摘要: 炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）是一类由遗传、免疫、环境等多因素共同驱动的慢性复发性肠道疾病，主要包括溃疡性结肠炎（ulcerative colitis）和克罗恩病（Crohn's disease） 2种类型。当前的IBD疾病研究中，小鼠与斑马鱼是最常用的实验动物。其中，斑马鱼凭借其独特优势成为理想模型。相较于啮齿类动物，斑马鱼具有生长周期短、繁殖能力强、体型小巧及胚胎透明等特点，不仅便于动态追踪连续性病理变化，还能高效实现高通量药物筛选。斑马鱼的基因与人类同源性达70%以上，肠道细胞组成及发育过程与人类高度相似，且其肠道菌群与人类肠道微生态特征接近，为研究肠道菌群与IBD的关联奠定了良好基础。随着生物技术的发展，基于化学诱导和基因工程构建的斑马鱼IBD模型，可精准模拟人类IBD的核心病理特征，如肠壁增厚、炎性细胞浸润、促炎因子表达升高等，该模型在揭示发病机制和开发靶向药物中发挥了关键作用。本文首先阐述斑马鱼的肠道特征及IBD模型特点，进而从遗传、免疫、环境与饮食、感染等维度深入剖析其在IBD发病机制研究中的应用，同时综述其在抗炎药物、益生菌、中药等治疗药物开发中的研究进展，旨在为科研工作者在临床前研究的各阶段合理运用斑马鱼模型提供参考，以推动IBD基础研究领域的深入发展，并期望能加速该领域的突破。

摘要: 目的 拟从鳞状皮屑裸小鼠的皮肤上分离病原菌，并进行病原鉴定、溯源分析和致病性研究，以期为鳞状皮屑裸小鼠的病原体诊断提供新的思路。方法 对1只患鳞状皮屑皮肤病的裸小鼠的皮肤进行拭子采样，通过核酸检测、细菌分离培养、生化鉴定、16S rDNA基因扩增测序、全基因组测序构建系统进化树等方法鉴定菌株。然后取15只BALB/c裸小鼠，随机分为涂擦生理盐水的对照组、涂擦1.8×10～8 CFU/mL分离病菌液的高浓度组和涂擦1.8×10～7 CFU/mL分离病菌液的低浓度组，通过动物感染试验及HE染色观察皮肤组织病理学变化，进行该菌株的致病性分析。结果 送检裸小鼠的皮肤拭子样本中牛棒状杆菌核酸阴性，排除了牛棒状杆菌的感染。进一步分离培养的病原菌经高盐甘露醇琼脂平板和血琼脂平板培养以及革兰染色提示为革兰阳性葡萄球菌。16S rDNA测序和全自动微生物鉴定系统鉴定结果显示，该菌株为木糖葡萄球菌。全基因组测序后的系统进化树分析显示，该菌株与韩国叶菜分离株（GenBank GCA＿00207825.1）的亲缘关系最近。动物感染试验显示，高浓度和低浓度分离菌液分别感染17 d和20 d时裸小鼠头颈部和背部开始出现鳞状皮屑，之后逐渐扩散至其他部位；而且两组的皮屑症状均表现为一过性，分别持续7 d和3 d皮屑消失；高浓度组和低浓度组的感染率均为33.33%。与对照组相比，感染后的裸小鼠皮肤组织病理学观察未发现明显异常，提示该菌株对裸小鼠的致病力存在明显的个体差异。结论 从患鳞状皮屑裸小鼠皮肤上分离鉴定出1株木糖葡萄球菌菌株。该菌株是一种机会性感染病原体，临床表现为一过性的鳞状皮屑症状，组织病理学并未发生明显改变，并且裸小鼠对该菌株的敏感性存在个体差异。本研究结果为免疫缺陷小鼠或基因敲除小鼠的病原体诊断提供了数据支撑。

