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  • 刘苗苗; 陈桢; 常在
    实验动物科学 2025年第42卷第5期 DOI:
    关键词: B/S架构;;实验动物管理系统;;实验动物设施;;基因修饰动物;;虚拟化
    摘要: 为推动实验动物管理的信息化升级,满足实验动物全生命周期的可溯源性要求,本研究整合多种先进信息化技术,开发了一套基于B/S架构的实验动物管理系统。该系统从根本上优化了实验动物的管理方式,以科学高效的手段全面记录实验动物的个体信息及家族谱系,突破了传统实验动物设施对物理位置的依赖,为实验动物管理注入了全新的灵活性和精准性。通过该系统,研究人员可以高效处理复杂的基因修饰动物管理任务,大幅简化操作流程,将更多精力专注于科学问题的研究和创新,从而显著提升科研效率。系统功能设计完善,操作简洁便捷,兼具专业性与用户友好性,已成功应用于多家实验动物中心,成为提升实验动物管理和服务水平的重要技术支撑。

  • 周昂; 黄荣磊; 潘弈佟; 孙悦; 高巍; 袁宝; 杜崇涛
    实验动物科学 2025年第42卷第5期 DOI:
    关键词: 微生物组学;;菌群组成;;菌群多样性
    摘要: 目的 探究吉林省绵羊呼吸道和肠道菌群的组成特征及功能分析,并为实验羊模型的建立提供基础数据。方法 对200只绵羊的呼吸道和肠道样本进行菌群多样性组成谱和宏基因组测序分析。结果 揭示了绵羊的呼吸道及肠道菌群组成,及两者在菌群结构和功能方面的特点。结论 揭示了绵羊呼吸道和肠道菌群及功能,为实验羊检测标准的建立提供坚实的理论依据。

  • 李晓波; 冯育芳; 王淑菁; 王莎莎; 李威; 秦骁; 王吉; 付瑞
    实验动物科学 2025年第42卷第5期 DOI:
    关键词: 小鼠诺如病毒;;小鼠轮状病毒(乳鼠流行性腹泻病毒);;双重实时荧光定量反转录聚合酶链式反应
    摘要: 目的 建立可同时检测小鼠诺如病毒和轮状病毒的双重实时荧光RT-qPCR检测方法并对其进行方法学验证。方法 通过比对NCBI公布的小鼠诺如病毒(MNV)及小鼠轮状病毒(MRV)基因组序列,分别选取MNV VP1基因及MRV NSP5基因保守序列设计引物探针,通过优化引物及探针浓度,建立可在一次反应中同时检测小鼠诺如病毒和轮状病毒的Taqman实时荧光RT-qPCR检测方法。使用MNV及MRV的RNA标准品验证双重及单重方法的定量范围及最低检测限;MNV及MRV RNA标准品各设10~1~10~5 copies/μL等5个浓度,等体积混合形成浓度矩阵,单因素方差分析比较不同浓度的MNV及MRV之间是否会对定量结果产生干扰;对10~1,10~3,10~5 copies/μL 3个浓度的RNA标准品进行批间及批内检测,验证方法的重复性;通过检测544份小鼠粪便样品验证方法实际应用性能,同时用普通RT-PCR法检测相同的90份小鼠粪便样品,卡方检验比较两种方法结果的差异。结果 建立的双重RT-qPCR方法可在10~1~10~8 copies/μL范围实现对MNV及MRV的有效定量,标准曲线各参数均在正常范围:R<sup>2</sup>值均为0.999,斜率(MNV-3.332,MRV-3.250)、扩增效率(MNV 99.6%,MRV 103.1%)、单重法标准曲线与双重法相似,各参数值差别不大;最低检测限分别为:MNV单重及双重法均为3.125 copies/μL,MRV单重法为6.25 copies/μL,双重法为3.125 copies/μL;批内各浓度Ct值变异系数为0.63%~1.24%,批间变异系数为3.60%~5.57%;干扰实验表明低浓度标准品的检测(MNV10~1~10~3 copies/μL,MRV 10~2及10~3 copies/μL)易受到高浓度对应模板的干扰,导致所测定量值偏高;用所建立的双重RT-qPCR检测临床样品,结果MNV阳性率为1.8%(10/544),MRV未检出阳性样品。检测相同的90份小鼠粪便样品,双重实时荧光RT-qPCR检出10份MNV阳性样品,普通RT-PCR可检出8份;两种方法均可检出1份MRV阳性样品,经卡方检验两者结果无统计学差异。结论 本研究所建立的双重实时荧光RT-qPCR方法可用于实验小鼠中MNV及MRV的快速高效的常规健康监测。

