摘要: 为研究促甲状腺激素释放激素 (thyrotrophin releasinghormone ,TRH)及其受体 (TRHreceptor,TRH R)在大鼠睾丸组织中的表达规律和在生殖发育调节中的作用 ,依据大鼠下丘脑中的前TRH原 (preproTRH ,ppTRH)和垂体中的TRH RcDNA设计引物 ,采用RT PCR法从大鼠睾丸组织中获得了 ppTRH和TRH R的cDNA克隆 ,测序后构建表达载体 ,在大肠杆菌中表达了可溶性的ppTRH和TRH R融合蛋白。利用实时动态定量RT PCR (realtimequantitativeRT PCR)法观察了 ppTRH和TRH R在不同发育阶段大鼠睾丸中的表达变化 ,发现在睾丸间质细胞发育的初期阶段 (第 8天 ) ,没有ppTRH和TRH R的表达 ,但从第 15天起能观察到 pp TRH和TRH R的表达 ,并且表达量在 2 0天、 35天、 6 0天和 90天逐渐增加。这些结果表明 :大鼠睾丸组织能特异性表达ppTRH和TRH R ,并且表达量与发育过程相关。ppTRH和TRH R体外表达产物的获得为后续研究其功能奠定了基础。

摘要: 研究促卵泡激素 (FSH)、人绒毛膜促性腺激素 (hCG)对昆明白小鼠卵母细胞成熟和卵丘扩展的影响 ,以及体外培养时卵丘扩展与卵母细胞成熟之间的关系。FSH可以明显促进次黄嘌呤 (HX)抑制条件下的卵丘 -卵母细胞复合体CEO卵母细胞成熟及卵丘扩展 ,其最佳作用剂量为 10 0IU/L ,且FSH作用 30分钟即可以使CEO获得恢复减数分裂的信息。在HX存在的条件下 ,FSH处理后 10hr,CEO卵丘明显扩展 ,而生发泡破裂(GVBD)则在 16～ 2 0hr明显增加 ,所有卵丘未扩展的CEO中卵母细胞均未发生GVBD。低剂量hCG单独或与FSH共同存在 ,对CEO卵母细胞成熟及卵丘扩展均无明显影响 ;高剂量hCG可以部分抑制FSH对卵母细胞成熟的促进作用。结果表明 :FSH明显促进CEO卵母细胞成熟及卵丘扩展 ,而hCG却不具有此作用。体外培养条件下 (含次黄嘌呤 ) ,卵丘扩展是卵母细胞成熟的前提条件 ,但卵母细胞成熟并不需要卵丘完全扩展。

摘要: 为研究雄性小鼠睾丸在发生、发育过程生精细胞增殖与凋亡的年龄变化 ,本研究采用了免疫细胞化学、凋亡细胞原位检测、电镜及体视学图象分析等方法 ,对胚胎 15天到生后 10月各发育阶段生精细胞的超微结构、PCNA表达、凋亡情况进行了较深入地研究。结果 :(1)精原细胞PCNA反应在胚胎 15天为阳性 ,从胚胎 18天到生后 5天 ,降为弱阳性 ,而阳性的精原细胞在生后 7天重新出现 ,一直到生后 6月 ,仍可见部分精原细胞呈阳性反应 ;(2 )生后 3天 ,可见凋亡的精原细胞染色质浓缩 ,核膜出现明显的核周隙 ,核碎裂。凋亡细胞数从生后 1天到生后第 3周有增加的趋势 ,于生后第 3周出现峰值 ,之后降低。结论 :(1)PCNA阳性细胞面密度到生后第 2周出现峰值 ,而凋亡细胞数于生后 3周出现峰值。生精细胞凋亡的高峰要滞后其增殖峰 1周左右 ,而且与其所处生精周期的特定阶段有关 ;(2 )精原细胞在胚胎发育过程中向曲细精管周边迁移 ,其排列由无序到有序 ;(3)在生后各发育阶段中 ,精原细胞始终保持DNA复制的能力。

摘要: 离体条件下 ,以大白鼠肝癌细胞株H4IIE的 7 乙氧基 3 异吩恶唑酮 脱乙基酶 (EROD)活力诱导作为毒性指标 ,测定了 2 ,3,7,8 TCDD单独存在以及与一定浓度的 2 ,3,7,8, TCDF ,OCDD ,PCB12 6和PCB77分别共存下的EROD活力 ,并用TEF和独立作用模型 (independence)两种方法对实验结果进行了评估。利用TEF评估的结果表明实验的TEQ值和理论计算的TEQ值十分接近 ,复合毒性表现为加合作用 (additivi ty) ,这一结果与用独立作用模型评估的结果完全一致。研究结果不仅证实了TEF评估方法的有效性和利用模型方法评估二恶英类化合物复合毒性的可行性 ,同时还表明离体条件下 ,大白鼠肝癌细胞株H4IIE的EROD酶活力诱导适用于化合物的复合毒性的研究。

摘要: 用含不同浓度乙醇的Whitten氏培养液对小鼠 2细胞、 4细胞、 8细胞和桑椹期胚胎分别进行体外培养 ,研究了乙醇对小鼠不同发育时期胚胎体外发育的影响。首先利用含 0、 0 1%、 0 5 %、 1 0 %、 1 5 %、 2 0 %、3 0 %、 5 0 %和 10 0 %乙醇的Whitten氏培养液对 2细胞胚胎进行培养 ,发现小鼠 2细胞胚胎对培养液中乙醇浓度的耐受极限在 1 5 %左右。然后又用含 1%和 3 %乙醇的Whitten氏培养液分别对小鼠 2细胞、 4细胞、 8细胞和桑椹期胚胎进行培养。结果发现 :含 1%乙醇的培养液对于 8细胞胚胎和桑椹胚的囊胚形成有促进作用 ,而在2细胞和 4细胞胚胎中则影响不明显。 3%乙醇则对各期胚胎均有不同程度的抑制作用 ,但随着胚胎发育其对乙醇的耐受力逐渐增强。