摘要: 【目的】本研究旨在丰富中华蜜蜂Apis cerana cerana 14-3-3ζ基因的基本信息，为其进一步的功能研究提供参考和依据。【方法】通过PCR扩增14-3-3ζ基因的编码序列(coding sequence, CDS),再进行TA克隆和Sanger测序；使用相关软件预测14-3-3ζ的理化性质和分子特征，并对14-3-3ζ进行系统进化分析；利用RT-qPCR检测14-3-3ζ基因在中华蜜蜂不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫)、刚出房工蜂成虫不同组织(触角、中肠、脂肪体、咽下腺、脑、表皮和毒腺)及蜜蜂球囊菌Ascospaera apis接种中华蜜蜂工蜂3日龄幼虫后4, 5和6日龄幼虫肠道中的表达量。【结果】成功克隆到中华蜜蜂14-3-3ζ基因的CDS,含744个核苷酸，编码247个氨基酸，中华蜜蜂14-3-3ζ的分子量约为28.0 kD,含26个磷酸化位点、 4个结构域和1个保守基序，不含跨膜结构域与信号肽；中华蜜蜂、西方蜜蜂Ap.mellifera、黑大蜜蜂Ap.laboriosa、小蜜蜂Ap.florea、芦蜂Ceratina calcarata、火红熊蜂Bombus pyrosoma、地熊蜂B.terrestris、苜蓿切叶蜂Megachile rotundata、壁蜂Osmia lignaria和东南蓝莓蜂Habropoda laboriosa 14-3-3ζ均包含4个相同的保守基序和1个相同的结构域(14-3-3＿1),中华蜜蜂和西方蜜蜂的14-3-3ζ在系统进化树上聚为一支。14-3-3ζ基因在中华蜜蜂卵中的表达量显著高于3日龄幼虫、1和2日龄预蛹及4日龄蛹中的表达量，在中华蜜蜂各日龄工蜂成虫体内的表达量无显著差异；14-3-3ζ基因的表达量在中华蜜蜂刚出房工蜂成虫毒腺中最高，且显著高于触角、中肠、咽下腺、脑、表皮和脂肪体中的表达量；蜜蜂球囊菌接种中华蜜蜂工蜂3日龄幼虫后，14-3-3ζ基因在中华蜜蜂工蜂4, 5和6日龄幼虫肠道中的表达量与对照组比显著下调。【结论】中华蜜蜂14-3-3ζ基因在工蜂的毒腺和卵中特异性高量表达，幼虫肠道中14-3-3ζ基因的表达在蜜蜂球囊菌侵染过程中被激活，14-3-3ζ是一种潜在的亲水性、非跨膜和胞内蛋白，中华蜜蜂与上述其他10种蜂的14-3-3ζ较为保守，中华蜜蜂和西方蜜蜂的14-3-3ζ之间亲缘关系最近。

摘要: 【目的】中华蜜蜂Apis cerana cerana形态受地理及生态差异影响。本研究旨在探究贵州省不同地区中华蜜蜂的形态差异，以期为其形态在不同地区之间的分化提供参考。【方法】选取贵州省内33个地区云贵高原型中华蜜蜂工蜂样本共7 524头，解剖后测量喙、足、背板、腹板和前翅相关形态参数值，再采用随机森林(random forest, RF)、神经网络(neural network, NN)和支持向量机(support vector machine, SVM)方法经参数调优后确定最佳形态分析模型和筛选变量重要性；根据变量重要性进行K-means无监督聚类分析；将重要变量与气温、降水量和植被值进行Pearson相关性分析。【结果】机器学习结果显示，当mtry为5,随机树为550时参数调优结果最佳；3个模型中SVM在精确率(precision)、召回率(recall)及F1分值上优于RF和NN;第3腹板蜡镜间距、第3腹板蜡镜长、第3腹板蜡镜宽和肘脉2、前翅长重要性值较高。