摘要: 本专栏前2期的文章《无替代，何谈取消》^[1]和《非动物实验替代知多少》^[2]一同从宏观层面梳理了动物实验替代的现状、方法和适用范围，让读者系统、全面了解了动物实验替代的法规、技术等内容。本期，我们将目光聚焦于其中的一个细分领域——类器官，让读者更直观地理解类器官的含义、价值与缺陷等，从而更客观地评价这项技术。

摘要: 本刊是我国实验动物科学与比较医学领域最早的一本专业学术期刊，严格遵守国家实验动物相关法律、法规和标准，包括但不局限于《实验动物管理条例》（2017年3月1日修订版）和《实验动物福利伦理审查指南》（GB/T 35892—2018）等，同时参考借鉴国际生物医学期刊关于动物实验研究报告的相关指南共识（如ARRIVE 2.0、IGP 2012、IAVE Guidelines 2010等）。

摘要: 选用合适的实验动物安乐死方法是保障动物福利的重要环节。本刊在三审三校过程中常发现实验动物安乐死方法选用不当导致退稿的情况。现根据国家标准GB/T 39760—2021 《实验动物安乐死指南》和《2020版美国兽医协会动物安乐死指南解析》[《实验动物与比较医学》 2021, 41（3）:195-206]，针对实验动物体内研究论文中常见安乐死方法，说明如下：1.二氧化碳（CO₂）不能用于犬、猫、非人灵长类等中大型实验动物安乐死，用于啮齿类动物（断乳后）和兔（应提前麻醉）时，需注意安乐死容器内的CO₂充盈速率达标。

摘要: 椎间盘突出症是骨科的高发疾病，而作为其关键病理基础的椎间盘退行性病变（intervertebral disc degeneration,IDD）是一个以细胞外基质进行性降解、结构破坏与生物力学功能丧失为特征的复杂病理过程，不仅在人群中呈现出更高的患病率，更是导致全球人类慢性腰背痛与功能障碍的首要原因，造成了巨大的社会经济负担。尽管构建IDD动物模型对探索该疾病病理机制与推动转化研究具有重要意义，但目前关于IDD的病因与病理生理机制尚未完全阐明，且人类与常见实验动物在脊柱解剖、生物力学及退变病程上存在显著差异，加之现有的IDD动物模型繁杂多样且缺乏统一标准。因此，本指南系统梳理了啮齿类动物、非人灵长类动物以及兔、绵羊/山羊、猪、犬等不同动物的IDD模型，重点阐述三类主流模型的建模原理：诱发性模型（如纤维环/髓核/终板损伤和机械力学损伤）可控性强、周期短，适用于模拟急性损伤与快速筛选疗法；自发性模型能更好地模拟人类与年龄相关的自然退变进程；基因修饰模型则为解析特定分子通路提供了有力工具。指南深入剖析了这些模型的关键技术要点、可重复性与临床相关性，并比较其优势、局限及适用研究场景，旨在引导研究者进行“以科学问题为导向”的精准模型选择。同时，为提升研究结果的深度与可比性，本指南提出了涵盖影像学、组织学、生物化学与分子生物学、生物力学及疼痛行为学等多维度的IDD动物模型实验终点评估体系与推荐观察时间窗，并明确了贯穿实验全程的“替代、减少、优化（replacement,reduction,refinement,3Rs）”伦理原则与动物福利要求。此外，指南还展望了结合单细胞组学、多尺度力学分析及加强疼痛表型评估等未来研究方向。本指南旨在为研究者在具体科学问题与资源条件约束下，如何规范化选择与应用IDD动物模型提供一套系统化、标准化的方法学框架，以期减少研究间的异质性，提升临床前研究成果的转化效率，促进本领域的高质量发展，最终为开发延缓乃至逆转IDD的创新疗法提供坚实的科学基础。

摘要: 目的 采用两种浓度的乙醇溶液损伤构建宫腔粘连（intrauterine adhesions,IUA）小鼠模型，通过表型比较优化更稳定的IUA造模方法。方法 将20只8周龄的雌性C57BL/6N小鼠随机分为2组，即95%乙醇损伤组和50%乙醇损伤组。利用自身对照法，向左侧子宫角灌注乙醇溶液制作IUA模型，向右侧灌注生理盐水作为假手术。每组分别于造模后第7天和第15天各安乐术处死5只小鼠，摘取子宫，通过苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察子宫内膜病理变化，Masson染色观察子宫内膜纤维化程度。利用实时荧光定量PCR检测子宫组织中纤维化标志物和促炎因子的表达情况。结果 造模后第7天，与假手术侧相比，小鼠损伤侧子宫明显失去弹性，炎症浸润显著增强，且纤维化程度显著增高（P<0.05）;95%乙醇损伤组小鼠的右侧子宫内膜厚度显著下降（P<0.05），而50%乙醇损伤组小鼠的右侧内膜厚度无明显改变（P>0.05）;50%乙醇损伤组的右侧子宫组织纤维化标志分子Ⅳ型胶原α1链（collagen typeⅣalpha 1 chain,Col4A1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)，以及促炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达水平均显著升高（P<0.05），而95%乙醇损伤组的右侧子宫组织相同指标虽有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。造模后第15天，与假手术侧相比，两个乙醇损伤组的子宫组织病理学变化均不明显；50%乙醇损伤组子宫组织中Col4A1、TGF-β、TNF-α和IL-1β的表达水平仍显著升高（P<0.05），而95%乙醇损伤组子宫组织仅IL-1β显著升高（P<0.05）。结论 向子宫角灌注95%乙醇溶液制作IUA小鼠模型的子宫组织病理学改变比50%乙醇损伤组明显，适合进行组织病理学研究。但灌注50%乙醇溶液后小鼠子宫组织中纤维化标志物和促炎因子表达水平升高较95%乙醇损伤组更明显，提示50%乙醇溶液构建的IUA小鼠模型更适合分子病理学研究。

