摘要: 目的建立用大鼠胶质瘤细胞系(Rat glial cell line C6)替代大鼠原代胚细胞(Primary rat embryo cells,RE)来培养大鼠细小病毒(Kilham Rat Virus,KRV)的方法。方法将500 TCID50 KRV培养物接种到75T-C6细胞培养瓶中(细胞接种量为2×105/mL),培养过夜,待细胞病变CPE达++～+++时,分别用免疫荧光(FITC)鉴定所培养病毒的特异抗原,用血球凝集试验(HA)测定培养物上清的效价,用DNA测序鉴定所培养的病毒,最后用96孔板培养法测定KRV的TCID50。结果 KRV在接种到C6细胞的第4～5天,细胞发生明显的病变,CPE可达++++,FITC鉴定呈KRV抗原阳性,病毒的培养上清中HA效价为1∶5 120,测序结果表明,该病毒序列与NCBI中KRV序列同源性达98%,确定为KRV。收获的KRV的TCID50为104.6/0.1 mL。结论通过对C6细胞系培养KRV方法的标准化和对所培养病毒的一系列鉴定表明,用大鼠胶质瘤细胞系可以替代大鼠原代胚细胞系进行大鼠细小病毒的培养。

摘要: 目的比较多聚赖氨酸(PoLy lysine PLL)与鼠尾胶原对成骨细胞体外培养生长的影响。方法分别采用PLL和鼠尾胶原铺制培养皿,然后接种成骨细胞。于24 h、48 h、72 h镜下观察细胞形态及占培养皿面积的百分比。结果 24 h PLL组,细胞贴壁呈均匀分布状,贴壁面积比为(30.6±12.9)%;鼠尾胶原组细胞贴壁呈团状,贴壁面积比为(42.5±15.7)%,两者比较差异显著(P<0.05);48 h PLL组,细胞呈均匀分布生长,贴壁面积比为(43.8±14.5)%;鼠尾胶原组,细胞团相互连接,生长面积比为(61.3±17.1)%,差异极显著(P<0.01);72 h PLL组细胞相互连接生长面积比为(56.3±15.4)%;鼠尾胶原组,细胞连成片,生长面积比为(94.4±14.1)%,两者比较差异极显著(P<0.01)。结论对体外培养成骨细胞鼠尾胶原促贴壁生长比PLL更为适宜。

摘要: 目的建立一种简便、快捷的豚鼠气管平滑肌细胞培养方法。方法幼年豚鼠气管平滑肌组织块原代培养法。结果豚鼠气管平滑肌组织块贴壁5～8 d后可见细胞自组织块周围长出,细胞长梭形,核位于中央,呈辐射状向四周生长。两周后细胞长满瓶壁。经α-平滑肌肌动蛋白单克隆抗体(α-smooth muscle actin monoclonal antibody,α-SMA)免疫组化染色鉴定,获得的细胞为平滑肌细胞。结论豚鼠气管平滑肌组织块培养法可快速获得数量充足的气管平滑肌细胞。

摘要: 目的利用人工合成的PCR随机引物,对本单位培育的HFJ和MIJ近交系大鼠基因组DNA进行扩增,建立HFJ和MIJ大鼠RAPD扩增特征图谱;选择常用近交系大鼠Lewis和F344作为对照品系,观察HFJ和MIJ大鼠与对照品系大鼠的RAPD多态性。方法用酚-氯仿法分别提取4个不同品系大鼠的基因组DNA,从60条随机引物中筛选能够得到清晰扩增条带的30条引物,对HFJ和MIJ大鼠DNA进行扩增。再从30条引物中随机选择12条,对4个品系大鼠基因组DNA扩增,并对扩增条带多态性比较分析。结果 30条引物对HFJ和MIJ大鼠DNA进行扩增,均能获得1～7个较清晰条带,除引物O～08外,条带的分子大小均在200～1 100 bp之间,两品系的引物O-08扩增结果,均在2 000 bp以上的近原点处扩增出1条清晰的条带。HFJ和MIJ大鼠品系内个体间和两个品系之间,扩增的结果均完全一致;用12条随机引物对4个品系大鼠同时扩增,HFJ和MIJ大鼠扩增结果一致,与Lewis和F344比较,有5个引物出现差异条带。结论用30条随机引物建立了HFJ和MIJ大鼠RAPD扩增特征性图谱。由于两品系来源于同一对Wistar封闭群大鼠,虽然遗传特性有显著差异,但是在所选30条引物扩增时,未发现多态性。两品系与Lewis和F344之间存在多态性条带。

摘要: 目的对30日龄的Fmr1基因敲除小鼠的跳台实验进行观察。方法采用30日龄的KO鼠和WT鼠分别连续进行2 d的跳台实验,根据所获得的数据进行多因素方差分析处理。结果同周龄KO鼠的潜伏期比WT鼠明显少(P<0.05);而KO鼠的错误次数比WT鼠明显多(P<0.05);不同周龄KO鼠或WT鼠的潜伏期、错误次数无差异(P>0.05);第1天KO鼠的潜伏期和错误次数与第2天相比无差异(P>0.05);第1天WT鼠的潜伏期和错误次数与第2天相比有显著差异(P<0.05)。结论 30日龄Fmr1基因敲除小鼠存在认知功能障碍。