摘要: 本文用计算机鸣声分析技术对杭州地区的黑斑蛙、泽蛙和饰纹姬蛙的鸣声进行了分析。黑斑蛙鸣声一般由４个较长的脉冲组成，每个脉冲持续时间３０－５０ｍｓ，脉冲率（ＰＲ）８－１１个／ｓ。每声持续时间３７０－５１０ｍｓ，各脉冲的能量主要集中在３个能峰上，主能峰位于２．０－２．４ｋＨｚ之间。泽蛙鸣声由６－７个前后紧接的纺锤形的脉冲串组成，ＰＲ为７１．７次／ｓ，每声持续时间８４．２５±７．１２ｍｓ，主峰频率为１．３９５±０．０２３ｋＨｚ。但嵊泗岛上的泽蛙在鸣声的结构、频谱与时域特征上有些差异。在泽蛙的变音鸣声中，纯音占大部分，纯音的频率约为１．２８ｋＨｚ。饰纹姬蛙的鸣声由１１－１３个间隔较开的减幅振荡脉冲组成，每个脉冲持续时间１６．０６±２．０８ｍｓ，ＰＲ为３６．２３次／ｓ，每声持续时间３０８．６４±２２．９３ｍｓ，主峰频率为１．３６±０．０２ｋＨｚ。但与安徽宣城地区饰纹姬蛙的分析结果差异较大。３种蛙鸣声的波形结构和频谱特性各不相同，可能与它们的声囊构造有关。不同的地区蛙鸣声物理结构上的差异，可能是环境差异所致。

摘要: 黑斑蛙是我国分布最广的两栖动物之一,但目前有关其繁殖生态和产卵地选择还所知甚少,而且多局限于定性描述。2004—2006年在宁波地区黑斑蛙的繁殖期,对黑斑蛙的繁殖生态研究分析表明,该蛙在繁殖期的种群密度为0.0903±0.0029只/m(n=11);该蛙是雌雄二形性的蛙类,雌性蛙类的体重和体长都显著大于雄性;该蛙窝卵数的变化幅度较大(1546—7897个),平均窝卵数为4643.04±235.96个(n=50);卵径范围为1.50—1.74mm,平均卵径大小为1.6050±0.0046mm(n=226)。对黑斑蛙产卵地选择的研究结果表明,产卵地在水域比率、裸地比率、植被盖度、水深、水温和水的透明度等方面与随机样方不同;该蛙偏爱在水域比率和植被盖度较高的生境产卵,而避免在水体较深的生境产卵。为了更好地保护黑斑蛙的产卵栖息地,今后应优先保护水域比率和植被盖度较高而水体不深的生境。

摘要: 采用SMART(switching mechanismat 5 end of RNA transcript)技术构建了黑斑蛙(Rana nigromaculata)精巢组织全长cDNA文库。一步法提取成体蛙精巢组织总RNA,用PowerscriptTM反转录酶逆转录合成第一链cD-NA;再用LD-PCR合成双链cDNA;经过SfiⅠ酶切和Chroma spin-400柱分离后,500bp以上的片段与λTriplEx2载体连接,再用GigapackⅢGold Packaging Extract包装蛋白包装,即获得原始文库。原始文库进行扩增后得到扩增文库。经检测原始文库的滴度分别为2.0×106pfu/mL和2.4×106pfu/mL,扩增后的文库滴度分别为0.48×109pfu/mL和3.0×109pfu/mL,重组率均在90%以上。通过E.coliBM25.8菌株将文库转化为pTriplEx2质粒,挑选一阳性克隆进行PCR检测,其插入片段平均长度约为1.0kb。挑取一阳性克隆分别从5′端和3′端进行测序,得到一长约1171bp的序列。经序列分析知,该序列含有完整的编码框,可编码305个氨基酸,是一全长cDNA序列。提示所建文库是可以用于全长cDNA的筛选。结果表明,所构建的黑斑蛙精巢组织cDNA文库的各项指标均满足建库的基本要求。该文库将为蛙类及两栖类的已知或未知的功能基因及新基因的获得及其研究提供可靠资源;另外,该文库还将为研究蛙类动物的性别决定和分化相关基因及其表达提供直接的分子资料。