摘要: 目的 为保证研究数据的可靠性，建立SD大鼠90 d喂养试验的背景数据。方法 汇总2020—2023年国家药物安全评价监测中心的6个独立的SD大鼠90 d喂养试验中空白对照组动物（120只SPF级4周龄SD大鼠，雌雄各半，仅给予普通鼠全价颗粒饲料）的背景数据。检疫期结束后，继续观察大鼠90 d，之后腹腔注射舒泰（50 mg/mL）麻醉、取血、处死并解剖。通过分析空白对照组数据，建立SD大鼠相关背景数据库。结果 雄性和雌性大鼠的平均体重均稳步增长，雄性大鼠体重增长幅度更为明显。90 d内雄性和雌性大鼠平均体重分别增长至500 g和300 g以上。3周后，雄性大鼠每日平均摄食量基本稳定在25～28 g/只，雌性大鼠每日平均摄食量基本稳定在16～19 g/只。所有动物的食物利用率自实验第1周开始逐渐下降。白细胞分类计数结果中，雌性与雄性白细胞（white blood cell,WBC）、中性粒细胞（neutrophil,Neut）、淋巴细胞（lymphocyte,Lymph）、单核细胞（monocyte,Mono）的数值差异有统计学意义（P<0.001），但中性粒细胞百分率（neutrophil percentage,%Neut）、淋巴细胞百分率（lymphocyte percentage,%Lymph）、单核细胞百分率（monocyte percentage,%Mono）两性别之间差异无统计学意义（P >0.05）。雄性动物的平均红细胞数（red blood cell count,RBC）、血红蛋白浓度（hemoglobin,HGB）、红细胞比容（hematocrit,HCT）、血小板数（platelet count,PLT）、凝血酶原时间（prothrombin time,PT）和活化部分凝血激酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）高于雌性（P<0.05）。雄性大鼠平均丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、肌酸磷酸激酶（creatine phosphokinase,CK）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、葡萄糖（glucose,GLU）、甘油三酯（triglyceride,TG）数值显著高于雌性（P<0.05）。雄性动物的尿pH值在5.0～8.5，雌性动物尿pH值在6.5～9.0。绝大多数雄性动物的尿比重低于1.020，绝大多数雌性动物的尿比重低于1.015。雄性动物各脏器（肾上腺、生殖器官除外）质量均高于雌性（P<0.001），而雌性动物的脏体比（肾脏、生殖器官除外）高于雄性（P<0.001）。结论 总结国家药物安全评价监测中心6项90 d喂养试验中未给药对照组SPF级SD大鼠的体重、摄食量、血液学、血清生化各项指标的背景参考值范围，可为相关研究提供重要的参考数据。梳理大鼠背景性和自发性的组织病理学改变，有助于后续研究的规范化和标准化，以及对异常结果的评判分析。

摘要: 目的 探讨活体探头式激光共聚焦成像（probe-based confocal laser endomicroscopy,pCLE）技术在快速检测与评估小鼠消化道组织形态特征中的应用价值。方法 将12只6周龄的SPF级雄性昆明小鼠随机分为两组，其中6只使用乙醇体积分数为52%的红星牌二锅头白酒进行灌胃造模，另外6只使用生理盐水灌胃作为对照。连续灌胃28 d后，每组随机选取3只，经3%异氟烷吸入深度麻醉后颈椎脱臼处死，即刻剖取胃、十二指肠、空肠和直肠组织，浸入1%荧光素钠溶液染色，采用pCLE技术观察各组织黏膜表面的微观结构。剩余模型组和对照组小鼠经3%异氟烷吸入深度麻醉后，先后使用生理盐水、4%多聚甲醛溶液进行心脏灌流，剪取胃、十二指肠、空肠及直肠各组织进行脱水、切片和苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色，于光学显微镜下观察各节段组织的形态学变化。结果 pCLE观察显示，对照组小鼠消化道黏膜组织表面荧光染色均匀，胃小凹、肠绒毛及肠隐窝形状完整，排列紧密，边缘结构清晰；而模型组小鼠消化道黏膜发生肿胀和变形，并伴有荧光染色不均匀和荧光素渗漏的现象。此外，部分组织出现缺损或细胞脱落，相邻特征结构（如胃小凹、肠隐窝）之间的边界模糊。HE染色观察显示，对照组小鼠消化道组织结构正常，细胞排列整齐、无缺损，黏膜下腺体大小一致且无增生性改变，无明显炎性细胞浸润；而模型组小鼠部分消化道组织结构缺损，细胞排列紊乱稀疏，黏膜下腺体萎缩，并伴有明显的炎性细胞浸润。pCLE观察结果与HE染色的组织学特征一致。结论 pCLE能够实现对消化道黏膜结构特征的快速、实时、大范围、高分辨率显微成像，并且能更真实、全面地展示其生理及微观结构特征，该技术在小动物消化系统损伤的组织学评估研究中显示出良好的应用前景和实际应用价值。