  • 尚熙龙; 黄荣磊; 罗婷婷; 周昂; 孙悦; 高巍; 任文陟; 杜崇涛
    实验动物科学 2025年第42卷第5期 DOI:
    关键词: 宏基因组测序;;菌群组成;;菌群功能分析
    摘要: 目的 本研究通过对实验犬与宠物犬呼吸道和肠道样本进行宏基因组高通量测序,以期获得各自菌群组成及功能特征。方法 对13只实验犬和31只宠物犬呼吸道和肠道样本进行宏基因组高通量测序并进行相关分析。结果 实验犬与宠物犬呼吸道及肠道菌群在物种组成和功能特征上存在显著差异。结论 揭示了实验犬与宠物犬呼吸道和肠道菌群组成及功能差异,为实验动物模型优化及宠物健康管理提供微生物组学依据。

  • 牛莉娟; 黄培; 靳凯凯; 张子莫; 武晓瑄; 李媛媛; 王化磊; 张海丽
    实验动物科学 2025年第42卷第5期 DOI:
    关键词: 裂谷热病毒;;反转录重组酶介导等温扩增;;CRISPR/Cas12a;;核酸可视化检测
    摘要: 目的 针对裂谷热病毒(RVFV),建立快速可视化检测方法,为RVFV早期诊断、实验动物健康监测及疫情防控提供技术支持。方法 分析RVFV S基因保守序列,设计并筛选特异性反转录重组酶介导等温扩增(RT-RAA)引物与CRISPR/Cas12a系统的gRNA,建立RT-RAA-CRISPR/Cas12a核酸可视化检测方法;优化CRISPR/Cas12a反应体系,每个浓度设置3个平行,随后优化RT-RAA反应条件,以提高方法的检测性能;随后评价该方法的敏感性及特异性。所有实验结果均经3次重复实验验证。结果 针对RVFV S基因,建立了RT-RAA-CRISPR/Cas12a核酸可视化检测方法;通过条件优化实验确定,当Cas12a蛋白工作浓度为0.053μmol/L、gRNA工作浓度为0.075μmol/L,在39℃条件下完成30 min等温扩增、随后于37℃进行20 min检测反应时,该方法的检测性能最佳;敏感性实验结果显示,该方法可稳定检出浓度低至0.5 copies/μL的RVFV S基因重组质粒,具有高敏感性;特异性实验表明,该方法与尼帕病毒RNA、拉沙病毒重组质粒(N基因)、埃博拉病毒RNA、新布尼亚病毒RNA无交叉反应,具有强特异性。结论 本研究成功建立了RVFV RT-RAA-CRISPR/Cas12a核酸可视化检测方法,该方法具有敏感性高、操作简单等优势,有望应用于基层实验室,为RVFV早期检测提供技术支持,助力疫苗研发及疫情防控。

  • 张雨恒; 王佳权; 龚晓康; 包建
    实验动物科学 2025年第42卷第5期 DOI:
    关键词: 小鼠;;物体位置辨别测试;;学习记忆
    摘要: 目的 探索物体形状、颜色及测试间隔时间等因素对小鼠物体位置辨别测试结果的影响。方法 将90只雄性C57小鼠随机分为形状组(27只)、颜色组(27只)及测试间隔组(36只)。采用不同的物体形状、颜色及测试间隔时间等因素检测各组小鼠物体位置辨别指数。结果 在不同物体形状测试中,小鼠对方形物体的辨别指数最高(P<0.05);在不同物体颜色测试中,不同颜色的物体辨别指数没有差异;在不同间隔时间测试中,间隔10 min和1 h测试的辨别指数较高(P<0.05)。结论 对于雄性C57小鼠,测试物体的形状以及间隔时间对物体辨别测试结果有影响,选取方形物体以及间隔1 h测试的物体位置辨别指数较高。

