摘要: 【目的】本研究旨在明确中国梨木虱Cocapsylla chinensis成虫交配行为及昼夜节律变化，为深入研究该虫的两性通讯机制和诱杀技术提供理论依据。【方法】在陕西杨凌酥梨园调查中国梨木虱冬型成虫田间交配活动基础上，在室内条件下[温度(25±1)℃、光周期14L∶10D],观察单头配对夏型和冬型成虫交配行为，包括交配次数和时长的昼夜节律。【结果】中国梨木虱在交配过程中，雄虫主动向雌虫求偶，交配时雌雄体躯朝同一方向平行或重叠排列。两性交配主要发生于光期，而暗期则常在寄主植物上静息，表现出明显的昼夜节律性。在观察光期的单头配对成虫时发现，夏型成虫3日龄达到交配高峰，至7日龄所观察个体中有94.0%发生了交配行为；而初羽化冬型成虫移入温度(25±1)℃,光周期14L∶10D条件下，从5日龄开始展现交配行为，7-9日龄达到高峰，至9日龄所观察个体中有84.0%发生了交配行为。夏型和冬型成虫的平均交配次数分别为3.26±0.33和4.12±0.37,平均交配时长分别为(20.32±1.25)和(48.36±1.38) min/次。两型之间的交配次数无显著差异，但冬型成虫的交配时长显著大于夏型成虫的。交配次数和时长分析表明，夏型成虫的交配次数以1～2次为主(占50.0%),交配时长主要在10～30 min/次(占67.5%),而冬型成虫的交配次数以1～3次为主(占52.0%),交配时长主要在30～60 min/次(占63.2%)。【结论】上述结果表明，中国梨木虱单头配对成虫存在复交配现象，其交配活动表现出明显的昼夜节律性，在相同条件下冬型成虫的交配次数和时长较大于夏型成虫。

摘要: 【目的】针对全球重要果蔬害虫橘小实蝇Bactrocera dorsalis,基于雄性引诱剂的雄性歼灭技术(male annihilation technique, MAT)已被广泛应用，其中甲基丁香酚(methyl eugenol, ME)作为核心引诱剂，对雄虫表现出高效的引诱作用。然而，现有技术主要针对雄虫，雌虫对ME的行为反应及其嗅觉感知能力尚不明确，成为限制以ME为基础的雌性引诱剂全面优化的瓶颈。因此，本研究旨在系统揭示橘小实蝇雌成虫对ME的行为反应及嗅觉感知能力，探索ME在橘小实蝇雌虫中的潜在生物学作用，为优化应用ME的雌虫防控策略提供新的研究思路。【方法】为明确橘小实蝇雌成虫对ME的行为反应和感知能力，选择生理状态活跃的12日龄雌雄成虫作为试虫，首先利用嗅觉陷阱实验与四臂嗅觉仪实验测试了橘小实蝇雌雄成虫对剂量为1 000和100μg的ME以及具有类似诱雄功能的2-烯丙基-4,5-二甲氧基苯酚(2-allyl-4,5-dimethoxy phenol, DMP)的趋向行为，对剂量为1 000μg ME和DMP的取食行为；其次利用触角电位(electroantennogram, EAG)反应实验测定剂量为0.1,1,10和100μg的ME和DMP引起的橘小实蝇雌雄成虫的EAG反应；最后利用单感器技术(single sensillum recording, SSR)记录了橘小实蝇雌雄成虫触角上锥形感器对ME和DMP的SSR反应。【结果】行为学测试结果表明，橘小实蝇雌成虫未对ME和DMP表现出明显的趋向行为或取食倾向，而雄成虫表现强烈的行为反应。然而，EAG实验则显示，橘小实蝇雌成虫与雄成虫类似，对ME和DMP均产生了显著的嗅觉响应；进一步的SSR实验发现，橘小实蝇雌成虫具有与雄成虫类似的嗅觉感器，负责ME和DMP的感知。【结论】本研究结果提示，橘小实蝇雌成虫具备与雄成虫类似的ME嗅觉感知机制，但ME对雌成虫的行为的影响不同于对雄成虫的诱集功能，ME对雌成虫可能具有其他潜在的生物学作用。这些结果为深入理解橘小实蝇对ME的感知与行为反应提供了新的实验依据，同时为改良雌虫行为调控技术提供了理论参考。