聚类分析结果显示，织金、贞丰、赤水等共12个地区的中华蜜蜂工蜂样本聚为一类；纳雍、赫章和册亨等共8个地区的中华蜜蜂工蜂样本聚为另一类；息烽、平塘和罗甸等共13个地区的中华蜜蜂工蜂样本被聚在2类内。相关性分析结果显示，第3腹板蜡镜长与第3腹板蜡镜宽和前翅宽呈极显著正相关；第3腹板蜡镜宽与前翅宽呈极显著正相关；第3腹板蜡镜间距与3年春冬温差累积值呈显著负相关；翅脉2与3年春冬温差累积值呈显著负相关。【结论】基于机器学习的结果表明中华蜜蜂在贵州省内不同地区出现形态上的分化。SVM方法可为蜜蜂的分类提供新的思路，有助于理解中华蜜蜂形态在贵州省内的演化趋势，对推动保护地方中华蜜蜂种质资源具有指导意义。

摘要: 【目的】拟步甲科昆虫是一类适应性强、食性复杂和繁殖能力强的土栖类昆虫。本研究分析了不同地形条件下拟步甲科昆虫的多样性分布格局，以揭示地形因子对北祁连山拟步甲科昆虫分布的影响。【方法】2022年7-8月在北祁连山地区1 000-2 000, 2 000-3 000, 3 000-4 000及4 000 m以上4个海拔区间选取65个采集样地，采用主动捕捉法对拟步甲科昆虫物种组成和分布进行调查；利用典范对应分析(canonical correspondence analysis, CCA)及曲线回归拟合分析北祁连山拟步甲科昆虫多样性分布与地形的关系。【结果】经鉴定、统计得到拟步甲科昆虫成虫34属124种5 682头，其中，波氏东鳖甲Anatolica potanini与粗背伪坚土甲Scleropatrum horridum horridum为优势种，其个体数分别占总捕获个体数的14.4%和24.8%。在海拔2 000-3 000 m区间，拟步甲科昆虫Shannon-Wiener多样性指数及Simpson优势度指数最高；在海拔1 000-2 000 m区间，拟步甲科昆虫Margalef丰富度最高；在海拔3 000-4 000 m区间，拟步甲科昆虫Pielou均匀度最高；而海拔4 000 m以上，仅发现少量喜阴湿的琵甲族与刺甲族物种。CCA结果显示，海拔和坡度对拟步甲科昆虫的分布格局有显著影响，海拔解释力度最高。拟步甲科昆虫Margalef丰富度指数和Shannon-Wiener多样性指数均与海拔呈显著的线性关系。拟步甲昆虫的Margalef丰富度指数与坡度呈显著负相关；优势种波氏东鳖甲个体数与5个地形因子均不显著相关，波氏东鳖甲分布于CCA排序轴原点附近，因此在北祁连山的分布比较广泛；优势种粗背伪坚土甲个体数仅与海拔呈显著负相关。拟步甲科昆虫平面曲率与个体数呈显著的正态曲线分布关系。【结论】北祁连山拟步甲科昆虫的分布格局受海拔为主的多种地形因子综合作用的影响。

摘要: 【目的】测定药用植物白花丹中重要植物次生物质白花丹素对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda 2龄幼虫的毒力，并明确亚致死浓度(LC₂₅浓度)白花丹素对草地贪夜蛾亲代（F₀）和子一代（F₁）生长发育及解毒酶活性的影响。【方法】白花丹素通过饲料混毒法处理草地贪夜蛾2龄幼虫（蜕皮后的第2天）测定其对草地贪夜蛾的毒力，同时以LC₂₅浓度（0.343 mg/g）白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫，统计记录F₀代与F₁代幼虫历期、化蛹率、蛹历期、雌雄成虫寿命和成虫单雌产卵量，构建年龄-龄期两性生命表。