摘要: 目的通过相关文献阅读分析,比较目前利用四氯化碳（CCl₄）诱导肝纤维化的造模方法,制订出最佳的造模方案,为科学研究提供参考借鉴。方法计算机检索数据库（中国知网、万方数据知识服务平台、维普网）获取近五年相关文献,选取实验病理结果和血清学检查谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）对文献进行评分。对相关实验影响因素做出评价,进而制定出模型诱导的标准。结果模型组病理结果均显示出正常肝小叶结构被破坏和小叶间纤维间隔形成,血清检查ALT和AST指标较空白对照组均有明显的增长。结论四氯化碳油剂诱导肝纤维化模型是可靠的实验方案,且动物品系、药物作用途径、四氯化碳浓度等因素均对实验结果产生影响。

摘要: 目的实验动物模型是生物药物开发领域包括肿瘤学研究、抗体药物开发、临床前药效及安全评价等的一种重要工具。制备CD40人源化小鼠能够为CD40抗体的临床前药效、药理研究和安全性评价提供更多的可能。方法利用CRISPER/Cas9系统制备获得CD40人源化小鼠后,通过RT-PCR以及流式细胞术检测CD40人源化小鼠表达人CD40情况。基于CD40人源化小鼠建立肿瘤模型并评价CD40激动剂单克隆抗体的药效作用和安全性。结果 CD40人源化小鼠只表达人CD40,并且各淋巴细胞比例与野生型小鼠对比没有明显改变。CD40单克隆抗体作用后能够显著抑制肿瘤生长,发挥药效同时引起的小鼠体质量下降可能与药物作用后引起的小鼠肝脏和肾脏毒副作用有关。结论本研究成功制备了CD40人源化小鼠,是CD40抗体药物作用效果和安全性评价的一种有效动物模型。

摘要: 目的比较自主建立的C57BL/6J-Tg (HRAS)转基因小鼠与BALB/c J小鼠的杂交1代小鼠CB6F1-Tg(HRAS) Nifdc(简称CB6F1-NIFDC)与日本转基因小鼠模型杂交1代小鼠CBy B6F1-Tg(HRAS) 2Jic(简称CB6F1-CIEA)的脏器及血液生理指标异同,丰富自建模型的基础数据。方法选取8周龄的CB6F1-NIFDC及CB6F1-CIEA各10只,雌雄各半,活体称体质量,随后解剖并测定其主要脏器质量及血液生理指标。结果自主建立的CB6F1-NIFDC及日本引进的CB6F1-CIEA小鼠模型的部分脏器质量和血生理参数有差异性,脏器质量结果表明,雌性小鼠的心、肝、肺、左右肾等指标存在一定差异;雄性小鼠的肝、肺、左右肾、胸腺、左右睾丸指标质量有差异。22项血液生理指标方面,雌性小鼠在RBC、HGB等7项指标差异极显著(P<0.01);而雄性小鼠在RBC、HCT等5项指标差异极显著(P<0.01)。结论本文测定了两种模型脏器指标及生理指标,为自建模型在新药安全评价实验中的应用提供参考。

摘要: 目的建立北京中医药大学北京中医药研究院医学检验实验室SD大鼠血浆中凝血四项正常参考值范围。方法利用全自动凝血分析仪测定40只SD大鼠血浆中的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(FIB)水平。结果正常SD大鼠血浆中的凝血四项参数比较稳定,PT的参考值范围为14.96～15.86 s,APTT为15.25～18.83 s,TT为43.06～53.18 s及FIB为1.94～2.21 g/L。结论建立了该实验室正常SD大鼠的凝血四项检查参考值范围,为药理实验提供参考数值,对其安全性毒理学评价有重要意义。

摘要: 目的研究干扰长链非编码RNA核富集的转录物1(NEAT1)上调miR-126抑制胃癌细胞的生长,间质转换及裸鼠肿瘤形成的影响。方法通过RT-PCR分析NEAT1在胃癌MGC-803、SGC-7901细胞和正常胃上皮GES-1细胞中的表达,并检测sh-NEAT1的沉默效率。NEAT1沉默后,EDU染色分析肿瘤细胞的增殖能力;流式细胞术分析细胞凋亡; Transwell小室和划痕实验分析肿瘤细胞的侵袭、迁移能力; Western blot分析肿瘤细胞Ki67、Caspase-3、N-cadherin和E-cadherin的表达。荧光素酶报告实验验证NEAT1与miR-126的靶向关系,分析NEAT1/miR-126对胃癌SGC-7901细胞生长和运动的调节影响;通过构建转染sh-NEAT1的SGC-7901细胞的移植瘤模型裸鼠,检测30 d内肿瘤体积及质量变化;免疫组化检测Ki67和Caspase-3的表达,RT-PCR检测NEAT1和miR-126的表达;Western blot检测N-钙黏蛋白(N-cadherin)及E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。结果 NEAT1在肿瘤细胞中的表达水平显著高于正常细胞(P<0.05),sh-NEAT1沉默后,肿瘤细胞NEAT1的表达量显著降低,增殖能力明显受到抑制,凋亡细胞比例显著增高,肿瘤细胞的侵袭、迁移能力明显减弱,肿瘤细胞中Ki67和N-cadherin表达量明显降低,Caspase-3和E-cadherin的表达水平显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。荧光素酶报告实验表明NEAT1与miR-126存在靶向关系,sh-NEAT1能显著促进miR-126的表达(P<0.05),miR-126 inhibitor能显著促进sh-NEAT1对SGC-7901细胞增殖、侵袭、迁移,并抑制细胞凋亡。移植瘤模型裸鼠表明sh-NEAT1能够抑制肿瘤体积增大,下调肿瘤组织中NEAT1、Ki67及N-cadherin的表达水平,上调miR-126、Caspase-3和E-cadherin的表达量,肿瘤的质量与对照组相比显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论干扰长链非编码RNA NEAT1能够上调miR-126表达,从而抑制胃癌细胞的增殖,并通过阻断EMT机制降低肿瘤细胞的侵袭、转移能力,抑制裸鼠肿瘤的形成。