情周期不同阶段的性激素相关受体基因的表达差异，以探讨其在发情周期中的调控作用。结果 大林姬鼠发情周期为4～7 d,发情期平均时长0.97 d,发情间期平均时长2.41 d。发情期雌激素和促黄体生成素水平显著高于发情后期及发情间期(P<0.001),孕激素在发情间期水平显著高于发情前期和发情期(P<0.001)。发情周期中子宫与卵巢在形态和结构上的显著差异，反映了性激素水平的周期性波动对大林姬鼠生殖器官形态与结构变化的关键调控作用。结论 本研究明确划分了大林姬鼠发情周期的4个阶段。不同阶段在细胞形态、激素分泌和生殖器官结构上存在规律性差异。