LC₂₅浓度白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫24 h后，测定羧酸酯酶（carboxylesterase, CarE）、谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase, GST）和细胞色素P450单加氧酶（cytochrome P450 monooxygenase, CYP450） 3种解毒酶的活性。【结果】白花丹素对草地贪夜蛾2龄幼虫7 d内的致死中浓度(median lethal concentration, LC₅₀)和LC₂₅值分别为0.607和0.343 mg/g。与溶剂对照（0.1%丙酮）对比，LC₂₅浓度白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫后亲代（F₀）的化蛹率显著下降了25.13%,雌雄蛹历期分别显著缩短了1.29和1.08 d,成虫的单雌产卵量显著下降了47%,产卵期和成虫寿命分别显著降低了1.75和1.19 d;子代（F₁）的平均世代周期（mean generation time,T）显著缩短了0.91 d。LC₂₅浓度白花丹素处理草地贪夜蛾2龄幼虫24 h可显著诱导其体内CarE, GST和CYP450 3种解毒酶活性，分别为溶剂对照的1.28, 1.30和1.42倍。【结论】LC₂₅浓度白花丹素对亲代（F₀）草地贪夜蛾的生长发育和繁殖产生明显的不利影响，且处理草地贪夜蛾2龄幼虫24 h可显著提高3种解毒酶CarE, GST和CYP450酶活性，该结论有助于将植物次生物质白花丹素作为防治草地贪夜蛾的潜在生物防治手段。

摘要: 【目的】本研究旨在评估氟啶虫酰胺对异色瓢虫Harmonia axyridis 3龄幼虫捕食能力的影响。【方法】在室内采用指型管药膜法观测分析了0.146和0.292 mg/mL氟啶虫酰胺处理异色瓢虫3龄幼虫对其对棉蚜Aphis gossypii成虫的捕食能力(捕食量、瞬时攻击率、处理时间及搜寻效应)的影响。【结果】0.146和0.292 mg/mL氟啶虫酰胺处理异色瓢虫3龄幼虫后，其对棉蚜成虫的捕食功能反应符合Holling圆盘方程(Ⅱ型功能反应)。与丙酮处理的对照组相比，0.146和0.292 mg/mL氟啶虫酰胺处理对异色瓢虫3龄幼虫捕食功能反应参数和搜寻效应均产生了负面影响，且随着氟啶虫酰胺浓度的增加，对捕食和搜寻能力的影响也愈加显著。对照组及0.146和0.292 mg/mL氟啶虫酰胺处理组异色瓢虫3龄幼虫的瞬时攻击率分别为0.9260, 1.4451和2.1197;日最大捕食量分别为392.62, 52.63和32.15头；处理时间分别为0.0025, 0.0190和0.0311 h。【结论】氟啶虫酰胺处理异色瓢虫3龄幼虫对其对棉蚜成虫的捕食功能有负面影响。因此，为了更好地保护和利用天敌，在实施异色瓢虫防控棉蚜时，应考虑减少或不使用化学药剂。

