摘要: 【目的】本研究旨在考察ZnFe₂O₄纳米颗粒对烟碱型乙酰胆碱受体突变型（Rye）黑腹果蝇Drosophila melanogaster寿命和发育的影响。【方法】针对Rye黑腹果蝇设置了3组ZnFe₂O₄纳米颗粒暴露处理（分别含200, 400和600μg/mL ZnFe₂O₄）,并监测其成虫寿命，同时收集产生的F₁代记录其发育情况，检测亲代Rye果蝇成虫的氧化应激水平。【结果】ZnFe₂O₄纳米颗粒暴露后黑腹果蝇亲代成虫寿命缩短，F₁代化蛹进程加快、羽化的成虫数减少、雌雄比例上升。与无ZnFe₂O₄的对照组相比，400和600μg/mL ZnFe₂O₄纳米颗粒暴露下，雌成虫寿命分别缩短了9%和24%,雄成虫寿命分别缩短了7%和31%; F₁代在暴露于200-600μg/mL ZnFe₂O₄纳米颗粒时前3 d化蛹率提升了34%～109%;暴露于400和600μg/mL ZnFe₂O₄纳米颗粒后羽化的雌成虫数分别减少了33%和53%,羽化的雄成虫数分别减少了21%和59%,雌雄性别比分别上升40%和71%。对亲代Rye黑腹果蝇的氧化应激水平分析结果显示，200-600μg/mL ZnFe₂O₄纳米颗粒暴露引起氧化损伤，显著提高雌雄成虫体内抗氧化酶包括过氧化氢酶（catalase, CAT）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活性，引起雌雄成虫体内总抗氧化能力（total antioxidant capacity, T-AOC）显著增强，并造成雄成虫体内活性氧（reactive oxygen species, ROS）显著积累。【结论】200-600μg/mL ZnFe₂O₄纳米颗粒暴露可引发Rye黑腹果蝇产生氧化应激响应，缩短成虫寿命，减少后代数量，造成氧化损伤，同时发现ZnFe₂O₄纳米颗粒暴露对Rye黑腹果蝇雄成虫的影响更为显著。本研究丰富了对昆虫响应锌铁氧体纳米材料暴露的机制的认识，为合理评估锌铁氧体纳米材料对昆虫的影响提供了参考。

摘要: 【目的】检验现有的无菌和悉菌黑腹果蝇Drosophila melanogaster操作技术在昆虫中应用的广普性，并通过此技术解析共生菌对黑腹果蝇和黑水虻Hermetia illucens生长发育的促进作用。【方法】利用Walch-次氯酸-乙醇改进型无菌操作技术，用黑水虻、亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis和东方粘虫Mythimna separata卵进行可行性验证，并优化黑水虻无菌操作技术；使用LB固体培养基分离黑腹果蝇肠道细菌；利用16S rRNA基因测序鉴定黑腹果蝇肠道细菌；体内定殖和世代传递实验验证黑腹果蝇肠道细菌与黑腹果蝇的共生关系；建立悉生黑腹果蝇和黑水虻模型，记录黑腹果蝇的发育历期和生长速率来验证黑腹果蝇肠道细菌对黑腹果蝇和黑水虻生长的促进作用；利用qRT-PCR检测黑腹果蝇2和3龄幼虫体内蜕皮激素信号通路相关基因(PTTH和E74B)的表达量。【结果】与传统的无菌操作技术比较，改进型无菌操作技术提高了建立无菌昆虫的效率；通过改变次氯酸处理时间优化无菌黑水虻操作技术，可将该方法推广到卵粘性低和卵壳较厚的昆虫中。从黑腹果蝇肠道中分离出的细菌经鉴定为拉恩氏布鲁奇菌Rahnella bruchi,该细菌能在黑腹果蝇肠道内稳定定殖，并能在世代间垂直传递。拉恩氏布鲁奇菌显著缩短黑腹果蝇的发育历期，提高黑腹果蝇羽化率和生长速率。肠道共生菌拉恩氏布鲁奇菌能显著缩短黑水虻的发育历期。在分子水平上，拉恩氏布鲁奇菌能显著提高黑腹果蝇2和3龄幼虫体内PTTH和E74B的表达量。【结论】优化后的无菌操作技术对卵壳较厚、卵粘性低的昆虫效果相对较好。拉恩氏布鲁奇菌是黑腹果蝇的有益共生菌，可以因果性地促进黑腹果蝇生长和发育。拉恩氏布鲁奇菌能够促进黑水虻的生长发育。

