摘要: 职业健康安全管理体系作为现代企业管理制度之一，越来越受到人们的重视。近年来，职业健康安全管理体系在各个领域不断完善和发展，逐渐成为企业竞争力的重要指标。目前，国际实验动物评估和认可委员会（Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care International，简称AAALACInternational）和中国合格评定国家认可委员会（China National Accreditation Service for ConformityAssessment,CNAS）均对实验动物相关的职业健康管理提出了要求。而在国内实验动物行业，由于各机构对职业健康相关的法律法规不够熟悉，缺乏经验丰富的管理人员，实验动物机构的职业健康安全管理体系发展相对滞后，尚处于发展初期。本文通过总结作者在实验动物机构建立职业健康安全管理体系的实践经验，首先介绍了国内外有关实验动物的职业健康安全法律法规、我国实验动物机构常见职业病及其危害因素，然后从建立职业健康安全管理制度、开展职业健康安全培训、从业人员职业健康检查、职业病危害因素现场检测、落实建设项目职业病防护设施“三同时”制度、建立及维护职业健康档案、建立职业危害告知管理制度、建立职业病危害事故应急救援预案等方面指出实验动物机构进行职业健康安全管理体系建设的要点，以供行业内作参考。

摘要: 重症肌无力（myasthenia gravis,MG）是一种自身免疫性疾病，主要表现为骨骼肌无力，严重时可累及呼吸功能。目前，西医治疗MG以免疫抑制剂为主，但长期用药的不良反应显著；而中医治疗具有多靶点干预的优势。由于MG的发病机制尚未完全明确，因此建立契合中西医临床特征的动物模型对机制研究及新药开发至关重要。本文系统梳理了MG的中西医病因病机、诊断标准及动物模型研究进展。西医认为MG发病与遗传易感性、环境因素及自身抗体介导的突触后膜损伤密切相关；中医则将其归为“痿证”，病机为先天禀赋不足与后天失养。西医诊断需综合典型症状、疲劳试验、血清抗体检测及电生理检查；中医诊断则以主症结合次症及舌脉辨证分型。现有动物模型以实验性自身免疫性重症肌无力（experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG）和被动转移重症肌无力（passive transfer myasthenia gravis,PTMG）为主。其中，电鳐乙酰胆碱受体（acetylcholinereceptor,AChR）诱导的EAMG模型与西医诊断标准吻合度较高，但中医次症吻合度不足；人工合成AChR多肽模型应用广泛，但中医证候吻合度低；肌肉特异性酪氨酸激酶（muscle-specific tyrosine kinase,MuSK）、低密度脂蛋白受体相关蛋白4(low density lipoprotein receptor associated protein 4,LRP4)诱导模型及转基因模型创新性强，但临床吻合度偏低。模型评估需结合行为学、电生理及免疫指标，而中医证候模型尚缺系统性构建。笔者认为，未来研究需融合中医病因学造模法与西医病理机制，构建病证结合模型，并建立基于“以方验证”的中医证候评价体系，结合新兴技术提升模型科学性与实用性。本文将为优化MG动物实验设计、推动中西医结合研究提供理论依据，也为中药复方疗效评价及机制探索奠定基础。

摘要: 实验动物是生命科学研究的基石，其作为人类生理、病理及疾病治疗的替代模型，在基础研究、药物开发和转化医学中具有不可替代的作用。肠道菌群是由细菌、真菌、病毒以及单细胞生物等构成的复杂微生物类群，其定植于宿主肠道内，与宿主正常生理代谢功能的维持和生命健康密切相关。有研究表明，肠道菌群组成结构的素乱可引发肥胖、糖尿病、高血压、炎症性肠病以及阿尔茨海默病等多种疾病。因此，针对实验动物开展肠道菌群的特征性分析不仅有助于提升实验结果的可靠性，而且将有助于动物实验结果的转化应用。性别差异是生物学研究中的重要变量，其对实验动物的生理功能、代谢特征及肠道菌群组成均具有显著影响。然而，研究人员在较多生物学研究中存在明显的实验动物性别偏好性，这极大地限制了研究结果的普适性。本文对小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔、犬、猫、非人灵长类动物、小型猪和鸡这10种生命科学实验中常用的实验动物的肠道菌群组成结构特征进行归纳总结，并对部分实验动物肠道菌群的性别差异进行分析。此外，针对实验动物与人类肠道菌群的对比分析，还为基于实验动物的比较医学研究提供了新视角。综上，相关研究成果在加深科研人员对不同实验动物肠道菌群特征及其性别差异性认识的同时，也将为科学研究中实验动物的选用、性别特异性疾病动物模型的构建和结果分析提供指导和借鉴。

