摘要: 采用Y型嗅觉仪进行双向选择实验,研究了用替代寄主黄粉虫蛹繁殖的川硬皮肿腿蜂寄主搜索过程中的学习行为。结果表明,川硬皮肿腿蜂羽化期和成虫初期经历松枝皮、松针、松节油、杉枝皮等的挥发物后,雌蜂对这些挥发物的选择性明显提高,但对杉叶挥发物无明显的学习行为。羽化期和成虫初期是否投放新鲜寄主,对雌蜂的气味选择性没有明显的影响。成蜂取食黄粉虫蛹和蜂蜜时均可联系性学习松枝和杉枝气味。取食并经历杉枝和松枝挥发物4天和8天的寄生蜂之间对相应气味的选择性无显著差异。

摘要: 采用中性盐沉淀、凝胶层析等常规方法纯化黄粉虫Tenebrio molitor血淋巴中的β-1,3-葡聚糖识别蛋白,并对其在酚氧化酶原激活系统中的作用进行了初步的研究。结果表明:黄粉虫血淋巴的β-1,3-葡聚糖识别蛋白的分子量约为70kDa,主要分布于血浆中。纯化的β-1,3-葡聚糖识别蛋白只能特异性地识别β-1,3-葡聚糖而不能识别肽聚糖。在β-1,3-葡聚糖所诱导的酚氧化酶原的激活过程中,随着酚氧化酶原激活程度的提高,内源性β-1,3-葡聚糖识别蛋白的含量逐渐减少。抗β-1,3-葡聚糖识别蛋白多克隆抗体对黄粉虫血淋巴中由β-1,3-葡聚糖所诱导的酚氧化酶活性起抑制作用,且该抑制作用呈现一种剂量依赖性的趋势。上述结果有助于深入了解β-1,3-葡聚糖对黄粉虫血淋巴酚氧化酶原激活系统的激活作用。

摘要: 用酶标仪法测定了槲皮素对黄粉虫Tenebrio molitor酚氧化酶(phenoloxidase,PO)的生物活性。结果表明:在离体条件下,对黄粉虫血淋巴PO的IC50为0.625mmol/L。在活体情况下,当槲皮素-DMSO溶液或槲皮素水悬浮液(5μL)注入虫体后,在浓度低于1.0mmol/L时对黄粉虫血淋巴PO具有激活作用,当浓度高于2.0mmol/L时则对PO具有明显的抑制作用;单独注射5μL DMSO溶液对PO活性亦有一定的激活作用。试虫被注射槲皮素后,PO活性在24h内迅速下降,然后缓慢上升,处理8h左右达到最高点,其后低浓度处理PO活性保持不变,而高浓度处理则逐渐下降,提示低浓度槲皮素可以引起试虫的免疫反应。在PO测活体系中加入0.5%的BSA后对PO活性无影响,并能使槲皮素在测活体系中保持稳定。

摘要: 昆虫抗菌肽具有广谱抗菌活性,克隆黄粉虫Tenebrio molitor抗菌肽基因,进行原核表达和活性检测,为昆虫抗菌肽推广应用奠定一定基础。根据GenBank公布的黄粉虫抗菌肽序列设计特异引物,以RT-PCR法从黄粉虫体内克隆了抗菌肽基因TmAMP3,将其亚克隆至pET-30a表达载体中,转化到大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行原核表达,SDS-PAGE检测融合蛋白的表达,同时检测生物活性。结果表明我们成功构建了重组质粒pET-30a-TmAMP3,大部分目的蛋白呈可溶性分泌表达。经Ni2+亲和层析,获得较纯融合蛋白HIS-TmAMP3,诱导表达的融合蛋白使BL21转化菌生长受到一定程度的抑制。融合蛋白在100℃煮沸10h、与pH212的缓冲液混匀后,依然保持稳定的抗菌活性,具有较强的稳定性。同时检测了融合蛋白对5种菌株的最小抑菌浓度(minimun inhibitory concentration,MIC)。本研究为具有稳定活性抗菌肽进行大规模生产发酵提供了理论基础。

摘要: 黄粉虫Tenebrio molitorL.是一种重要的资源昆虫,根据60日龄幼虫的体壁颜色,通过连续12代的自然选育,获得了黄、黑2种色型黄粉虫。为进一步给黄粉虫优良品种培育提供科学的理论依据,本实验首先对选育出的2种色型黄粉虫的生长发育、存活及饲料利用效率进行了比较研究。结果表明:2种色型黄粉虫的孵化率和化蛹率均约为83%和97%,无显著差异;但黄色型成虫的羽化率(♀:95%,♂:91%)却明显高于黑色型成虫的羽化率(♀:82%,♂:83%)。2种色型黄粉虫的卵和蛹历期均约为7d和10d,亦无显著差异;但黑色型幼虫较黄色型幼虫发育更快、更整齐。黑色型幼虫共历经1215龄,黄色型幼虫历经1217龄,并且2种色型黄粉虫幼虫均以历经14龄居多,历经14龄的黄、黑2色型黄粉虫幼虫的比例分别为27%和53%。以14龄计,黄、黑2色型黄粉虫从卵至成虫的总历期分别为171d和151d。此外,黄色型幼虫对饲料的平均利用效率明显高于同日龄黑色型幼虫,黄色型幼虫的平均饲料消化率(AD)、转化率(ECD)和利用率(ECI)分别为66.5%,50.6%和33.6%,而黑色型幼虫的平均饲料消化率(AD)、转化率(ECD)和利用率(ECI)分别为62.1%,46.8%和29.1%;但2种色型黄粉虫同日龄幼虫的生长率和存活率差异不显著。综合上述结果可知,黑色型黄粉虫较黄色型黄粉虫发育更快、更整齐,而黄色型黄粉虫对饲料的平均利用效率明显高于黑色型黄粉虫。这为进一步培育黄粉虫优良品种提供了有益参考。