摘要: 目的 探讨人参皂苷Rg1在创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）小鼠模型血脑屏障、神经炎症、行为学功能等方面的作用。方法 实验分2部分。第一部分是将27只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为空白组、假手术组、TBI模型组，每组9只；TBI模型组开颅后采用受控皮质冲击（controlled cortical impact,CCI）方式造模，假手术组只开颅不进行打击，空白组不经任何处理；手术后进行造模效果评价。第二部分是将40只雄性BALB/c小鼠随机分为假手术组、3个剂量的人参皂苷Rg1治疗组和溶剂DMSO对照组，每组8只小鼠。Rg1治疗组在TBI建模成功后6 h腹腔注射剂量分别为10、20、40 mg/kg的人参皂苷Rg1，而DMSO对照组给予等量的1%DMSO，持续给药1周，每天2次。于造模后1、3、7、14 d分别进行改良的神经损伤严重程度评分（modified neurological severity scores,mNSS）；取造模后第3天的小鼠脑组织，采用蛋白质印迹法检测血脑屏障渗漏情况；第14、16天分别采用高架十字迷宫实验、水迷宫实验检测小鼠神经行为功能；第28天麻醉、灌注后取脑，免疫荧光染色观察小胶质细胞、星形胶质细胞活化等神经炎症。结果 人参皂苷Rg1治疗组的血脑屏障标志物MMP-9表达量减少（P<0.01），小胶质细胞（Iba-1阳性表达）和星形胶质细胞（GFAP阳性表达）数量均明显减少（P<0.05），提示神经炎症得到抑制，且以20 mg/kg剂量效果最好（P<0.01）。人参皂苷Rg1治疗组小鼠的mNSS评分显著低于溶剂DMSO对照组（P<0.01），进入开放臂次数比例显著高于DMSO对照组（P<0.05）；其在水迷宫实验平台所在象限的时间比及穿越平台的次数均显著多于DMSO对照组（P<0.05），且均以20 mg/kg剂量效果最佳。结论 成功构建TBI小鼠模型并用于人参皂苷Rg1的损伤修复研究。人参皂苷Rg1能够显著改善TBI模型小鼠血脑屏障，减轻神经炎症，发挥改善神经行为功能的作用，且以20 mg/kg剂量作用效果最为显著。

摘要: 目的 分析奥氮平给药组与对照组的小鼠脑组织的转录组测序结果，筛选出差异表达基因，探索非典型抗精神病药奥氮平导致体重增加的潜在作用靶点。方法 20只雌性C57BL/6小鼠被随机分为对照组和奥氮平给药组，分别给予生理盐水和奥氮平溶液灌胃，8周后留取全脑组织进行转录组测序（transcriptome sequencing,RNA-Seq）。通过对测序结果进行基因本体论（gene ontology,GO）功能注释分析和基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and gnomes,KEGG）途径富集分析以及蛋白互作（protein-protein interaction,PPI）网络分析等，寻找奥氮平诱导体重增加的可能靶点，并通过实时荧光定量PCR法进行验证。结果 对照组和奥氮平给药组的差异表达基因共591个，其中上调基因251个，下调基因340个。GO分析显示差异基因广泛参与转录过程，其中消化系统的调节和冷诱导的产热相关基因表达属于显著富集项目。KEGG分析显示差异基因广泛参与神经活性物质与受体之间的相互作用，差异基因显著富集在催产素信号、脂肪的消化吸收以及胆固醇代谢通路。实时荧光定量PCR结果表明，富集在摄食调控、胃运动、产热、脂肪代谢等过程的基因（Oxt、Trpv1、Adipoq、Phox2b、Abcg5、Mogat2、Dbh、Plac8、Neurog1）以及PPI网络中的枢纽基因（Fos、Dusp1、Egr2）的表达改变与RNA-Seq趋势一致。结论 奥氮平给药导致小鼠中枢的摄食调控、胃肠运动、产热等生理过程发生改变，这些改变可能参与了奥氮平诱导的体重增加。

摘要: 神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）是儿童最常见的实体恶性肿瘤，居我国儿童肿瘤发病率第四位，占儿童肿瘤死亡人数的15%，高危患者存活率低。目前对于NB的发病及药物治疗机制知之甚少。NB动物模型可以表征NB发展特征，是研究预防和治疗NB的重要工具，然而尚未有一种动物模型可以模拟人类NB的所有特征。本文介绍了当前研究较多的几种NB动物模型（小鼠模型、鸡胚绒毛尿囊膜模型和斑马鱼模型），并对每种NB动物模型的种类、构建方法、特征、优缺点及研究进展做了详细阐述，同时对NB的应用方向及前景进行概括，以期为NB动物模型构建和NB治疗等提供理论依据。

