摘要: 对清洁级SD大鼠进行剖腹取胎净化,经人工饲育建立无菌SD大鼠群,以满足科研单位对无菌大鼠的需求。在手术隔离器中剥离子宫,取35只仔鼠传入饲育隔离器,静置2 h后存活20只;用自行研制的灌胃注射器,和市售配方改良奶粉,对剖腹取胎仔鼠进行人工哺乳。每24 h人工哺乳5～6次。哺乳20只,离乳13只。粪便、垫料、棉拭子经无菌检查,均无细菌生长。通过优化人工乳配方,创新无菌鼠培育技术,成功建立无菌大鼠模型,并传代保种,解决了科学研究在国内买不到无菌大鼠的难题。

摘要: 目的探讨姜黄素对沙漠干热环境中暑生命体征和相关血液指标的影响,以阐明姜黄素对中暑大鼠的保护作用。方法选取6～8周龄SPF级雄性SD大鼠200只,每组40只,随机分组(对照组、溶剂组、姜黄素低剂量预处理组、姜黄素中剂量预处理组、姜黄素高剂量预处理组),各组连续7d等体积灌胃,同时置于西北特殊环境人工实验舱中,设定沙漠干热环境气候模式(温度41℃,湿度10%),分别在0 min、50 min、100 min、150 min时间点,各组随机取10只动物测量核心体温、称质量、并出舱麻醉,采集动脉、静脉血,测定血气、血常规及血生化指标。结果高剂量组10 min体温平均上升速率明显低于对照组(P<0.05)和溶剂组(P<0.05);高剂量组10 min体质量平均下降速率明显低于对照组(P<0.05)、溶剂组(P<0.05);高剂量组10 min体质量平均下降速率与pO2、pH值、糖、甘油三酯呈负相关(相关系数分别为:-0.955、-0.355、-0.692、-0.733),与白细胞数目呈正相关(相关系数为:0.943)。结论中暑大鼠的体温上升速率和体质量下降速率可能是反映大鼠预后的有用指标,姜黄素可以降低沙漠干热环境中暑大鼠体质量平均下降速率和体温平均上升速率,从而保持血液中较高的pO2、减缓血液pH值降低、维持血液中糖、甘油三酯能量物质在较高水平,同时抑制血液中白细胞数目上升,从而可能通过维持机体内环境的相对稳定而发挥对沙漠干热环境中暑大鼠损伤的保护作用。

摘要: 目的了解全国实验动物检测相关实验室在大鼠仙台病毒抗体检测项目上的技术水平,发现并解决检验中存在的问题,促进各实验室加强质量管理,提高检测水平。方法制备标准实验大鼠血清样品,经过标定后分装,按照CNAS的要求进行均一性和稳定性验证,标定好的样品随机编号并随机发放给各参加实验室,每个实验室3个样本,在规定时间内反馈结果,结果以阳性或阴性表示,与预期结果均一致者判为满意结果,不完全一致或逾期未反馈结果者判为不满意。结果来自18个省市自治区的28家单位报名参加本次比对实验,均在规定时间反馈了结果,其中25家单位获得满意结果,占参加比对实验室的89.3%;结果不满意的3家单位,其中1家有1个样品与预期结果不符,另外2家均有2个样品与结果不符。28家单位中有27家采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测,另外1家用免疫荧光法(IFA)检测。反馈的原始记录总体真实可信,个别参加单位存在检测试剂来源不清、操作过程不详及阳性结果未进行复检等问题。结论各实验动物检测机构大鼠仙台病毒总体检测能力较高,本次能力验证计划的实施能够反映实验室的检测水平。

摘要: 目的探讨体外培养对成年小鼠肝组织及肝癌组织理化特性的影响。方法采取9月龄H-ras12V转基因雄性小鼠的肝癌组织和癌旁组织及C57/BL6J正常雄性小鼠的正常肝组织进行体外培养,苏木精-伊红染色法检测肝组织在12 d内的生长状态;考马斯亮蓝染色法检测组织中总体蛋白在48 h内的变化趋势;Western blot法检测48 h内培养组织中p-ERK、p-AKT、p-mTOR、GAPDH和Cyclin D1的蛋白表达水平;RT-qPCR法检测48 h内培养组织中18s RNA、Cyclin D1、GAPDH、UQCRB的mRNA表达水平。结果体外培养6 d内,正常雄性小鼠肝组织、H-ras12V转基因雄性小鼠肝癌及癌旁组织的细胞形态变化相似,存活状态良好。体外培养6 d后,正常肝细胞和癌旁细胞逐渐减少,相比之下,肝癌细胞开始出现大量死亡,但出现少数克隆样细胞团。考马斯亮蓝染色检测结果显示,正常肝组织、肝癌组织和癌旁组织的总体蛋白变化趋势相似,随培养时间的延长,在130～170 k D之间的蛋白条带丰度先升高再降低,40～130 k D之间的蛋白条带丰度逐渐增加。Western Blot检测结果显示,随着体外培养时间的延长,组织中p-ERK、p-AKT、p-mTOR、GAPDH和Cyclin D1的蛋白表达水平呈逐渐下降趋势。RT-qPCR检测结果显示,Cyclin D1在正常肝细胞、肝癌细胞及癌旁细胞和GAPDH在正常肝细胞、癌旁细胞中随培养时间的延长,呈现逐级升高趋势;而GAPDH在肝癌细胞和UQCRB在正常肝细胞、肝癌细胞及癌旁细胞中随培养时间的延长,呈现先下降后又逐渐升高的趋势;18s RNA的mRNA表达水平在正常肝细胞、肝癌细胞及癌旁细胞中没有规律性趋势变化。结论成年小鼠肝组织及肝癌组织在体外培养期间,虽然肝细胞的形态学变化不明显,存活良好,但短时间内,众多基因在mRNA和蛋白的表达水平上发生了显著的变化,对实验结果将有较大的影响。

摘要: 目的长爪沙鼠真核蛋白延长因子1a2(eukaryotic translation elongation factor 1 alpha 2,Eef1a2)基因的克隆,测序和同源性分析。方法提取长爪沙鼠骨骼肌组织的mRNA,通过同源扩增和cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆Eef1a2 cDNA序列全长。通过DANSTAR软件比对长爪沙鼠和人类、大鼠、小鼠Eef1a2的cDNA和氨基酸序列,并分析其同源性。结果长爪沙鼠Eef1a2 cDNA序列全长1812 bp,编码区(coding sequence,CDs)1392 bp,编码463个氨基酸。其核苷酸序列与人类、大鼠和小鼠的同源性分别为88.6%,94.0%和93.8%;长爪沙鼠Eef1a2氨基酸序列与人类、大鼠和小鼠的同源性分别为100%,99.9%和99.9%。结论长爪沙鼠Eef1a2的核苷酸序列和氨基酸序列均与人、大鼠、小鼠高度同源。因此,长爪沙鼠可能是一种人类Eef1a2基因研究的理想模型。