摘要: 【目的】探究基于人工饲料的饲养技术对光肩星天牛Anoplophora glabripennis生长、发育和繁殖的影响，明确光肩星天牛不同发育阶段的历期和繁殖参数，建立基于人工饲料饲养的光肩星天牛室内传代技术体系，为今后深入开展光肩星天牛基础研究和新型防控技术研发提供基础数据和技术支撑。【方法】采用人工饲料饲养的方法，观察和统计人工饲料饲养的光肩星天牛不同发育阶段的历期和死亡率；观察比较饲喂不同寄主植物(柳树Salix babylonica和复叶槭Acer negundo枝条)对光肩星天牛成虫寿命和产卵量的影响，明确光肩星天牛成虫对不同寄主植物的取食偏好性，探究成虫室内补充营养适宜的寄主植物种类；比较不同来源(室内人工饲料饲养与野外采集)的光肩星天牛成虫寿命和雌成虫产卵量的差异情况，评价不同生长环境对光肩星天牛成虫发育和繁殖生物学的影响；测定比较室内人工饲料饲养与野外采集的光肩星天牛的蛹重，明确不同生长环境对光肩星天牛蛹重的影响。【结果】在温度25℃、相对湿度60%和光周期16L∶8D条件下，光肩星天牛卵历期为(10.39±0.09) d,整个幼虫历期为(153.78±5.93) d。室内人工饲料饲养的光肩星天牛幼虫期共有5个龄期，1-5龄幼虫历期依次为(18.28±0.23),(24.75±0.20),(33.30±0.27),(37.67±0.27)和(39.85±0.31) d;光肩星天牛蛹历期为(15.05±0.06) d,各发育阶段的存活率均能保持在90.0%以上；利用复叶槭枝条补充营养能够显著提高光肩星天牛成虫寿命和单雌产卵量，单雌产卵量为(112.97±3.64)粒，雌成虫寿命为(39.90±4.69) d,雄成虫寿命为(30.93±6.75) d,显著高于利用柳树枝条补充营养的单雌产卵量[(26.33±0.97)粒]和成虫寿命[雌：(15.23±3.41) d;雄：(15.50±4.35) d]。室内人工饲料饲养的光肩星天牛单雌产卵量[(101.50±34.17)粒]和成虫寿命[雌：(41.00±3.82) d;雄：(30.50±8.23) d]与野外采集的成虫单雌产卵量[(94.25±18.59)粒]及成虫寿命[雌：(38.63±6.12) d;雄：(25.88±6.60) d]无显著差异。此外，室内人工饲料饲养的光肩星天牛蛹重为(0.95±0.20) g,与野外采集的光肩星天牛蛹重[(0.93±0.12) g]无显著差异。【结论】利用本研究的人工饲料饲养方法不仅能够极大提升人工繁育光肩星天牛的存活率，还能实现室内2代/年的传代饲养，大大缩短了光肩星天牛的繁育周期，可为光肩星天牛基础研究的开展提供稳定的试虫虫源，为进一步研发其新型防控技术奠定基础。

摘要: 【目的】本研究旨在探究高效氯氟氰菊酯对桃蛀螟Conogethes punctiferalis的亚致死效应，为指导田间科学使用高效氯氟氰菊酯防治桃蛀螟提供理论基础。【方法】采用药膜法测定高效氯氟氰菊酯对桃蛀螟3日龄成虫48 h的毒力；用亚致死浓度(LC₁, LC₅和LC₁₀浓度)高效氯氟氰菊酯处理3日龄桃蛀螟成虫，观察统计F₀代桃蛀螟成虫寿命、繁殖力和存活率以及F₁代桃蛀螟幼虫和蛹历期、繁殖力、孵化率、化蛹率和羽化率，并且组建F₁代年龄-龄期两性生命表。【结果】在处理48 h内，高效氯氟氰菊酯对桃蛀螟3日龄成虫的LC₁, LC₅和LC₁₀值分别为0.233, 0.601和0.995 mg/L。LC₁, LC₅和LC₁₀浓度高效氯氟氰菊酯处理桃蛀螟3日龄成虫后，F₀代成虫平均单雌产卵量分别减少了5.56%, 24.55%和51.06%。与对照组（丙酮处理）相比，LC₁₀浓度高效氯氟氰菊酯处理3日龄成虫后F₀代桃蛀螟成虫寿命显著缩短了1.60 d,产卵期显著缩短了1.29 d。F₁代种群结果表明，与对照组相比，LC₁, LC₅和LC₁₀浓度高效氯氟氰菊酯处理组卵期存活率分别降低了8.70%, 13.75%和30.38%,平均单雌产卵量分别减少了38.05%, 30.75%和24.84%,蛹期存活率分别降低了2.70%, 13.87%和27.68%。