摘要: 为阐明γ-氨基丁酸(GABA)对鳜(Siniperca chuatsi)摄食和食欲的影响,对鳜脑室注射生理盐水和不同剂量的GABA(50、125、500和2000μg)。结果显示,注射125μg GABA组的鳜在2h内摄食量显著升高。实时荧光定量PCR(RT-q PCR)结果显示,注射125μg GABA 0.5h后,鳜鱼脑中Ag RP和NPY m RNA表达量上调,CART和POMC m RNA表达量下调,都和鳜摄食量增加相一致。相比于对照组,注射GABA后Leptin-R的m RNA表达量在0.5h和2h都有显著下降。这些结果表明GABA可能通过leptin的信号通路来影响食欲,进而影响摄食量。研究结果可以为GABA在水产饲料中的应用提供理论依据。

摘要: 为进一步丰富鱼类MHC class Ⅱ基因的研究,同时也为进一步探讨低磷饲料中添加维生素D3对鱼类免疫功能可能的影响,实验利用RACE(Rapid-amplification of c DNA ends)即c DNA末端快速扩增技术,成功克隆出黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)class Ⅱ抗原基因,全长1074 bp,其中ORF(Open reading frame)708 bp,编码236个氨基酸,5′UTR(5′端非翻译区)78 bp,3′UTR(3′端非翻译区)259 bp。进行氨基酸序列比对分析得到:黄颡鱼MHC class Ⅱ基因ORF氨基酸序列与长吻逘(Leiocassis longirostris)的氨基酸序列相似度最高为69.5%,与锦鲤(Cyprinus carpio)的氨基酸序列相似度最低为50.4%。利用q PCR对黄颡鱼MHC class Ⅱ基因进行组织表达分析,结果表明MHC class Ⅱ在小肠、肝脏、鳃中表达较高;在肌肉、鳍条中表达较低;而在肾、脾脏、脑、头肾中表达量极低(几乎检测不到)。在低磷饲料中添加维生素D3显著诱导了该基因的上调表达。研究结果展示了黄颡鱼MHC class Ⅱ抗原基因的分子结构、组织表达以及维生素D3的作用,在降低磷排放的同时,为今后黄颡鱼免疫抗病及分子选育等方向的深入研究及免疫型饲料的使用奠定了基础。

摘要: 脂联素作为一种重要的细胞因子在哺乳动物中起到调节糖脂代谢的重要作用,为探究脂联素在大菱鲆糖脂代谢中是否具有同样的调节作用,研究利用分子克隆和RACE技术克隆到了大菱鲆脂联素Adipo R1受体和Adipo R2受体的基因全长序列。其中Adipo R1受体的核苷酸序列全长为1125 bp,共编码375个氨基酸,氨基酸序列与其他脊椎的同源性都很高。Adipo R2受体的核苷酸序列全长为1940 bp,共编码380个氨基酸,氨基酸序列与其他脊椎动物同源性也都很高。蛋白跨膜结构域预测得出大菱鲆Adipo R1和Adipo R2都具有7个明显的跨膜区,最优拓扑模型为N端在细胞内侧模型,与其他脊椎动物相同。配制不同糖脂比(1鲶6,1鲶2,2鲶1和14鲶1)的饲料养殖大菱鲆9周,利用实时荧光定量PCR技术检测大菱鲆肌肉和肝脏中脂联素受体基因的表达量。结果显示,在饲料糖脂比为1鲶2的处理组中,大菱鲆肌肉中Adipo R1的表达量显著低于糖脂比为1鲶6的处理组(P<0.05),但与其他2组无显著差异。饲料糖脂比的变化对肌肉中Adipo R2和肝脏中这2种受体的表达量均没有产生显著影响(P>0.05)。由此可见,饲料糖脂比的变化可能通过改变脂联素受体的表达量,从而间接影响大菱鲆体内脂联素的作用。Adipo R1和Adipo R2对饲料糖脂比变化的反应不同步,而且肌肉和肝脏中脂联素受体对饲料糖脂比变化的反应也存在不同。适量提高饲料糖脂比可以显著下调肌肉中Adipo R1的表达。

摘要: 研究旨在探究饲料脂肪水平对大菱鲆(Scophthalmus maximus)幼鱼雷帕霉素受体(TOR)信号通路的影响。以大菱鲆幼鱼[初始体重(8.6±0.01)g]为实验对象,配制脂肪水平分别为11.69%(适宜脂肪组)和16.58%(高脂组)的2种等氮饲料在室内循环水系统中进行投喂实验,养殖周期为97d。结果显示:(1)饲料脂肪水平升高对大菱鲆幼鱼存活和特定生长率(SGR)无显著影响(P>0.05)。(2)与适宜脂肪组相比,肝脏中TOR和4EBP1m RNA水平在高脂组上调(P<0.05)而4EBP2 m RNA水平在高脂组下调(P<0.05)。此外,与适宜脂肪组相比,肌肉中TOR和4EBP1 m RNA水平在高脂组下调(P<0.05)而4EBP2 m RNA水平在高脂组无显著变化。(3)饲料脂肪水平显著影响AKT、TOR和4EBPs磷酸化水平。肝脏中p-AKT(T308和S473)/AKT、p-m TOR(S2448)/m TOR和p-4EBP1(T37/46)/4EBP1在高脂组显著高于适宜脂肪组,而p-p70S6K(T389)/p70S6K在高脂组显著低于适宜脂肪组。肌肉中p-AKT(S473)/AKT、p-m TOR(S2448)/m TOR和p-4EBP1(T37/46)/4EBP1在高脂组显著低于适宜脂肪组,而p-p70S6K(T389)/p70S6K在高脂组显著高于适宜脂肪组。结果表明:大菱鲆幼鱼肝脏和肌肉TOR、4EBP1和4EBP2的m RNA表达量与AKT、TOR、4EBP1和p70 S6K磷酸化受到饲料脂肪水平调控,饲料脂肪水平升高,激活了肝脏TOR信号通路,同时肌肉TOR信号通路受到部分抑制。

摘要: 为研究TLR21(Toll like receptor 21)在低等脊椎动物中的功能及表达调控机制,我们扩增获得了日本鳗鲡TLR21(Aj TLR21)c DNA序列,其编码的蛋白具有TLR家族的共同特征。Aj TLR21基因结构与其他鱼类和两栖类TLR21相同,由单个外显子编码。荧光定量结果显示,Aj TLR21在血液、鳃、脾脏、中肾等11个组织/器官中转录表达,其中在血液中表达量最高。经Poly I:C诱导后8h,Aj TLR21在脾脏和中肾中的表达量显著性上调;诱导后16h,Aj TLR21在血液、鳃、肠和脾脏中的表达量显著性上调(P<0.05)。双荧光素酶报告基因结果显示,在Aj TLR21 5′上游调控序列–1179 bp到+117 bp存在Poly I:C调节的正调控元件。经Edwardsiella tarda诱导后16h和72h,Aj TLR21分别在血液和中肾组织的表达量显著性上调,表明Aj TLR21同时也参与了抗细菌免疫应答,其在机体免疫系统中的功能具有多样性。研究对于理解日本鳗鲡Aj TLR21的免疫学功能具有重要的理论意义和应用价值。