  • 董浩; 魏杰; 左琴; 张乐颖; 董青花; 巩薇; 梁春南; 王洪
    实验动物科学 2025年第42卷第5期 DOI:
    关键词: ICR小鼠;;遗传质量;;微卫星DNA;;封闭群
    摘要: 目的 利用微卫星检测法对国家啮齿类实验动物资源库的ICR小鼠种群的遗传质量进行检测分析。方法提取30只小鼠的基因组DNA,根据团体标准《实验动物小鼠、大鼠微卫星DNA标记检测方法》,选用覆盖小鼠所有染色体的20对微卫星位点的引物进行PCR扩增,对扩增产物进行测序分析,计算等位基因数、杂合度和多态信息含量等参数。结果 ICR小鼠的20个微卫星位点的平均等位基因数为4.15个,平均杂合度为0.502,平均多态信息含量为0.456。结论 国家啮齿类实验动物资源库保藏的ICR小鼠种群的遗传多样性较好,符合国家标准中规定的封闭群小鼠遗传质量要求。

  • 方茜; 梁锦宁; 温莎; 李春宏
    实验动物科学 2025年第42卷第5期 DOI:
    关键词: 树鼩;;沙门菌;;耐药性
    摘要: 目的 了解树鼩源沙门菌的药物敏感性及所携带耐药基因的情况。方法 通过对树鼩肠道内容物中沙门菌的分离纯化、生化分析和K-B药敏实验对细菌进行鉴定,并应用PCR技术对所分离到的菌株进行耐药基因的检测。结果 经病原学鉴定,确定所分离的菌株为沙门菌。药敏实验结果表明,分离株对青霉素、强力霉素、米诺环素、红霉素、四环素、苯唑西林6种抗生素产生耐药性,同时检测出喹诺酮qnrS,四环素tetA、tetB,β-内酰胺类TEM、SHV 5种耐药基因。结论 本研究所分离出的树鼩源沙门菌,携带有多种耐药基因,并对部分抗生素耐药。

  • 王鑫鑫; 孙云飞; 李方正; 尹燕博; 王建琳
    实验动物科学 2025年第42卷第5期 DOI:
    关键词: 比格犬;;血常规指标;;年龄;;性别
    摘要: 目的 探讨年龄和性别对比格犬基础血液指标的影响。方法 采集育成期(6~8月)、青年期(2~3岁)、成年期(4~5岁)和老年期(8~9岁)不同性别比格犬的血液,利用血细胞分析仪测定血液中白细胞、红细胞数量,血红蛋白含量,红细胞压积,平均红细胞体积,红细胞体积分布宽度,平均红细胞血红蛋白量和红细胞沉降率等常规指标,并对测定结果进行统计分析。结果 6~8月龄雌性比格犬血液中淋巴细胞数量显著高于雄性比格犬和8~9岁雌性比格犬(P<0.05),红细胞数量和血红蛋白含量显著低于4~5岁雄性比格犬(P<0.05),红细胞沉降率显著低于4~5岁和8~9岁雌性比格犬(P<0.05);2~3岁青年比格犬血液中血小板数量最低,红细胞沉降率显著低于4~5岁和8~9岁雌性比格犬(P<0.05),但略高于6~8月龄比格犬;4~5岁雄性比格犬红细胞数和血红蛋白含量均显著高于6~8月龄雌性比格犬和8~9岁雌性比格犬(P<0.05),红细胞沉降率显著低于4~5岁和8~9岁雌性比格犬(P<0.05),但略高于6~8月龄同性比格犬;其余指标无明显差异。结论 青年比格犬用作实验动物可不考虑血常规指标的影响;育成比格犬做动物模型时需要注意红细胞、血小板和红细胞沉降率的影响;老年比格犬由于白细胞数量较少,可用于特定疾病的研究,但需注意高红细胞沉降率的影响。

  • 刘巍; 马丽颖
    实验动物科学 2025年第42卷第5期 DOI:
    关键词: 换笼站;;过敏原;;职业健康;;设备采购;;技术参数;;性能确认
    摘要: 目的 通过归纳和梳理2013年至2023年中国政府采购网采购换笼站的情况,分析换笼站产品采购趋势和重要技术参数,为换笼站采购及验收提供依据。方法 将采购数据按逐年采购项目数量、采购设备数量、金额、品牌及国别、换笼站类型等条目使用EXCEL进行分类统计、总结。结果 换笼站采购项目数量和采购设备数量总体均呈上升趋势,说明我国实验动物行业对换笼站需求量日趋增大。其中,国产换笼站市场占有率占据较大优势,而生物安全型换笼站领域还有发展潜力。结论 换笼站是改善实验动物从业人员职业健康的重要设备。在换笼站的采购、验收等环节,应重点关注空气过滤性能、下降气流流速、气流模式。