摘要: 目的建立长爪沙鼠仙台病毒(Se V)抗体ELISA检测方法,用于长爪沙鼠体内仙台病毒抗体的检测。方法孵育鸡胚,接种Se V,制备鸡胚尿囊液正常抗原和Se V特异抗原,滴定酶结合物和抗原最佳工作浓度,并进行特异性、敏感性、精密性、稳定性实验。结果正常抗原、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为0.1μg/m L、2μg/m L和1∶5 000;正常抗原、特异抗原批内变异系数分别为9.6%和8.4%,批间平均变异系数分别为9.0%和5.9%;检测灵敏度为1∶10 240;与沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)、小鼠肺炎(PVM)、呼肠孤病毒3型(Reo3)均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于25%。结论建立的ELISA方法特异性、敏感性强,重复性、稳定性好,检测结果,准确、可靠。可用于长爪沙鼠体内Se V抗体的检测。

摘要: 目的构建syncytinA(合胞素A)条件敲除小鼠,为进一步研究syncytinA在胎盘形成过程中发挥的融合及非融合作用及研究子痫前期病理模型提供基础。方法在用ES细胞打靶完成syncytinA外显子上游loxp同源重组基础上,利用CRISPR-Cas9得到syncytinA-loxp小鼠。构建syncytinA-loxp转基因载体及sg RNA,通过原核显微注射方法将构建好的doner、Cas9及sg RNA一并注射到C57小鼠受精卵中,并移植入同期受孕代孕受体ICR输卵管中获得子代小鼠。用PCR方法检测子代鼠尾基因型,loxp阳性小鼠与WT交配获得syncytinA-loxp小鼠。为了检测syncytinA-loxp能否被敲除,通过与prime1cre及zp3cre交配获得syncytinA-/-,PCR及q-PCR检测syncytinA是否被敲掉。结果经PCR及q-PCR方法检测,我们成功得到syncytinA-/-胚胎。结论 syncytinA条件敲除小鼠构建成功,为更好的研究它在胎盘及子痫前期中的功能提供了基础。

摘要: 目的通过建立大鼠闭合型胫骨骨折模型,为探讨骨折生理愈合机制提供实验依据。方法对14只8周龄雄性SD大鼠通过自行设计的大鼠骨折造模支架行胫骨中段闭合性骨折,自制外夹板复位固定,并分别于骨折后0,7,14,21,28 d拍摄X线观察骨折类型以及骨折的愈合情况。结果 X线显示10只为横行骨折,3只斜形骨折,1只为粉碎性骨折,并呈典型的二期愈合过程。结论自行设计的大鼠骨折造模支架及自制夹板外固定制作的大鼠闭合型胫骨骨折模型操作简便,减少了造模过程中人为的软硬组织损伤对骨折的影响,符合闭合性骨折模型的要求。

摘要: 目的建立小鼠巨细胞病毒(MCMV)PCR检测方法,并进行初步应用。方法根据NCBI公布的巨细胞病毒设计引物,进行PCR体系优化、敏感性、特异性测试;运用优化后的方法,对87份小鼠血清进行检测,对阳性样本进行测序分析。结果建立的小鼠巨细胞病毒PCR方法灵敏度高,特异性好,初步检测4个屏障设施的87份小鼠血清,13份为阳性,通过测序证实为小鼠巨细胞病毒,验证了此方法的可行性。结论为小鼠巨细胞病毒的快速检测提供了方法。

摘要: 目的检测绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,简称GFP)转基因裸鼠的部分免疫学指标,分析GFP转基因裸鼠与其他小鼠在免疫学方面的优缺点,为将来的研究提供基础参考值。方法 1实验选用6～8周GFP转基因裸鼠、BALB/c裸鼠和BALB/c小鼠,活体称体质量,剖取脾脏称其质量,之后进行脾淋巴细胞增殖能力的测定。2取外周血,测定部分血常规指标及免疫球蛋白指标。结果 1 GFP转基因裸鼠脾脏质量、脾脏系数以及T、B淋巴细胞增殖反应与BALB/c裸鼠相近,但与BALB/c小鼠差异显著。2 GFP转基因裸鼠、BALB/c裸鼠两种裸鼠品系外周血白细胞水平、淋巴细胞以比例及免疫球蛋白IgG、IgM都远低于BALB/c小鼠,差异显著。结论从脏器系数、白细胞水平,免疫球蛋白水平等角度发现,GFP转基因裸鼠和BALB/c裸鼠的免疫系统水平较BALB/c小鼠相弱,其中GFP转基因裸鼠的免疫系统水平最为低下。