摘要: 【目的】沃尔巴克氏体Wolbachia是一类母系遗传的革兰氏阴性菌，是昆虫中最常见的胞内共生菌之一，可通过多种方式影响宿主的生殖和行为，但其影响机制还不甚清楚。本研究旨在探讨一种毒力较强的Wolbachia菌株wMelPop侵染对雄性黑腹果蝇Drosophila melanogaster肠道细菌的影响。【方法】解剖感染wMelPop的黑腹果蝇(Pop+)和未感染的黑腹果蝇(Pop-)雄成虫完整肠道，提取总DNA,利用Illumina NovaSeq平台对肠道细菌16S rDNA基因的V3-V4区进行测序，比较分析Pop+和Pop-肠道细菌的物种组成、丰度及α多样性，并通过qPCR验证表达量具有显著差异的3个属的6种肠道微生物高通量测序数据的有效性。【结果】α多样性分析显示，wMelPop侵染提高了雄性黑腹果蝇肠道细菌丰度，降低了肠道菌的多样性。Pop-肠道中，优势菌属是不动杆菌属Acinetobacter、假单胞菌属Pseudomonas、醋杆菌属Acetobacter和嗜盐单胞菌属Halomonas。与Pop-相比，Pop+肠道中假单胞菌属的相对丰度显著下调，而醋杆菌属和乳杆菌属Lactobacillus的相对丰度显著上调。qPCR验证结果显示，与Pop-相比，Pop+肠道中总细菌16S rDNA基因表达量极显著上调，Pop+肠道中番茄醋酸杆菌A.pomorum的16S rDNA基因表达量下调至Pop-的0.7倍，Pop+肠道中热带醋酸杆菌A.tropicalis的16S rDNA基因表达量比Pop-的上调约3 700倍，果状乳杆菌L.frutivorans、植物乳杆菌L.plantarum和短乳杆菌L.brevis的16S rDNA基因表达量均显著上调，其中果状乳杆菌16S rDNA基因表达量上调的倍数最高，约为Pop-的23 000倍，产碱假单胞菌P.alcaligenes的16S rDNA基因表达量下调至Pop-的0.6倍，这些结果与16S rDNA测序结果的趋势基本一致。【结论】wMelPop的侵染显著影响了雄性黑腹果蝇肠道细菌的相对丰度。其中，醋杆菌属和乳杆菌属的肠道菌载量显著升高，这可能是wMelPop感染影响昆虫宿主生殖和行为的机制之一。

摘要: 目的 构建基于ΦC31整合酶和载体质粒pUASTattB的果蝇转基因系统的阴性对照品系，为转基因果蝇研究实验提供更科学的阴性对照。方法 用显微注射法将载体质粒pUASTattB （可携带目的基因完成定点插入的常用载体质粒）转入携带ΦC31整合酶的4种不同遗传背景的果蝇品系attP-25C6、attP-68A4、attP-75B1和attP-86F8胚胎中，培养获得G0代成虫后将每只G0代成虫分别与平衡子果蝇品系ywR13S做单管杂交（每管中G0代成虫1只与ywR13S 3只进行杂交），通过观察G1代果蝇的复眼颜色，判断是否有mini-White插入，计算成功插入的概率。再选取成功插入mini-White的G1代果蝇成虫与3种平衡子果蝇品系DB、ywR13S和yw122分别做单管杂交（1只G1代雄果蝇与3只平衡子品系处女蝇杂交），平衡保种。提取保种好的果蝇品系基因组DNA，用PCR法鉴定载体质粒pUASTattB转入情况。结果 4种不同遗传背景的果蝇成功显微转入pUASTattB质粒后，再用3种平衡子果蝇品系进行平衡保种，得到12株果蝇品系，均为携带mini-White标记的红眼果蝇，PCR鉴定表明有p UASTattB序列插入。结论 12株转基因果蝇品系可基本满足以pUASTattB为载体构建的转基因果蝇研究实验的阴性对照需求，丰富了国家果蝇资源中心的果蝇资源。

摘要: 目的研究饮食中糖分控制对雌黑腹果蝇寿命和中肠干细胞的影响,以期给女性树立正确科学的饮食观念提供一定的指导。方法用不同糖分食物喂养雌黑腹果蝇,称体质量,记录存活数目,解剖中肠进行免疫荧光染色。结果随着年龄的增长,正常组(以正常培养基含糖量为100%糖分)和高糖组(正常组糖分基础上增加20%糖分)雌黑腹果蝇体质量均呈现先缓慢上升, 21 d后快速上升趋势,高糖组体质量增长高于正常组。高糖喂养后用糖分梯度递减培养基喂养,体质量随着糖分减少呈先下降后上升趋势,体质量增长最慢的是用50%糖分培养基喂养。随着处理时间的延长,雌黑腹果蝇在前14 d基本没有死亡,14 d以后,死亡数量剧增,21 d以后呈直线下降趋势。梯度糖分控制后,雌黑腹果蝇平均寿命有不同程度的增加,高糖喂养后喂食50%糖分培养基寿命增长最明显。喂养28 d的雌黑腹果蝇,高糖组肠道比正常组增粗,细胞形态变化大,排列无序,高糖喂养后用糖分梯度培养基喂养,50%和25%糖分处理组恢复效果较好,但不能恢复到正常饮食组状态。结论糖分对雌黑腹果蝇的体质量、寿命和中肠干细胞形态和分布都有一定的影响。适当减少糖摄入量对果蝇体质量增长有减缓作用,对寿命有增加作用,中肠损伤相对较轻。