摘要: 目的 通过小鼠肺炎病毒（pneumonia virus of mice,PVM）感染近交系BALB/c小鼠建立病毒感染肺炎动物模型，观察PVM感染过程中促炎症警报素分子高迁移率族蛋白B1 （high mobility group box 1,HMGB1）的变化，以及HMGB1抑制剂甘草酸（glycyrrhizic acid,GA）对小鼠肺脏感染损伤的在体干预作用。方法 将3周龄的雌性BALB/c小鼠随机分为3组，每组6只。一组未经PVM感染，作为对照组（Control）；另外两组先以1×10～4半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infective dose,TCID₅₀)/25μL剂量滴鼻接种PVM，然后分别给予GA生理盐水溶液灌胃（GA组）或单纯生理盐水灌胃（normal saline,NS组）处理，连续15 d。其间，观察并记录各组小鼠体重、外观等改变。在实验终点采集各组小鼠的肺脏组织样本，通过苏木精-伊红染色和免疫组织化学法检测小鼠肺脏组织内PVM和HMGB1蛋白的分布情况；通过实时荧光定量PCR法检测小鼠肺脏组织中HMGB1、Toll样受体4 （Toll-like receptor 4,TLR-4）、晚期糖基化终产物特异性受体（advanced glycosylation end-product-specific receptor,AGER），以及白细胞介素（interleukin,IL）-1β、IL-2和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）等炎症因子的表达水平。结果 与Control组相比，NS组小鼠6 d后体重显著下降（P<0.05），组织病理学结果显示其肺脏有明显的炎症病变，免疫组织化学结果显示HMGB1从细胞核释放至细胞质，实时荧光定量PCR结果显示HMGB1、IL-1β和IL-2的表达水平均显著上调（P<0.05）;GA干预组的临床症状和体重无明显变化。而与NS组相比，GA干预组肺组织的病理损伤明显减轻，且肺组织中HMGB1、IL-1β、IL-2和干扰素γ（interferon-γ,IFN-γ）的表达水平显著下降（P<0.05），但AGER的表达水平显著增高（P<0.05）。结论 PVM感染能引起明显的小鼠肺部炎症性病理损伤，而GA能有效减轻其损伤，其作用机制可能与激活HMGB1信号通路相关。

摘要: 目的 通过慢性不可预知性应激（chronic unpredictable stress,CUS）联合完全弗氏佐剂（complete Freund's adjuvant,CFA）和福尔马林诱导建立妊娠期疼痛-抑郁共病小鼠动物模型，对其相关表型进行系统评价，并初步探究其共病的病理基础。方法 选择8周龄的C57BL/6J雌性小鼠，依据糖水偏好实验数据，采用随机分层方法将其分为对照组（妊娠前不干预）和CUS组（妊娠前予以CUS干预）。CUS造模完成后，将雌雄小鼠合笼配对，妊娠期小鼠分别于右后肢足底皮下注射50%CFA和5%福尔马林溶液，诱导建立妊娠期疼痛-抑郁共病小鼠模型。实验共分8组，即为对照-空白组、CUS-空白组、对照-CFA组、CUS-CFA组、对照-福尔马林组、CUS-福尔马林组、对照-CFA+福尔马林组、CUS-CFA+福尔马林组，每组10只。各组小鼠均在CUS干预前后、妊娠后和分娩后，通过糖水偏好实验、强迫游泳实验、悬尾实验和旷场实验评价行为学变化，并通过机械刺痛实验和热辐射痛实验测定各组小鼠对痛觉的敏感性变化；最后处死小鼠，用酶联免疫吸附法检测各组小鼠海马体中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)，以及血清皮质醇（cortisol）和促肾上腺皮质激素（adrenocorticotropic hormone,ACTH）的含量。结果 与对照-空白组相比，CUS-空白组模型小鼠产生了明显的抑郁样行为，并伴随痛阈明显降低（P<0.001）。与对照-空白组相比，对照-CFA+福尔马林组在CFA注射与福尔马林注射后均出现痛阈下降（P<0.01）。与对照-空白组和对照-福尔马林组相比，CUS-福尔马林组的痛阈明显降低（P<0.01），且三者依次下降。与对照-空白组和对照-CFA组相比，CUS-CFA组的痛阈明显降低（P<0.001），且三者依次下降。与对照-空白组、对照-CFA+福尔马林组相比，CUS-CFA+福尔马林组小鼠的机械痛阈显著降低（P<0.001）且三者依次下降，热辐射耐受时间缩短（P<0.01）且三者依次缩短。