摘要: 目的 通过对青春期前小鼠进行来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理，构建小鼠多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）模型，比较模型小鼠与安慰剂对照小鼠的肝脏转录组差异，以探索PCOS发病过程中肝脏的作用机制。方法 定制剂量为2 mg的来曲唑缓释片，缓释周期为40 d。分别将对照安慰剂缓释片和来曲唑缓释片包埋在3～4周龄的C57BL/6J小鼠颈后皮下，每组8只，构建对照组及来曲唑诱导的PCOS模型，并在包埋次日给予小鼠高脂饮食处理。造模周期5周，每周监测每组小鼠的体重和24 h进食量。收样时记录小鼠肝脏重量，通过HE染色观察小鼠卵巢和肝脏组织病理变化，通过油红O染色观察肝脏脂质沉积水平，通过F4/80免疫组织化学染色观察肝脏巨噬细胞浸润程度，通过Masson染色观察肝脏纤维化水平；通过转录组学测序技术分析对照组和模型组小鼠肝脏组织中基因表达的差异，并对显著差异表达的基因进行富集分析；通过实时荧光定量PCR验证两组小鼠肝脏组织中显著差异表达的基因。结果 与对照组相比，来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理后的模型组小鼠体重显著增加（P<0.001），卵巢的多囊样表型显著，肝重比显著下降（P<0.05），但小鼠的肝脏重量、肝组织形态和脂质沉积没有显著影响（P>0.05）。转录组学测序发现，来曲唑处理后小鼠肝脏中有119个上调、217个下调的差异表达基因，广泛参与胆固醇和类固醇合成、类固醇激素合成及炎症反应相关通路。荧光定量PCR结果显示，与对照组相比，模型组小鼠肝脏的HSD3B2和HMGCR基因的mRNA表达上调（P<0.01）,IL4、CCL2和COL1A1基因的mRNA表达下调（P<0.05）。但Masson染色与F4/80免疫组织化学染色未见肝脏纤维化水平与巨噬细胞浸润程度的显著改变。结论 来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理可以成功构建小鼠PCOS模型。模型小鼠肝脏中基因表达变化显著，可能通过调控胆固醇和类固醇代谢，参与PCOS的发病机制。

摘要: 类器官共培养模型（organoid co-culture model）作为一种重现三维微环境以研究细胞间相互作用的新型工具，近年来在生物医学研究中展现了显著的应用潜力。该模型通过模拟体内组织的微环境，能够为研究细胞间复杂互动提供更为精准的实验平台，尤其在肿瘤免疫逃逸机制、药物敏感性测试、神经退行性疾病的病理特征揭示等方面具有重要价值。然而，类器官共培养模型在标准化操作、规模化培养、伦理规范和未来发展方向等方面仍面临诸多挑战，特别是在实验动物学领域，如何有效地将类器官与传统实验动物模型相结合，以及如何在不同研究需求中选择合适的模型并探索其替代潜能，仍是当前亟待解决的问题。在伦理审批和动物实验替代方面，类器官共培养模型提供了一种更加符合“替代、减少、优化（replacement,reduction,refinement,3R）”原则的实验方案，可能成为替代传统实验动物模型的重要工具。为此，本文回顾了该领域的最新进展与面临的关键挑战，详细描述了类器官共培养模型的构建方法，并阐述了其在发病机制研究和药物筛选中的应用。文章还系统比较了类器官共培养模型与传统实验动物模型的差异，探讨了二者在具体应用场景中的选择依据。此外，本文讨论了类器官共培养模型在实验动物替代中的潜在价值，并展望了该技术未来的发展趋势。通过这些讨论，本文旨在推动类器官共培养技术的创新与发展，并为未来相关研究提供新的视角和科学依据。