摘要: 【目的】构建高效“菌-生物炭-黑水虻Hermetia illucens互作”转化体系，探究基质配比、黑水虻幼虫接入密度、生物炭、功能微生物等因素组合策略对黑水虻转化金霉素菌渣体系的影响。【方法】黑水虻幼虫由麦麸饲养至3龄后，分别设置不同质量配比的金霉素菌渣与小麦秸秆接入比(菌渣∶秸秆=0∶1, 1∶2, 1∶4, 1∶8, 1∶12和1∶20)、幼虫密度(幼虫数量：物料质量=0.6∶1, 0.8∶1, 1∶1, 2∶1, 4∶1, 6∶1, 8∶1和10∶1)、生物炭接入量(0, 30, 60, 90, 120, 150和180 g/kg)、功能菌(斯氏普罗威登斯菌Providencia stuartii TX2、肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae TX1、贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis EEAM 10B)以及混合添加组别，测定不同组别中黑水虻幼虫的生长发育标(体重、体长和体宽),基质转化指标(基质消耗率和基质转化率)及基质中的金霉素去除率。【结果】在最优“菌-生物炭-黑水虻互作”菌渣转化体系下，即菌渣∶秸秆为1∶4、幼虫密度为4∶1、生物炭添加比例为120 g/kg、存在斯氏普罗威登斯菌TX2时，幼虫的体重、体长、体宽分别达到0.17 g/头、18.27 mm和4.83 mm,基质消耗率和基质转化率分别达到34.04%和29.50%,同时基质中的金霉素去除率提高至96.23%。【结论】通过构建“菌-生物炭-黑水虻互作”高效抗生素菌渣生物转化体系，将两种有机固废物转化成高值昆虫蛋白，同时提高了基质中金霉素去除率。

摘要: 【目的】本研究旨在探究毒死蜱对白背飞虱Sogatella furcifera的亚致死效应，为合理使用杀虫剂防治白背飞虱提供理论依据。【方法】采用稻茎浸渍法分别以LC₁₀浓度（1.5 mg/L）和LC₂₅浓度（2.9 mg/L）毒死蜱处理白背飞虱3龄若虫，测定F₀代雌成虫寿命、成虫羽化率和单雌产卵量，组建F₁代年龄-龄期两性生命表来分析其发育历期、繁殖力和存活率的变化，采用RT-qPCR测定其F₀代雌成虫体内生殖相关基因（SfRheb,SfTOR,SfS6K,SfHMGR,SfIPPI,SfFPPS1,SfFPPS2,SfJHAMT,SfFAMeT,SfMet,SfKrh1和SfVg）的相对表达量。【结果】LC₁₀和LC₂₅浓度毒死蜱处理组白背飞虱F₀代成虫单雌产卵量较对照组（蒸馏水处理）显著降低，且LC₂₅浓度毒死蜱处理组F₀代成虫羽化率和雌成虫寿命均显著低于对照组的。LC₁₀和LC₂₅浓度毒死蜱处理组F₁代成虫平均单雌产卵量分别为191.4和169.9粒，均显著低于对照组的（230.6粒）; LC₂₅浓度毒死蜱胁迫白背飞虱3龄若虫较对照组能显著缩短其F₁代雌成虫历期且降低F₁代存活率。此外，LC₁₀和LC₂₅浓度毒死蜱处理白背飞虱3龄若虫能够抑制其F₀代雌成虫中保幼激素（juvenile hormone, JH）相关信号通路基因（SfFAMeT,SfFPPS1,SfFPPS2和SfKrh1）、TOR相关信号通路基因（SfRheb和SfTOR）和SfVg的表达。【结论】亚致死浓度毒死蜱胁迫会抑制白背飞虱的生长发育、存活率和繁殖力，从而在一定程度上抑制白背飞虱后代种群的增长，并且还能够抑制TOR和JH信号通路中相关基因的表达。这些发现不仅可为田间科学防治白背飞虱提供理论依据，同时为理解杀虫剂调控昆虫生殖的分子机制打下基础。