与对照-CFA+福尔马林组和CUS-空白组小鼠相比，CUS-CFA+福尔马林组小鼠的糖水偏好百分比显著降低（P<0.001），强迫游泳时不动时间显著延长（P<0.001），悬尾时不动时间也显著延长（P<0.001），在旷场中央探索的时间显著缩短（P<0.001），旷场探索总路程显著缩短（P<0.001），中央探索路程占比减少（P<0.001）。与对照-CFA+福尔马林组和CUS-空白组相比，CUS-CFA+福尔马林组小鼠血清皮质醇和ACTH水平显著升高（P<0.01），海马体中IL-6、TNF-α水平升高（P<0.05）。结论 CUS联合CFA和福尔马林注射可作为建立妊娠期疼痛-抑郁共病C57BL/6J小鼠模型的理想方法。该模型小鼠的行为学改变可能是通过调节海马区的炎症反应水平和下丘脑-垂体-肾上腺（hypothalamic–pituitary–adrenal,HPA）轴的激素水平导致的。

摘要: 目的 探讨微RNA (microRNA,miRNA或miR)-887-3p对大鼠椎间盘纤维环细胞增殖和凋亡的影响及其潜在的分子机制。方法 取8周龄SPF级雄性SD大鼠的纤维环组织，离心制备并鉴定纤维环细胞。实验随机分为4组：正常组（Normal group）是不做任何处理的原代纤维环细胞；对照组（Control group）用10 ng/mL白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)处理纤维环细胞24 h，形成退变细胞模型；干扰组（miR-887-3p inhibitor）是在对照组的基础上用Lipo3000转染miR-887-3p抑制子；过表达组（miR-887-3p mimics）是在对照组的基础上用Lipo3000转染miR-887-3p模拟物。采用CCK-8法检测各组细胞活力；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；实时荧光定量PCR法检测miR-887-3p和鼠双微体4 (murine double minute 4,MDM4) mRNA的表达；蛋白质印迹法检测MDM4、Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达水平。结果 免疫荧光染色法鉴定分离培养的细胞发现，大鼠椎间盘纤维环细胞中Collagen I的阳性率在90%以上，提示纤维环细胞纯度大于90%。实时荧光定量PCR结果显示，利用IL-1β构建纤维环退变细胞模型后，miR-887-3p表达水平与正常组相比显著上升（P<0.001）；与对照组相比，转染miR-887-3p抑制子后，miR-887-3p表达水平显著下降（P<0.001）。CCK-8法检测结果表明，与正常组相比，对照组细胞活力显著下降（P<0.001）；与对照组相比，抑制miR-887-3p的表达后，细胞增殖能力显著增强；miR-887-3p过表达后，细胞增殖能力显著下降。流式细胞仪检测结果表明，与正常组相比，对照组的细胞凋亡率显著增加（P<0.001）；与对照组相比，miR-887-3p干扰组的细胞凋亡率显著降低（P<0.001）,miR-887-3p过表达组的细胞凋亡率显著增加（P<0.001）。蛋白质印迹法检测结果发现，与正常组相比，对照组中Bcl-2的表达水平显著降低（P<0.001）,Caspase-3的表达水平显著升高（P<0.001）；与对照组相比，miR-887-3p干扰组中Bcl-2和MDM4表达水平显著升高（P<0.01）,Caspase-3的表达水平显著降低（P<0.01）；而miR-887-3p过表达组中Bcl-2和MDM4表达水平显著降低（P<0.05）,Caspase-3的表达水平显著升高（P<0.05）。实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹结果显示，干扰miR-887-3p后，MDM4蛋白和mRNA的表达增加（P<0.001）；过表达miR-887-3p后，MDM4蛋白和m RNA的表达降低（P<0.01,P<0.001）。结论 miR-887-3p可能通过调控MDM4的表达来影响大鼠椎间盘纤维环细胞的增殖和凋亡，进而影响椎间盘退变的发生和发展。