此外，与对照组相比，LC₁, LC₅和LC₁₀浓度高效氯氟氰菊酯处理组F₁代桃蛀螟特定年龄生殖力（f_x）曲线峰值分别降低了39.76%, 34.68%和39.56%, F₁代桃蛀螟产卵前期、雌虫特定年龄繁殖力曲线的峰值、内禀增长率（r）、周限增长率（λ）和净繁殖率（R₀）均显著降低。【结论】亚致死浓度高效氯氟氰菊酯处理显著降低F₀代桃蛀螟的寿命和繁殖力，同时显著降低F₁代的产卵量，抑制种群增长。本研究结果为科学使用高效氯氟氰菊酯防治桃蛀螟提供理论依据。

摘要: 【目的】调查茸喙丽金龟Adoretus puberulus的发生规律和成虫日活跃高峰期，为防控关键期提供参考；并筛选出具有良好防效的杀虫剂，为茸喙丽金龟的药剂防治提供参考。【方法】在2024年4月25日至7月22日山西蒲县梨园通过调查地下蛴螬探究越冬代老熟幼虫化蛹、成虫出蛰为害、产卵和卵孵化时间；于2024年6月12日至8月6日室内每日调查成虫单雌日产卵量以研究产卵规律；于2024年5月6日至8月23日利用诱虫灯研究成虫发生规律；于2023年7月10日至8月4日利用诱虫帐篷研究成虫日活跃高峰期。选用1%苦参碱可溶液剂（soluble concentrate, SL）进行梯度稀释，终浓度分别为50, 100, 500, 1 000和5 000 mg/L苦参碱，0.3%印楝素乳油（emulsifiable concentrate, EC）进行梯度稀释，终浓度分别为5, 10, 20, 25和50 mg/L印楝素，6%鱼藤酮微乳剂（microemulsion, ME）进行梯度稀释，终浓度分别为5, 20, 50, 100和1 000 mg/L鱼藤酮，采用浸虫法测定这些植物源杀虫剂对茸喙丽金龟成虫的毒力。【结果】在山西蒲县，茸喙丽金龟老熟幼虫于5月中旬开始化蛹；6月初成虫开始出蛰为害；6月中旬出蛰羽化的成虫开始产卵，7月上中旬为成虫产卵盛期；6月底卵开始孵化为幼虫蛴螬，卵历期为2周左右。6月中下旬至7月上旬为成虫盛发期。在20:00-22:00诱捕的茸喙丽金龟成虫数最多，成虫主要活动时间为20:00-24:00。3种植物源杀虫剂苦参碱、印楝素和鱼藤酮对茸喙丽金龟成虫的致死中浓度(median lethal concentration, LC₅₀)值分别为515.6, 18.6和33.2 mg/L。【结论】通过明确茸喙丽金龟成虫发生规律和晚间活动高峰期，建议在其发生高峰期6月中下旬至7月上旬每天20:00-24:00进行灯诱和人工捕捉成虫，6%鱼藤酮ME稀释500倍（即120 mg/L鱼藤酮）可用于梨园防治成虫。

摘要: 【目的】探究桃蚜Myzus persicae热激蛋白Hsp70基因在桃蚜响应高、低温胁迫中的作用。【方法】利用RT-qPCR检测桃蚜8个MpHsp70基因(MpHsp70-1,MpHsp70-2,MpHsp70A1,MpHsp70B2,MpHsp68a,MpHsp68b,MpHsc70-4和MpHsp70)在桃蚜无翅成蚜不同组织(头、中肠、胚胎和表皮)及分别在高温(36℃)和低温(4℃)胁迫下不同时长(0, 30, 60, 90, 120和150 min)无翅成蚜中的相对表达量；利用RNAi沉默两个关键MpHsp70基因(MpHsp70A1和MpHsp68a),观测无翅成蚜在高温(36℃)处理120 min和低温(4℃)处理30 min后无翅成蚜存活率和产若蚜量。