摘要: 【目的】明确韭菜迟眼蕈蚊Bradysia odoriphaga对10种杀虫剂的抗性现状及对灭蝇胺的抗性风险和灭蝇胺对韭菜迟眼蕈蚊的亚致死效应。【方法】采用胃毒触杀联合毒力法测定了5类（新烟碱类、拟除虫菊酯类、吡咯类、昆虫生长调节剂类和有机磷类）共10种杀虫剂对河南省濮阳市、安徽省亳州市、河北省唐山市及山东省济宁市4个地区韭菜迟眼蕈蚊2龄幼虫的毒力，用亚致死浓度(LC₁₅和LC₃₀)灭蝇胺处理韭菜迟眼蕈蚊观察对其幼虫历期、化蛹率、羽化率及单雌产卵量等指标的影响，评估了韭菜迟眼蕈蚊对灭蝇胺的抗性风险，并通过Tabashnik域性状分析法计算抗性现实遗传力（realized heritability,h²）和基于选择数据预测不同选择压力下的抗性发展速率。【结果】监测数据表明，韭菜迟眼蕈蚊田间种群对灭蝇胺、氟啶脲、氟铃脲和吡丙醚处于敏感至低水平抗性，对辛硫磷产生低至中等水平抗性，对高效氯氰菊酯处于低水平抗性，对吡虫啉、噻虫嗪和噻虫胺处于敏感或低至中等水平抗性。当抗性现实遗传力（h²）为0.073,在不同的选择压力下（死亡率分别为50%, 60%, 70%, 80%和90%）,韭菜迟眼蕈蚊对灭蝇胺的抗性上升至10倍分别需要25.2, 20.7, 17.2, 14.4和11.4代；采用LC₁₅和LC₃₀浓度灭蝇胺处理韭菜迟眼蕈蚊2龄幼虫后，F₀和F₁代的羽化率和单雌产卵量显著降低。【结论】韭菜迟眼蕈蚊对灭蝇胺具有较低的抗性风险，亚致死浓度灭蝇胺显著抑制韭菜迟眼蕈蚊的化蛹率、羽化率及单雌产卵量。

摘要: [目的]探究内表皮结构蛋白(endocuticle structural glycoprotein)基因TmAbd4的分子特性及在黄粉虫Tenebrio molitor内表皮形成中的作用,为筛选黄粉虫生长发育关键靶基因提供理论依据。[方法]基于黄粉虫转录组数据库获得TmAbd4 cDNA全长序列,采用生物信息学方法对功能域进行分析;采用RT-qPCR检测TmAbd4在黄粉虫13龄老熟幼虫不同组织(体壁、脂肪体、马氏管、前肠、中肠和后肠)和1-15日龄老熟幼虫体壁中的表达量;采用RNAi沉默黄粉虫13龄老熟幼虫TmAbd4后,通过伊红-苏木精染色(hematoxylin and eosin staining,H&E)观察体壁的显微结构,采用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察体壁超微结构。[结果]黄粉虫TmAbd4的cDNA序列全长506 bp,其中开放阅读框(Open reading frame,ORF)长396 bp,编码131个氨基酸;TmAbd4具信号肽和几丁质结合域(chitin binding domain4,ChtBD4),具有RR-1保守基序,属于CPR RR-1亚类;TmAbd4在体壁中特异性高表达,并在13龄老熟幼虫蜕皮后前3 d的体壁中显著高表达;与注射dsGFP的对照组相比,注射dsTmAbd4后其蜕皮至蛹期均未观察到肉眼可见的异常表型,但黄粉虫内表皮显著变薄。[结论]TmAbd4为表皮蛋白CPR家族RR-1亚类,在体壁中显著高表达且在内表皮形成时期高表达。沉默Tm.Abd4后,幼虫可正常蜕皮至蛹期,但其内表皮厚度显著变薄,表明TmAbd4参与虫体内表皮形成。