摘要: 目的 建立更准确、灵敏的液相色谱紫外（liquid chromatography-ultraviolet,LC-UV）检测大鼠血清尿酸的方法，并将该方法与市售试剂盒的检测结果进行比较，为氧嗪酸钾诱导的大鼠高尿酸血症模型中血清尿酸含量的准确测定提供新方法。方法 采用向SPF级雄性SD大鼠腹腔注射氧嗪酸钾（300 mg/kg）的方法建立高尿酸血症大鼠模型，对照组给予等量的0.5%羧甲基纤维素钠溶液。经眼眶后静脉丛采血，离心获得大鼠血清样品，经0.1%三氟乙酸-乙腈（含内标3,4-二羟基苄胺氢溴酸盐）沉淀后，取上清液进样分析。采用Waters XBridge HILIC色谱柱（150 mm×4.6 mm,3.5μm）对尿酸进行分离，使用乙腈（含0.5%甲酸与2 mmol/L甲酸铵）作为有机相，甲醇溶液（甲醇∶水=1∶1，含0.5%甲酸与2 mmol/L甲酸铵）作为水相，进行等度洗脱，于290 nm波长处进行检测。使用活性炭处理的血清样品作为空白生物基质，用于方法学验证。分别使用所建立的LC-UV方法与两种市售试剂盒（尿酸酶法和磷钨酸法）检测高尿酸血症模型大鼠的血清尿酸水平，并对3种检测方法的准确度进行比较。结果 大鼠血清中的尿酸在10～200μg/mL质量浓度内线性关系良好（R>0.999），定量下限为10μg/mL，准确度为-2.17%～2.21%，批内精密度为0.52%～1.95%，批间精密度为3.04%～4.90%，提取回收率为83.12%～89.91%。在氧嗪酸钾诱导的大鼠高尿酸血症模型中，市售的磷钨酸法试剂盒测定结果显著高于LC-UV法测定结果，市售的尿酸酶法试剂盒测定结果显著低于LC-UV法测定结果，但LC-UV方法的加样回收率结果最佳（95.90%～99.96%）。结论 所建立的LC-UV方法能够准确测定大鼠血清中尿酸含量，与市售试剂盒相比具有更高的准确度，推荐作为氧嗪酸钾诱导的大鼠高尿酸血症模型中血清尿酸含量的检测方法。

摘要: 目的 通过增强血管内皮生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR）人源化小鼠(hKDR^+/+)接纳不同来源的小鼠肿瘤细胞系的潜力，建立能支持多种肿瘤细胞系成瘤的、可评价针对VEGFR靶点药物的新型荷瘤小鼠模型。方法 首先建立基于hKDR^+/+人源化小鼠模型评价针对VEGFR靶点抗体体内活性的方法，同时采用CRISPR/Cas9技术构建重组激活基因1 （recombination activating gene 1,Rag1）敲除的C57BL/6N小鼠(命名为Rag1^-/-小鼠)。然后将Rag1^-/-小鼠与hKDR^+/+小鼠交配，筛选获得双基因纯合、双靶点基因修饰的hKDR^+/+/Rag1^-/-小鼠。最后在hKDR^+/+、Rag1^-/-、hKDR^+/+/Rag1^-/-和C57BL/6N小鼠上测试不同小鼠品系来源肿瘤细胞系的体内肿瘤生长差异。结果 针对VEGFR靶点设计的抗体在hKDR^+/+小鼠体内表现出明显的抗肿瘤活性，与PBS组相比，肿瘤体积明显减小（P<0.01），肿瘤质量明显减轻（P<0.05）。Rag1^-/-小鼠、hKDR^+/+/Rag1^-/-小鼠的外周血B细胞和T细胞数量均明显减少（P<0.05,P<0.001）。C57BL/6小鼠来源的MC38细胞接种7 d后，在hKDR^+/+/Rag1^-/-、Rag1^-/-、C57BL/6N和hKDR^+/+四组小鼠体内均可见肿瘤生长。BALB/c小鼠来源的CT26细胞接种10 d后，仅在hKDR^+/+/Rag1^-/-和Rag1^-/-小鼠体内见到肿瘤生长，在C57BL/6N及hKDR^+/+小鼠中均未见肿瘤生长；接种后3周，hKDR^+/+/Rag1^-/-小鼠的成瘤体积明显大于Rag1^-/-小鼠（P<0.01）。结论 获得了Rag1基因敲除小鼠，并进一步筛选获得新型hKDR^+/+/Rag1^-/-双靶点基因修饰小鼠模型；Rag1基因缺失时，不同品系小鼠来源的肿瘤细胞系更易成瘤。这提示可以通过降低hKDR^+/+人源化小鼠的免疫反应能力，增强或扩大该模型小鼠接纳肿瘤细胞系的范围，构建多种可用于评价VEGFR靶点药物的荷瘤小鼠模型。