摘要: 目的 探究登革病毒（dengue virus,DENV）对树鼩不同组织来源细胞的易感性及感染特征，为扩充DENV的树鼩易感细胞库提供依据。方法 将DENV以感染复数（multiplicity of infection,MOI）为0.02的剂量分别接种于树鼩皮肤成纤维细胞（tree shrew skin fibroblasts,TSFs）、原代树鼩肾上皮细胞（primary tree shrew renal epithelial cells,p TRECs）、树鼩主动脉内皮细胞（tree shrew aortic endothelial cells,TAECs）、树鼩主动脉平滑肌细胞（tree shrew aortic smooth muscle cells,TASMCs）、树鼩肝细胞（tree shrew hepatocytes,THs）、树鼩角膜基质细胞（tree shrew corneal stromal cells,TCSCs）、树鼩脑微血管内皮细胞（tree shrew brain microvascular endothelial cells,TBMECs）及树鼩视网膜微血管内皮细胞（tree shrew retinal microvascular endothelial cells,TRMECs），用常规培养DENV的C6/36、Vero、A549及BHK-21细胞系作为阳性对照。在感染病毒后6 d内，每12 h用倒置显微镜观察各种细胞的病变效应，用实时荧光定量PCR检测细胞培养物中病毒核酸载量，绘制病毒增殖曲线，用噬斑实验检测病毒滴度。结果 除TRMECs外，DENV对7种树鼩细胞均易感。随着感染时间的延长，7种树鼩细胞均出现变圆、脱落、坏死及裂解等明显的病变效应。在pTRECs、TBMECs、TASMCs、TAECs和THs这5种树鼩细胞的培养裂解物中检测到的病毒核酸载量与4种阳性对照细胞接近，大于4×10～7拷贝/μL。以上5种树鼩细胞均能产生感染性子代病毒，其中3种树鼩细胞TAECs (3.13×10⁵PFU/m L)、THs(2.03×10⁵PFU/m L)、p TRECs （1.58×10～5 PFU/m L）中的DENV滴度较接近阳性对照细胞C6/36 （3.85×10～5 PFU/m L），且能更早收获病毒。结论 DENV对树鼩多种组织来源的细胞易感，且病毒增殖速度快于常见其他物种来源的传代细胞系，其中TAECs、THs和p TRECs尤其适于DENV增殖培养。同时，这些细胞可能参与DENV在树鼩体内的感染。

摘要: 岁序更替，华章日新。回顾2024年，本刊出版工作稳扎稳打，保质保量地完成了全年6期超700页的出版任务。为了提升读者的阅读体验，本刊改用了视觉友好型的王子双胶本白书纸，让学术知识的传递更加舒适宜人。同时，新辟了实验动物学专家主笔的“科普讲坛”专栏，每期1篇，旨在打破实验动物科学与生物医学等其他学科之间的专业壁垒，让更广泛的交叉学科研究人员甚至大众了解实验动物与比较医学的发展历史和专业特点，更好地理解动物实验伦理和福利要求。为进一步提升期刊的学术引领力，本刊在不断完善编辑部初审、同行专家外审、主编及常务编委终审的三审机制基础上，继续加强约稿、组稿力度，推出了多篇具有较高行业影响力的优秀文献，包括：填补国内空白的中国首部神经疾病动物模型指南《自发性脑出血动物模型选择及临床前药物试验指南（2024年版）》，为神经疾病动物模型的研究和应用提供了权威的指导和规范；瞄准行业热点及难点的《中国实验猴产业的历史、现状、挑战与机遇》，引起了国内实验动物资源及科技产业工作者的广泛思考和积极讨论；借鉴国际指南ARRIVE、符合中国国情及相关法规标准的国内首份《动物实验与比较医学研究论文出版规范清单（2024年版）》，旨在进一步规范中国动物实验与比较医学研究论文的质量标准和出版流程，促进科技及期刊的高质量发展和国际交流。

