摘要: 黄粉虫Tenebrio molitor作为理想的模式研究生物,虽然已围绕该昆虫在多个研究领域开展了诸多研究,但是有关其分子和遗传方面的研究仍知之甚少。为此,本研究基于前期构建的黄粉甲转录组数据库,成功发掘获得1 249个微卫星序列。其中,单碱基或三碱基序重复列最多,分别占44.44%和41.15%;A/T型重复序列出现频率最高,占42.70%。除单核苷酸重复序列外,重复单元的重复次数以5次最多,占30.90%。基于鉴定获得的微卫星序列,共设计获得1 004对微卫星引物,而且每对引物还设计了5对替代引物。研究获得的微卫星引物将有助于今后开展黄粉甲功能和比较基因组学方面的研究。

摘要: 在人工扩繁条件下观察管氏肿腿蜂Sclerodermaguani对中间寄主黄粉甲Tenebriomolitor的寄生行为,其过程可分为:搜寻-识别-螯刺-清理和取食-产卵-护幼。雌蜂在寄生黄粉甲蛹时上蜂速度和螯刺率变异大,上蜂前时间为1·47·0天,螯刺率为8·7%91·7%,影响两者的因素包括:雌蜂的交配状况、寄主状况及繁育温度等。蜂毒螯入寄主后可使其组织不腐烂而适于被寄生,被螯刺后的蛹可表现为“保鲜”状态,平均“保鲜”时间为12·6天。蜂在蛹体的平均产卵量为30粒,最多为91粒。蜂卵在蛹体上分布合理,有利于幼虫有效利用寄主营养并避免拥挤和取食竞争。母蜂对幼虫期的发育具保护行为,包括护卵和保护幼虫正常发育并能搬运老熟幼虫集中结茧化蛹。

摘要: 在室内用直接接蜂和药物麻醉寄主后接蜂的方法,对杉棕天牛CallidiumvillosulumFairmaire、粗鞘双条杉天牛SemanotussinoausterGressitt、苹眼天牛Bacchisadioica(Fairmaire)、星天牛Anoplophorachinensis(Forster)、玉米螟Ostriniafurnacalis(Guen啨e)、大螟Sesamiainferens(Walker)、桃蛀螟DichocrocispunctiferalisGuen啨e、鞭角华扁叶蜂Chinolydaflagellicornis(Smith)、家蝇MuscadomesticavicinaMacquart和黄粉甲TenebriomolitorL.等10种昆虫作为川硬皮肿腿蜂SclerodermasichuanensisXiao繁蜂替代寄主的适合性进行了系统的测试,比较了川硬皮肿腿蜂在不同供试寄主上的寄生率、出蜂率、发育历期、后代的雌性比率、寄生繁殖能力和冷藏对成蜂存活的影响。结果表明,不同寄主及寄主的不同处理间只有寄生率和出蜂率两项指标可能有显著差异,能反映繁蜂寄主的适合性。据此,从10种供试寄主中筛选出黄粉甲和玉米螟两种优良的繁蜂替代寄主,为该蜂的大规模繁殖及应用奠定了基础。

摘要: 采用饥饿法、紫外线照射法和针刺法处理黄粉甲Tenebriomolitor 6龄幼虫后均能诱导其产生抗菌物质 ,收集的血淋巴上清液对真菌有抑制作用 ,对细菌无抑制作用 ;经热处理后的血淋巴上清液则对细菌有抑制作用 ,而对真菌无抑制作用。SDS PAGE检测结果发现 ,与未诱导的对照相比经诱导的黄粉甲幼虫血淋巴中 ,原有的一类大分子蛋白质如分子量分别为 97kD、4 4kD和 37kD左右的蛋白质缺失 ;而ESI MS分析结果显示诱导后比诱导前黄粉甲幼虫血淋巴中有小分子物质产生 ,推测可能是此类缺失蛋白质分解为小分子量的抗菌肽 ,从而表现出抗菌活性。

摘要: 为表达和纯化黄粉甲Tenebrio molitor抗冻蛋白,采用RT-PCR方法扩增得到黄粉甲抗冻蛋白基因afp84acDNA,将其连接到pMAL-p2X质粒上,构建分泌型融合表达载体pMAL-p2X-afp84a,并在大肠杆菌Escherichia coli TBI中表达;进一步利用Amylose柱亲和纯化出该重组蛋白,后利用细菌抗寒性检测重组蛋白的生物活性。。结果显示:融合蛋白含量占总可溶蛋白的40%。SDS-PAGE分析表明,用MgSO4处理法与超声波细胞破碎法均可使融合蛋白从细胞中释放;融合蛋白经Amylose柱亲和纯化,FactorXa因子酶切,电泳显示获得的目的蛋白呈单一条带。细菌抗寒性检测表明该重组蛋白具有较高的抗冻活性。黄粉甲抗冻蛋白基因afp84acDNA的克隆、原核表达为进一步研究抗冻蛋白的性质和应用提供了有用的实验材料。