摘要: 实验动物是医学研究的“活”工具，通过动物实验可以不断认识生命规律、揭示疾病本质、发现防治疾病的疫苗和药物，为人类相关领域的科技发展发挥重要作用。实验动物所处的环境条件，对动物的健康和质量，以及对动物实验结果，有直接的影响。对环境条件控制程度越高，实验结果就越具有质量上的保证。因此，实验动物设施环境控制是保障实验动物享有所需环境条件及有效开展动物实验的重要一环。本文通过分析四川省内实验动物设施环境检测的现状，简要梳理了四川省内实验动物设施的数量、设施面积等基本情况，详细统计了四川省内各检测机构开展实验动物设施环境检测的能力，结合国家标准、主管部门要求及实验动物设施使用单位的质量控制需要，总结了实验动物设施环境的检测要求。在实验动物设施检测指标的分析中，从四川省40家实验动物设施屏障环境的检测数据可得出，静压差是最容易出现不合格情况的检测指标，其次是照度和换气次数。同时，本文以屏障环境为例，总结出实验动物设施环境检测过程中的检测人员、检测仪器、检测方法、技术材料、检测环境、检测报告6个方面的常见问题并提出针对性建议。以上建议有助于更好地控制实验动物设施的环境，为行业内相关检测机构、实验动物生产和使用单位提供经验借鉴与参考。

摘要: 动物实验是生命科学与医学研究的重要环节，但单一动物实验研究因样本量小、设计异质性高、重复性差等固有局限，其结果的外推性与可靠性常受到质疑，从而影响了研究成果向临床的有效转化。系统评价（systematic reviews,SR）和Meta分析（meta-analysis）是整合现有研究证据、提升结论稳健性的关键方法。然而，目前应用于动物实验领域的SR和Meta分析在实施过程与报告撰写上尚缺乏统一规范，导致其研究质量参差不齐，在一定程度上削弱了其证据价值。为解决此问题，本文系统梳理了动物实验SR与Meta分析的报告撰写流程，并提出一套兼顾科学性与实用性的规范化建议。文章内容覆盖了从研究前期准备[包括构建PICO （population,intervention,comparison and outcome）问题、评估可行性与方案预注册]到报告主体各部分的撰写要点。在核心的方法学章节，本文详细论述了如何基于PRISMA （Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-analysis）声明，并结合ARRIVE指南（Animal Research:Reporting of in Vivo Experiments）、SYRCLE（Systematic Review Centre for Laboratory Animal Experimentation）动物实验风险评估工具等相关指南与工具，具体实施文献检索、纳入和排除标准制定、数据提取与偏倚风险评估等环节。对于结果呈现，文章提出了借助流程图与特征表进行清晰、透明化展示的策略。在讨论部分，本文重点探讨了如何科学解读合并效应、深入分析异质性来源和评估发表偏倚影响，并审慎论述动物实验结果向临床外推的有效性与局限性。此外，本文还建议引入GRADE （Grading of Recommendations Assessment,Development and Evaluation）方法对最终的证据质量进行综合分级。本文对报告撰写全流程进行了模块化解析，期望为相关领域研究者提供一份清晰、可行的实践指南，以促进动物实验SR和Meta分析的规范化发展，提升其在科研决策与转化医学中的应用价值。

摘要: 本栏目上期文章《无替代，何谈取消》^[1]已从宏观层面梳理了动物实验的替代现状。本篇进一步阐述现阶段已获得国际认可的非动物实验替代方法及其适用范围。1非动物实验替代概述近年来，美国食品药品监督管理局（Food and Drug Administration,FDA）相继出台《FDA现代化法案2.0》（The FDA Modernization Act 2.0）及多项旨在推动动物实验替代的激进政策^[2]。例如，新任FDA局长马蒂·马卡里（Marty Makary）提出在单克隆抗体药物研发中，优先采用非动物实验策略，并启动“逐步取消强制性动物试验”路线图^[3]。与此同时，随着计算机模拟、类器官培养、器官芯片、人工智能或机器学习等新兴技术的快速迭代，“去动物化”研发前景备受媒体与普通公众关注^[4]。在这一时期，不少普通公众乃至部分科学界、医药界、实验动物产业界等相关领域的人士对“动物实验即将被全面替代”抱有乐观预期。