摘要: 目的 报告2019年某实验猴养殖场中食蟹猴群暴发犬瘟热病毒的诊断情况。方法 针对2019年底中国华南地区某实验猴养殖场送检的21只患病食蟹猴（出现面部红疹、皮屑、流鼻涕和腹泻等症状）的血清、皮肤红疹拭子和1只病死猴的抗凝全血、肝、肺、皮肤组织，共46份样品，采用实时荧光定量PCR法检测犬瘟热病毒基因片段，采用免疫组织化学染色法检测肺组织中犬瘟热病毒核蛋白表达。将病死猴的皮肤组织研磨过筛，取滤液接种于单层MDCK细胞系中培养分离病毒，将分离的病毒进行全基因组测序鉴定，采用Clustal Omega工具对亚洲不同犬瘟热病毒分离株进行比对和同源性分析，构建遗传发育树，并对其进行遗传进化分析。结果 经临床追溯，患病的食蟹猴出现了与麻疹病毒感染食蟹猴类似的症状，剖检病死猴可见肺部有红色病变，大肠黏膜有明显出血。实时荧光定量PCR检测患病猴血清、皮肤红疹拭子及病死猴各组织样本中的犬瘟热病毒核酸结果均呈阳性，由标准曲线公式计算出皮肤组织中的病毒载量最高；免疫组织化学染色病死猴的肺组织显示犬瘟热病毒核蛋白聚集在肺泡上皮细胞、肺支气管和细支气管处；从病死猴皮肤组织中分离出1株犬瘟热病毒株，遗传进化分析表明其与越南犬中发现的亚洲1型CDV/dog/HCM/33/140816株亲缘关系最近，基因相似度达到98.86%。结论 综合临床症状、核酸检测、病毒蛋白免疫组织化学法及全基因组测序分析结果，诊断该猴场的食蟹猴感染了犬瘟热病毒，建议将犬瘟热病毒纳为饲养猴群的监测项目之一。本研究还为进一步分析犬瘟热病毒的分子生物学特性提供了基础。

摘要: 目的 通过模拟排卵功能障碍型异常子宫出血（abnormal uterine bleeding-ovulatory dysfunction,AUB-O）病因，建立异常子宫出血大鼠模型，为异常子宫出血病理机制研究及治疗药物开发提供可靠的模型支持。方法 将24只成年（10周龄）雌性SD大鼠适应性饲养后，随机分为正常对照组（6只）和模型组（18只）。正常对照组大鼠在屏障环境中正常饲养；模型组大鼠在屏障环境中经背侧入路行双侧卵巢切除术，休养1周后开始造模用药。模型组造模第1～3天每日每只大鼠背部皮下注射雌二醇0.5 mg，第4～7天每日皮下注射孕酮5.0 mg；同时于第6天经背侧相同手术切口向双侧子宫腔各注射0.5 mL大豆油，于第8天行米非司酮（10 mg/kg）灌胃，造模期间持续观察大鼠所处动情周期的阶段及其变化趋势。造模后48 h内观察并记录大鼠子宫出血情况，米非司酮灌胃后0、12、24、36、48 h模型组动态收集血清和子宫组织样本，正常对照组在36 h同时取材。取材后分别进行HE染色、血清性激素ELISA测定、免疫组织化学检测、TUNEL凋亡染色、蛋白质印迹检测、转录组学测序和生物信息学分析，对异常子宫出血大鼠模型进行综合评价。结果 异常子宫出血大鼠表现为子宫出血，内膜剥脱损伤、复旧不全，内膜炎性细胞浸润、凋亡增强，间质、腺体和血管结构破坏。与正常对照组相比，异常子宫出血大鼠的血清卵泡刺激素、雌二醇和促黄体生成素水平明显升高（P<0.05）；子宫内膜血管密度明显降低（P<0.05）；血管内皮生长因子在子宫内膜剥脱处表达定性观察到明显增强，而在间质血管周围表达显著下降（P<0.01）；基质金属蛋白酶-9在内膜损伤部位表达定性观察到明显增强，而在未剥脱间质和腺体处表达显著降低（P<0.01）；子宫内膜间质细胞凋亡显著增强（P<0.01）；成纤维细胞生长因子2和内皮素-1在子宫组织中的表达水平均明显下降（P<0.05）。比较异常子宫出血大鼠与正常大鼠子宫组织的转录组测序结果，共筛选到4 723个差异表达基因，其中表达上调基因为2 191个，表达下调基因为2 532个；KEGG富集分析显示，差异基因显著富集在炎症、免疫凋亡、细胞信号转导、增殖分化和肌肉收缩等相关通路。结论 采用雌激素、孕激素和米非司酮序贯给药模拟AUB-O病因的方法，可成功建立异常子宫出血大鼠模型。该模型的子宫内膜损伤与炎症和凋亡相关，病理表现受血管收缩和内膜再生能力异常影响。该大鼠模型具有与临床非结构性病因异常子宫出血相近的病理特征，可以作为研究病理机制和治疗方法的有效模型。