摘要: 目的 运用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱（ultra-high-performance liquid chromatography coupled with quadrupole electrostatic field orbital trap-mass spectrometry,UHPLC-QE-MS）非靶向代谢组学分析法探讨不同海拔高原鼠兔肾脏低氧适应性代谢变化的潜在机制。方法 捕捉青海省果洛藏族自治州玛多县星宿海地区海拔4 360 m (MD组)和青海省海北藏族自治州门源地区海拔2 900 m (MY组)处的高原鼠兔各10只，经麻醉后采集血清样本，经安死术后采集肾脏样本，分别进行一般生理生化指标测定和代谢组学分析。其中一部分血清样本用于血液学分析，另一部分用于血气分析，剩余部分检测生化指标。肾组织样本中代谢物提取后，进行UHPLC-QE-MS分析，运用代谢组学主成分分析（principal component analysis,PCA）和正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA）方法分析差异代谢物，筛选标准为变量投影重要度（variable Importance in the projection,VIP）>1.5且倍数变化（fold change,FC）>1.5或VIP>1.5且FC<1/1.5。利用相关性分析热力图、差异显著性分析火山图、信号通路识别气泡图和矩形图分别分析差异代谢物及相关信号通路。结果 MD组高原鼠兔的红细胞计数、葡萄糖、尿素氮、尿酸和同型半胱氨酸含量高于MY组，而血红蛋白、血细胞比容、肌酐和二氧化碳结合力低于MY组，这表明不同海拔的高原鼠兔血液携氧能力存在明显差异。经主成分模式识别分析和OPLS-DA置换检验显示，MD组和MY组高原鼠兔肾脏代谢物具有明显的聚类型分布（R2Y=0.930,Q2=0.655）。按照筛选标准，并经数据库比对发现，不同海拔高原鼠兔的肾脏代谢物差异分子有46个，其中MD组高原鼠兔的蟾蜍二烯羟酸内酯、腺苷、腺嘌呤、薯蓣皂苷、盐酸小檗碱、鼠尾草酚和虾青素表达水平均显著升高（VIP>1.5,P<0.05），花生四烯酸、组胺和香豆素水平显著下降（VIP>1.5,P<0.05）。相关信号通路分析显示，缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成通路具有最大影响因子（P<0.05），而泛酸盐和辅酶A生物合成通路呈现最显著富集（P<0.05）。结论 不同海拔高原鼠兔肾脏差异代谢物氨基酸、泛酸盐及辅酶A通路可能参与高原鼠兔高原低氧适应代谢机制。

摘要: 目的 为定位豚鼠优势性状基因筛选遗传标志，探索豚鼠酪氨酸酶（tyrosinase,TYR）、黑素皮质素1受体（melanocortin 1 receptor,MC1R）基因多态性及其mRNA表达水平与毛色表型的关系。方法 选择自主培育的普通级豚鼠57只，依据毛色分为白（22只）、花（22只）和黑（13只） 3组。腹腔注射过量戊巴比妥钠对豚鼠施行安乐死后，取背部皮肤，提取组织中DNA。通过克隆测序，检测各组豚鼠TYR、MC1R基因外显子编码序列（coding sequence,CDS）的多态性，采用实时荧光定量PCR方法检测两个基因在皮肤组织中的mRNA表达，进而探讨两基因与豚鼠毛色的关系。结果 在TYR外显子Ⅰ的CDS区域发现1个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点，其碱基A被G替换。所有白色豚鼠的TYR基因呈G/G基因型；深色（花、黑）豚鼠无G/G基因型，多数为A/A型，少数为A/G型；黑色豚鼠的A/A基因型频率高于花色豚鼠。MC1R基因外显子有2 760 bp序列缺失，标记为-基因；非缺失样本标记为N基因。大部分白色豚鼠的MC1R基因呈-/-基因型；花色豚鼠以-/N为主；黑色豚鼠以N/N为主，-/N次之。白色豚鼠的TYR基因表达水平较高，花色豚鼠较低，黑色豚鼠居中，但三者无显著性差异（P>0.05）。白色豚鼠的MC1R基因表达水平非常低，花色及黑色豚鼠均极显著高于白色豚鼠（P<0.01），黑色豚鼠又显著高于花色豚鼠（P<0.05）。结论 豚鼠TYR与MC1R基因协同调控毛色。TYR基因的G位点突变可能导致豚鼠白化，MC1R基因的N位点改变影响毛色的深浅。