摘要: 目的 研究不同颗粒饲料硬度对实验小鼠生长繁殖性能、饲料利用率和笼内环境粉尘的影响。方法 选用3周龄的SPF级C57BL/6JGpt和ICR实验小鼠各150只，随机平均分成3组，雌雄各半，分别饲喂饲料硬度为18.62 kg (1 kg=9.8 N)、23.15 kg和27.89 kg的日粮，记录并计算3～10周龄小鼠体重增加量、饲料利用率和笼盒内粉尘量。另外，两个品系各选取45只6周龄雄鼠和90只4周龄雌鼠，随机平均分为3组，分别饲喂3种不同硬度的颗粒饲料。饲喂同一种硬度饲料的同品系小鼠适应2周后，以1∶2的比例雄雌合笼饲养，3个月内每周统计每个繁殖笼内动物繁殖信息。结果 C57BL/6JGpt小鼠4周龄时，饲料硬度23.15 kg组的雄鼠体重显著高于饲料硬度为18.62 kg和27.89 kg组（P<0.01），饲料硬度18.62 kg组的雌鼠体重显著高于27.89 kg组（P<0.05）；不同饲料硬度组间3～10周龄ICR小鼠的体重无显著差异（P>0.05）。饲喂不同硬度饲料组中，两个品系各周龄雄鼠的饲料利用率均高于雌鼠（P<0.01）。与饲料硬度27.89 kg组相比，饲料硬度18.62 kg组和饲料硬度23.15 kg组4～8周龄（除7周龄C57BL/6JGpt小鼠外）两品系笼盒内50目粉尘量均显著增加（P<0.05）。C57BL/6JGpt和ICR小鼠在实验周期内初产胎间隔及月生产指数等基本繁育性能在3种不同硬度饲料组间均无显著差异（P>0.05）；但C57BL/6JGpt小鼠月生产指数随饲料硬度升高先增加后降低，ICR小鼠月生产指数则随饲料硬度升高而增加，但差异尚无统计学意义（P>0.05）。结论 不同品系、不同性别的实验小鼠对饲料硬度的耐受性不同，其中C57BL/6JGpt小鼠适合选择较低硬度的饲料，而ICR小鼠适合选择略高硬度的饲料。

摘要: 目的 用同种异体移植的方法构建大鼠子宫内膜异位症模型，并评价促性腺激素释放激素（gonadotropinreleasing hormone,GnRH）激动剂GenSci006对实验大鼠子宫内膜异位症模型的影响。方法 取供体SPF级雌性SD大鼠的子宫内膜移植于受体雌性大鼠的腹腔壁上，构建同种异体的子宫内膜异位症模型。3周后，测量异位内膜的长、宽、高，计算给药前异位内膜的体积V₁。将进行假手术操作的大鼠设为假手术组，将造模大鼠随机分为模型组、曲普瑞林组（0.25 mg/kg）、GenSci006-1组（0.125 mg/kg）和GenSci006-2组（0.25 mg/kg）共4组，每组大鼠16只。各组大鼠单次给予相应的药物，假手术组和模型组给予同等体积的溶剂。3周后，再次测量异位内膜，计算给药后异位内膜的体积V₂和抑制率；通过比较脏器系数及病理切片的变化，判断GenSci006对大鼠子宫和卵巢组织的影响；ELISA法测定血清中雌二醇（estradiol,E₂）、孕酮（progesterone,P₄）、卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）和黄体生成素（luteinizing hormone,LH）水平的变化；实时荧光定量PCR法测定下丘脑和垂体中GnRH受体（GnRH receptor,GnRHR） mRNA的表达水平。蛋白质印迹法检测异位内膜组织中雌激素受体（estrogen receptor,ER）α、ERβ和孕激素受体（progesterone receptor,PR）蛋白的表达。结果 给药3周后发现，与模型组相比，曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠的体重显著增加（P<0.05），而异位内膜的体积显著减小（P<0.05）。与假手术组相比，模型组子宫、卵巢脏器系数及子宫内膜厚度无明显变化（P>0.05）；与模型组相比，曲普瑞林组和GenSci006-2组子宫脏器系数及子宫内膜厚度显著降低（P<0.05）。与假手术组相比，模型组血清中E₂、P₄、FSH、LH水平无明显变化（P>0.05）；与模型组相比，曲普瑞林组、GenSci006-1组和GenSci006-2组大鼠的卵巢脏器系数和血清P₄水平均显著降低（P<0.05），而GenSci006-1组大鼠的血清LH水平明显升高（P<0.05），但各组血清E₂和FSH水平并无显著变化（P>0.05）。与模型组相比，曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠垂体GnRHR mRNA表达水平显著下调（P<0.05）；各组大鼠下丘脑组织中GnRHR mRNA表达及异位内膜组织中ERα、ERβ、PR蛋白表达水平无明显变化（P>0.05）。结论 大鼠同种异体子宫内膜异位症模型适宜作为筛选和评价子宫内膜异位症治疗药物的动物模型，而且异位内膜体积、抑制率、子宫及卵巢脏器系数、血清E₂水平均可作为检测药物疗效的指标。