摘要: 【目的】沃尔巴克氏体Wolbachia是一类母系遗传的革兰氏阴性菌，是昆虫中最常见的胞内共生菌之一，可通过多种方式影响宿主的生殖和行为，但其影响机制还不甚清楚。本研究旨在探讨一种毒力较强的Wolbachia菌株wMelPop侵染对雄性黑腹果蝇Drosophila melanogaster肠道细菌的影响。【方法】解剖感染wMelPop的黑腹果蝇(Pop+)和未感染的黑腹果蝇(Pop-)雄成虫完整肠道，提取总DNA,利用Illumina NovaSeq平台对肠道细菌16S rDNA基因的V3-V4区进行测序，比较分析Pop+和Pop-肠道细菌的物种组成、丰度及α多样性，并通过qPCR验证表达量具有显著差异的3个属的6种肠道微生物高通量测序数据的有效性。【结果】α多样性分析显示，wMelPop侵染提高了雄性黑腹果蝇肠道细菌丰度，降低了肠道菌的多样性。Pop-肠道中，优势菌属是不动杆菌属Acinetobacter、假单胞菌属Pseudomonas、醋杆菌属Acetobacter和嗜盐单胞菌属Halomonas。与Pop-相比，Pop+肠道中假单胞菌属的相对丰度显著下调，而醋杆菌属和乳杆菌属Lactobacillus的相对丰度显著上调。qPCR验证结果显示，与Pop-相比，Pop+肠道中总细菌16S rDNA基因表达量极显著上调，Pop+肠道中番茄醋酸杆菌A.pomorum的16S rDNA基因表达量下调至Pop-的0.7倍，Pop+肠道中热带醋酸杆菌A.tropicalis的16S rDNA基因表达量比Pop-的上调约3 700倍，果状乳杆菌L.frutivorans、植物乳杆菌L.plantarum和短乳杆菌L.brevis的16S rDNA基因表达量均显著上调，其中果状乳杆菌16S rDNA基因表达量上调的倍数最高，约为Pop-的23 000倍，产碱假单胞菌P.alcaligenes的16S rDNA基因表达量下调至Pop-的0.6倍，这些结果与16S rDNA测序结果的趋势基本一致。【结论】wMelPop的侵染显著影响了雄性黑腹果蝇肠道细菌的相对丰度。其中，醋杆菌属和乳杆菌属的肠道菌载量显著升高，这可能是wMelPop感染影响昆虫宿主生殖和行为的机制之一。

摘要: 【目的】前期研究发现灰飞虱Laodelphax striatellus抗溴氰菊酯品系JH-del中CYP6AY3v2和CYP439A1v3的过量表达是灰飞虱对溴氰菊酯产生抗性的主要机制。本研究旨在阐明灰飞虱CYP6AY3v2和CYP439A1v3上调表达的机理，揭示其调控信号通路。【方法】通过定量PCR检测灰飞虱G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor, GPCR)A家族长波敏感视蛋白(long wavelength-sensitive opsin, LWO)基因LWO在灰飞虱溴氰菊酯抗性品系JH-del和敏感品系JHS 4龄若虫中的表达量；通过RNAi和盐酸布比卡因干扰灰飞虱JH-del品系3龄若虫LWO/AC/cAMP/PKA信号通路基因LWO,AC-2,AC-3,PKA-1,PKA-2和PKA-3,利用生物测定检测灰飞虱对溴氰菊酯敏感性的变化，验证LWO通过增加自身表达量激活下游AC/cAMP/PKA/CYP450s信号通路基因，介导灰飞虱对溴氰菊酯产生抗性。利用转基因果蝇Drosophila结合GAL4/UAS系统和昆虫杆状病毒表达系统分别在黑腹果蝇Drosophila melanogaster 3日龄雌成虫和草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda Sf9细胞中异源表达灰飞虱LWO并验证其功能。【结果】LWO在抗溴氰菊酯灰飞虱品系JH-del中的相对表达量是敏感品系JHS中的1.54倍；与对照组(喂食dsGFP)比，喂食目标基因dsRNA干扰灰飞虱品系JH-del 3龄若虫中LWO/AC/cAMP/PKA信号通路中的任何一个节点，该信号通路下游代谢溴氰菊酯的灰飞虱CYP6AY3v2和CYP439A1v3的表达量都显著下降，灰飞虱JH-del品系3龄若虫对溴氰菊酯的敏感性都得以恢复。将灰飞虱LWO分别在黑腹果蝇和Sf9细胞中异源表达后，黑腹果蝇和Sf9细胞对溴氰菊酯的抗性也显著提高，抗性的提高也是通过灰飞虱LWO/AC/cAMP/PKA/CYP450s信号通路介导的。【结论】LWO受体通过增加自身表达量激活下游AC/cAMP/PKA/CYP450s信号通路，介导了灰飞虱对溴氰菊酯抗性的产生，该研究结果为灰飞虱抗性的治理和杀虫剂新靶标的筛选提供了理论依据。