摘要: 目的 获得五指山猪主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex,MHC）Ⅱ类分子基因序列，并分析其遗传信息，探究五指山猪MHC的生物学功能。方法 采集3头成年雄性五指山猪的脾脏样本，根据MHCⅡ类分子基因序列设计引物，采用RT-PCR法扩增五指山猪MHCⅡ类分子基因的编码序列，通过Sanger测序确定MHCⅡ类分子基因序列，利用生物信息学软件分析五指山猪MHCⅡ类分子基因的理化性质、系统进化关系、保守基序和结构域，以及染色体位置和共线性关系。结果 共鉴定出8个五指山猪MHCⅡ类分子基因，分别为SLA-DRA、SLA-DQA、SLA-DQB、SLA-DRB、SLA-DOB、SLA-DMB、SLA-DMA和SLA-DOA。Sanger测序后确定MHCⅡ类分子基因序列，并将序列上传至GenBank获得登录号，分别为PQ182796、PQ182797、PQ182798、PQ182799、PQ182800、PQ182801、PQ182802和PQ164779。系统进化树分析表明，五指山猪6个MHCⅡ类分子基因与杜洛克猪、梅山猪、大白猪和巴马猪等不同品种猪的MHCⅡ类分子基因不在同一个分支上。生物信息学分析表明，MHCⅡ类分子大部分为疏水性蛋白，其相对分子质量为27 700～30 000，归于同一亚区的基因含有相似的保守基序，其中SLA-DQB、SLA-DRB、SLA-DOB和SLA-DMB基因编码的4个MHCⅡ类分子包含MHCⅡβ保守结构域，SLA-DRA、SLA-DQA、SLA-DMA和SLA-DOA基因编码的4个MHCⅡ类分子包含MHCⅡɑ保守结构域。8个MHCⅡ类分子基因散在分布于五指山猪的7号染色体长臂上，与人的3个基因之间具有共线性关系，而与杜洛克猪的5个基因之间呈现共线性关系。结论 五指山猪的MHCⅡ类分子基因可能具有特殊的遗传学起源。

摘要: 目的 监测空调系统停止送风前、停止送风期间和恢复送风后，实验动物设施环境中氨浓度的实时变化，为制定空调系统停机应急预案提供依据和参考。方法 以武汉生物制品研究所实验动物室实验动物设施为研究对象，在设施空调系统由于检修等被动停机和维保主动停机时，使用氨浓度检测仪监测普通级兔生产设施、SPF级仓鼠生产设施、SPF级豚鼠实验设施的空调系统停机前后设施环境中的氨浓度，以及恢复送风后氨浓度恢复至日常水平的时间。结果 空调系统在2种停机模式下，不同实验动物设施环境中的氨浓度变化趋势一致，表现为停机后快速上升，恢复送风后快速下降。在维保主动停机的情况下，普通级兔生产设施、SPF级仓鼠生产设施、SPF级豚鼠实验设施中氨浓度最高值分别为9.81 mg/m³、14.27 mg/m³、6.98 mg/m³；恢复送风后12 min内，氨浓度均可降至日常水平。在检修等被动长时间停机的情况下，氨浓度数值与停止送风时长成正相关，氨浓度随着停机时间的延长不断升高，3个设施中氨浓度最高值分别出现在停风后88 min（38.06 mg/m³）、停风后40 min（18.43 mg/m³）、停风后34 min（15.61 mg/m³）；在恢复送风后11 min内，氨浓度可降至日常水平。结论 空调系统停机会导致实验动物设施氨浓度快速上升，氨浓度的上升程度与停止送风时长成正相关。因此，在由于维修等原因需要进行空调系统应急停机时，应按照GB 50447—2008《实验动物设施建筑技术规范》要求，设置备用风机。对于老旧设施，相关人员需提前做好全面准备，并制定科学合理的应急预案。