【结果】8个MpHsp70基因在桃蚜无翅成蚜不同组织中均表达，其中MpHsp70,MpHsp70A1,MpHsp70B2,MpHsc70-4和MpHsp68b在表皮中的表达量显著高于在其他组织中的，MpHsp70-1,MpHsp70-2和MpHsp68a在胚胎中的表达量显著高于在其他组织中的；高、低温胁迫对桃蚜无翅成蚜MpHsp70基因表达具有明显的诱导作用，4℃胁迫下，MpHsp70-1,MpHsp70A1,MpHsp70-2,MpHsp68a和MpHsp68b的表达量呈现出现上升后下降趋势，在4℃胁迫30 min时达到最高，显著高于对照的；36℃胁迫下，MpHsp70-1,MpHsp70A1,MpHsp70-2,MpHsc70-4,MpHsp68a和MpHsp68b的表达量呈现先上升后下降的趋势，MpHsp70-1的表达量在36℃胁迫下60 min时达到最高，其他基因的表达量均在120 min时达到最高。与对照组相比，沉默MpHsp68a的表达后，高、低温胁迫下桃蚜成蚜的存活率和产若蚜量均显著下降；沉默MpHsp70A1的表达后，高温胁迫下桃蚜的存活率和产若蚜量均极显著下降。【结论】桃蚜MpHsp70基因可以响应高、低温胁迫，在桃蚜抵抗温度胁迫的分子机制中发挥着重要作用。

摘要: 【目的】探究肿柄菊Tithonia diversifolia中萜类化合物对斜纹夜蛾Spodoptera litura幼虫的毒力及其体内乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase, AChE）和解毒酶活性的影响，筛选防治斜纹夜蛾新的活性成分。【方法】斜纹夜蛾3龄幼虫用分别添加S-烯虫酯（阳性对照）和不同浓度萜类化合物的饲料饲喂，通过室内生物测定评价角鲨烯、氧化石竹烯和α-蒎烯3种萜类化合物处理10 d内对斜纹夜蛾幼虫的胃毒活性，处理后7 d时测定幼虫的体重；采用酶联免疫吸附法，测定不同浓度氧化石竹烯处理3 d对斜纹夜蛾幼虫体内AChE、羧酸酯酶（carboxylesterase, CarE）、细胞色素P450（cytochrome P450, CYP450）和谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase, GST）活性的影响；最后采用分子对接技术模拟角鲨烯、氧化石竹烯和α-蒎烯与AChE, CarE, CYP450和GST的结合力及结合位点。【结果】斜纹夜蛾3龄幼虫取食添加不同浓度萜类化合物的饲料3-5 d内，1×10^-4～1×10^-1 mg/mL氧化石竹烯对其表现出显著的杀虫活性，引起的幼虫校正死亡率显著高于角鲨烯、α-蒎烯及阳性对照。处理后7 d,氧化石竹烯显著抑制斜纹夜蛾幼虫体重增长，且高浓度氧化石竹烯处理组(1×10^-1 mg/mL)幼虫体重显著低于阳性对照组。1×10^-5～1×10^-3 mg/mL氧化石竹烯处理后3 d斜纹夜蛾幼虫体内AChE, CarE和GST活性较阳性对照组显著降低，CYP450活性较溶剂对照组（95%乙醇）显著降低，其中，氧化石竹烯测试浓度为1×10^-1 mg/mL时，幼虫体内AChE活性呈负值。分子对接结果进一步揭示，氧化石竹烯与AChE的结合力最强，低于其与CarE, CYP450和GST的结合自由能力。【结论】氧化石竹烯对斜纹夜蛾幼虫具有较高的毒力，通过抑制AChE活性对斜纹夜蛾产生毒杀作用，其具有作为绿色防控资源的潜在应用价值，为肿柄菊萜类化合物的开发与利用提供了新思路。