摘要: 目的 通过检测肥胖型食蟹猴的一般身体指标与血糖、血脂的动态变化，探究各指标之间相关性，为肥胖食蟹猴模型研究提供参考依据。方法 选取5～17岁的正常雄性食蟹猴30只（体重指数<35 kg/m²且糖化血红蛋白含量<4.50%）和自发性肥胖雄性食蟹猴99只（体重指数≥35 kg/m²且糖化血红蛋白含量<4.50%），连续3年监测其腹围、皮脂厚度、体重、体重指数、空腹血糖、糖化血红蛋白以及血脂四项指标，并使用重复测量方差分析、简单线性回归和多元线性回归相关性分析方法分析各指标间的相关性。结果 与正常食蟹猴相比，肥胖食蟹猴的腹围、皮脂厚度、体重、体重指数和甘油三酯水平均显著升高（均P<0.05）；正常食蟹猴的皮脂厚度逐年上升，其余指标维持稳定。与第1年相比，肥胖食蟹猴第2年腹围、皮脂厚度、体重、体重指数、甘油三酯和空腹血糖水平显著升高（均P<0.05），且升高趋势在第3年持续存在（均P<0.05）。正常食蟹猴第2、3年的肥胖发生率分别为16.67%和23.33%，糖尿病的发病率均为16.67%。肥胖食蟹猴第2、3年糖尿病的发病率分别为29.29%、44.44%，其中在11～13岁群体发病率分别为36.36%、44.68%，大于13岁群体的发病率（分别为28.13%和51.35%）。相关性分析结果显示，糖尿病发病组食蟹猴的空腹血糖与年龄、腹围、皮脂厚度、体重、甘油三酯水平均显著相关（均P<0.05）。结论 长期肥胖可导致食蟹猴的一般身体指标及空腹血糖水平升高，并增加糖尿病的发病率；在肥胖引起的糖尿病食蟹猴中，其空腹血糖与年龄、体重、腹围、皮脂厚度、甘油三酯水平均高度相关，这对于预测自发性糖尿病的发生有一定意义。

摘要: 目的 利用肝螺杆菌（Helicobacter hepaticus,H.hepaticus）致维生素D受体（vitamin D receptor,VDR）缺陷小鼠肠纤维化，构建炎性肠病模型，初步探究其病理特征及发病机制。方法 用2×10～8 CFU的H.hepaticus菌液灌胃野生型和VDR^-/-雄性小鼠各5只(分别命名为WT和VDR^-/-小鼠感染组)，隔天1次，连续3次；同时设立未感染对照组，即野生型和VDR^-/-雄性小鼠各5只，灌胃等体积PBS。最后一次灌胃后第7天检测小鼠感染情况，确认感染后每周称量1次小鼠体重。于确认感染后第16周时剖检小鼠，采集并测量结肠组织长度，取粪便检测含水量；将结肠组织分成4份，一份做石蜡切片用于HE、阿尔辛蓝-过碘酸希夫（alcian blue-periodic acid Schiff,AB-PAS）、Masson和免疫组织化学染色，一份提取DNA后使用实时荧光定量PCR （real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RFQ-PCR）检测H.hepaticus定植水平以判断感染效果，一份提取RNA后采用反转录PCR （reverse transcription-PCR,RT-PCR）法检测细胞因子表达情况，另一份提取蛋白后采用蛋白质印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin,α-SMA）和白细胞介素（interleukin,IL）-33表达水平。结果 所有感染组小鼠经灌胃3次后均成功感染H.hepaticus。与VDR^-/-小鼠未感染对照组相比，VDR^-/-小鼠感染H.hepaticus 16周后体重明显减轻（P<0.05），并出现肠道出血情况，粪便含水量显著多于未感染对照组和WT小鼠感染组（P<0.05）。与WT小鼠感染组相比，VDR^-/-小鼠感染组的结肠组织经HE染色显示炎性细胞浸润，AB-PAS染色显示肠腺萎缩不规则、腺泡减少，Masson染色显示胶原面积增多。RT-PCR显示VDR^-/-小鼠感染组的结肠组织中IL-6、IL-33、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和α-SMA等炎症及纤维化相关基因的转录水平比WT小鼠感染组明显升高（P<0.000 1）；免疫组织化学法和蛋白质印迹结果显示IL-33和α-SMA蛋白表达水平也明显增多（P<0.001）。结论 VDR^-/-小鼠感染H.hepaticus后表现为更严重的炎症反应，出现黏膜炎性浸润、黏膜组织功能受损、胶原沉积等病变，提示炎性肠病模型构建成功。进一步研究发现VDR缺陷可能通过影响IL-33表达加剧了炎性肠病相关的肠纤维化进程。