摘要: 【目的】二化性家蚕Bombyx mori卵在25℃下催青时，热敏瞬时受体电位锚蛋白1（TRPA1）被激活，随后可能激活一条与滞育激素（diapause hormone, DH）释放相关的未知信号通路。本研究旨在研究家蚕BmTRPA1调控DH分泌的分子机制，以及BmTRPA1与GABAergic信号通路的关系。【方法】利用CRISPR/Cas9敲除25℃下催青的家蚕BmTRPA1基因，通过转录组测序筛选野生型（WT）和BmTRPA1^-/-突变型家蚕在蛹期第3天脑-咽下神经节（brain-suboesophagealganglion, Br-SG）复合体中的差异表达基因；对差异表达基因和特异表达基因分别进行GO分类和KEGG功能富集分析；qRT-PCR检测6个差异表达基因、调控GABAergic信号通路10个关键基因和神经肽基因K5的相对表达量。【结果】WT的Br-SG复合体中有13 039个基因表达，BmTRPA1^-/-Br-SG复合体中有12 937个基因表达，其中12 484个基因在WT和BmTRPA1^-/-Br-SG复合体中共表达，有555个基因在WT中Br-SG复合体特异表达，453个基因在BmTRPA1^-/-Br-SG复合体中特异表达；相比于WT Br-SG复合体，BmTRPA1^-/-Br-SG复合体有32个基因表达上调，13个基因表达下调。这些差异表达基因主要富集在正反馈调节过程、代谢、应激和细胞调控等关键生命活动过程，其中富集于蛋白质转运过程与内分泌的差异表达蛋白GAT属于质膜GABA转运蛋白，是调控家蚕DH释放的关键蛋白。qRT-PCR检测结果显示，GAT和K5在BmTRPA1^-/-Br-SG复合体中的相对表达量与WT Br-SG复合体中的相比显著下调。【结论】本研究在组学水平上证明，敲除TRPA1将降低GAT的表达，从而调控GABAergic信号通路，减少DH释放。研究结果为后续探索家蚕响应环境温度诱导滞育发生的分子调控机制提供了靶标蛋白和数据参考。

摘要: 【目的】探究不同地理分布的柑橘木虱Diaphorina citri黄龙病菌Candidatus Liberibacter asiaticus (CLas)及其主要共生细菌沃尔巴克氏Wolbachia,Carsonella和Profftella的发生及相互作用。【方法】2022年8月-2023年8月从中国柑橘木虱分布的主要气候区采集20个柑橘木虱种群样本，利用巢式PCR技术检测各种群雌成虫黄龙病感染率；通过qPCR技术对5个黄龙病感染率较高种群测定CLas和3种共生细菌(Wolbachia,Carsonella和Profftella)的相对丰度；筛选感染与未感染黄龙病的柑橘木虱成虫转录组差异表达基因，并进行KEGG通路富集分析。【结果】柑橘木虱灵山和榕江种群雌成虫黄龙病感染率最高，感染率均达到66.67%, 7个种群(琼中、澄迈、华宁、永春、衡山、麻阳、丰城)雌成虫不感染黄龙病。海拔显著影响柑橘木虱黄龙病感染率；降水量对CLas相对丰度有显著影响；纬度、海拔和温度则对特定共生细菌相对丰度有显著影响；感染黄龙病影响共生细菌对这些环境因素的响应。相关性分析表明，黄龙病的感染会影响柑橘木虱共生细菌之间相对丰度的相关性。转录组分析发现感染黄龙病的柑橘木虱差异表达基因主要富集在过氧化物酶、碳代谢等通路，可能是造成共生细菌互作关系改变的原因。【结论】本研究表明了环境因素对柑橘木虱黄龙病菌及其主要共生细菌的影响；感染黄龙病会改变柑橘木虱共生细菌对环境因素的响应以及互作，这可能与感染黄龙病的柑橘木虱基因表达调控密切相关。这些结果对于制定地理信息驱动的黄龙病综合防控策略具有重要的参考价值。