摘要: 动物实验是生物医学研究中的重要手段，是连接基础研究与临床试验的桥梁。动物实验的系统评价/Meta分析（systematic review/meta-analysis,SRs/MAs）是整合动物实验证据的重要手段，能够促进成果向临床研究转化，降低转化风险，并推动基础研究的资源整合。随着证据推荐分级的评估、制订与评价（grading of recommendations assessment,development and evaluation,GRADE）方法的不断发展，其在动物实验SRs/MAs中的应用受到了越来越多的关注。本文首先阐述了GRADE方法在动物实验SRs/MAs中的应用原理及具体应用类型，包括定性描述的系统评价、Meta分析及网状Meta分析；接着深入分析了GRADE方法在实际应用中的误用情况，主要包括未正确进行证据体分级、证据体分级不当、误用于定性系统评价、升降级过程记录与结果不一致，以及误用于提供推荐意见；此外，还全面探讨了GRADE方法在动物实验SRs/MAs中的证据确信度升降级因素，包括偏倚风险、间接性、不一致性、不精确性和发表偏倚对证据降级的影响，以及大效应量和跨物种一致性对证据升级的作用；最后，针对上述问题提出了改进策略，包括进一步研究与优化GRADE方法在动物实验SRs/MAs中的应用细节、制定符合动物实验研究特点的SRs/MAs报告规范，以及加强研究人员在GRADE方法上的专业培训等。本文旨在通过提升动物实验SRs/MAs的证据质量，增强其在临床决策中的可靠性，促进动物实验研究成果更高效地转化为临床实践。

摘要: 目的 探讨自发性早衰SHJH^hr小鼠心脏的衰老现象。方法 对不同周龄（10周龄和24周龄）的SHJH^hr小鼠(SHJH^hr组)和野生型ICR小鼠[用作野生组（wild-type,WT组）]进行对比研究。用小动物活体超声影像系统分析心脏功能，安死术后采集各脏器并称重，了解心脏萎缩情况；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色后观察心脏病理损伤情况；Masson染色后分析心脏纤维化情况；麦胚凝集素（wheat-germ agglutinin,WGA）染色后分析心脏心肌细胞面积；酶联免疫吸附法检测心肌组织中氧化损伤指标包括超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GPX）和过氧化氢酶（catalase,CAT）的活性以及8-羟基-2'-脱氧鸟苷（8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG）含量；实时荧光定量PCR法检测炎症、纤维化、氧化应激相关标志因子的mRNA表达水平；比色法检测丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平。结果 与同周龄的WT组小鼠相比，10周龄SHJH^hr组小鼠的每搏输出量（stroke volume,SV）、射血分数（ejection fraction,EF）、缩短分数（fractional shortening,FS）和心肺重量无明显差异；但是当小鼠达到24周龄时，SHJH^hr组小鼠的SV、EF和FS值明显低于同周龄WT组小鼠（均P<0.05），肺脏重量无显著变化，但是心脏重量显著降低（P<0.05）。选取24周龄小鼠心脏组织进行组织学分析发现：与WT组小鼠相比，SHJH^hr组小鼠的心脏纤维化水平无明显差异，但WGA染色显示心肌细胞面积显著减少（P<0.05）。PCR检测发现氧化应激标志因子Sod2、Gpx1和Cat基因的mRNA水平显著下调（均P<0.05）。生化检测发现心肌组织中氧化损伤相关酶SOD、GPX和CAT活性显著降低（均P<0.05），而氧化应激标志物8-OHdG和MDA水平显著增加（均P<0.05）。结论 SHJH^hr小鼠心脏出现早衰现象，可能与心肌组织氧化应激损伤有关。

摘要: 实验动物在高校进行的科学研究和实验教学中具有重要地位，是顺利开展相关研究和教学工作必不可少的支撑条件。高校开展生命科学、医学、药学、化学、生物医学工程等学科的科研和教学工作，都离不开动物实验。规范化运行的实验动物屏障环境设施（barrier environmental facility for laboratory animal）是保障动物实验结果稳定、科学和可靠的重要平台。加强实验动物屏障设施准入的科学管理，是保障实验动物屏障设施规范化运行、控制实验动物质量和稳定性、避免实验动物和工作人员遭受病原微生物污染，甚至避免暴发人兽共患病等生物安全事故的重要防线。本文以南京大学仙林校区2019年开始运行的3个实验大鼠、小鼠小型实验动物屏障设施为例，针对屏障设施的安全准入管理体系，根据近5年来实验动物屏障设施运行的实际情况，并结合这些年在不断探索和优化其准入管理体系过程中的经验，从管理制度建设和标准操作规程（standard operating procedure）制订与执行角度出发，探讨了以下5个方面：屏障设施人员、动物、物品和仪器设备准入管理，以及屏障系统空气进出控制管理；同时，对这5个方面进行了全面系统地梳理、总结，以期能为学校动物实验平台的建设和管理起到有益的借鉴作用，并对后续开展科学研究、保障公共卫生安全和确保实验人员健康提供支持。