摘要: 黄曲条跳甲Phyllotreta striolata(Fabricius)是十字花科蔬菜的主要害虫之一,其抗药性问题日益严重,克隆黄曲条跳甲的酯酶基因可为其抗性治理提供必要的科学依据。本文利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法得到一条281 bp的核酸片段,再利用3'-RACE技术获得该基因片段的3'端(1 468 bp),编码442个氨基酸。核苷酸序列同源性分析表明,与赤拟谷盗est1基因和杂拟谷盗est1基因的同源性最高,为71%(211/297),与果蝇alpha-esterase5的同源性为70%(156/222),氨基酸序列与杂拟谷盗、赤拟谷盗、果蝇的酯酶基因的同源性分别为43%(188/434)、43%(188/434)、33%(144/432)。从BLAST结果可初步推测该片段应为编码黄曲条跳甲酯酶基因的部分核苷酸序列,该序列在GenBank中的登录号为EU166919。

摘要: 采用考马斯亮蓝G-250染色法对6种十字花科蔬菜不同危害程度叶片的可溶性蛋白质含量进行了测定。结果表明黄曲条跳甲Phyllotreta striolata(F.)对6种十字花科蔬菜叶片的可溶性蛋白质含量存在不同程度的影响。萝卜(Raphanus sativus(L.))、白菜(Brassica chinensis(L.))和菜心(B.parachinensis Bailey)叶片在黄曲条跳甲危害胁迫8、10 d时,甘蓝(B.oleracea(L.))在胁迫10、12 d时,芥菜(B.juncea(L.))和芥蓝(B.alboglabra Bailey)在胁迫12 d时,可溶性蛋白质含量显著高于对照(P<0.05)。芥菜在黄曲条跳甲危害2 d时,可溶性蛋白质含量与对照没有显著差异(P>0.05),可能是因为其承受黄曲条跳甲危害的抗虫性能力较强。随着叶片危害程度的加重,叶片可溶性蛋白质含量下降。这可能是寄主植物本身的保护行为,也是对害虫为害胁迫的一种响应。

摘要: 本文从菜田生态系统的角度出发,就黄曲条跳甲Phyllotreta striolata(Fabricius)取食诱导对小菜蛾Plutella xylostella(L.)造成的影响进行了研究。黄曲条跳甲取食诱导对小菜蛾取食的影响比较明显,一般来说,黄曲条跳甲少量或短时间的取食会刺激小菜蛾幼虫在相应叶片上的取食,反之则会抑制;而且不同的寄主,不同完整度的叶片(即是否被黄曲条跳甲取食过)上的承载能力不同,芥菜、白菜、菜心和萝卜的承载力弱于甘蓝和芥蓝,黄曲条跳甲取食过的叶片弱于未被黄曲条跳甲取食过的叶片;不同数量的黄曲条跳甲取食对小菜蛾的产卵量影响显著,对其余生物学参数影响不显著,少量的黄曲条跳甲取食会刺激小菜蛾的产卵,多数则会抑制。

摘要: 黄曲条跳甲Phyllotretastriolata(Fabricius)是十字花科蔬菜的重要害虫。为深入了解其遗传信息,本研究应用新一代高通量测序技术Illumina'sSolexa平台对黄曲条跳甲成虫的转录组进行测序,并结合SOAPdenovo拼接聚类等分析软件,获取大量的EST和挖掘功能基因。本文最终获得了4924条序列重叠群(contig),其中包含2209种与黑腹果蝇Drosophilamelanogaster蛋白基因具直系同源的独立基因(unigene)和610种黄曲条跳甲物种特有的unigene。结合GeneOntology(GO)数据库进行分析,发现大部分的unigene具结合能力(bindingcapability)和催化活性(catalyticactivity);上百种unigene可聚类于生物学过程分类中的配子发生、生殖腺发育和交配行为等重要功能。另外,结合KEGGPathway数据库分析发现,共有363种unigene参与或涉及了40种代谢路径,其中生物钟调控路径和植物次生代谢物路径等相关基因的发现,有助于深入研究黄曲条跳甲行为发生的内在机理。Solexa高通量测序技术作为昆虫功能基因组研究的重要手段,为发掘黄曲条跳甲功能基因发挥了重要作用,也为在分子水平上研发黄曲条跳甲的防治新策略提供了更翔实的基因信息。

摘要: 氯离子通道与农业害虫的抗药性发生有密切关联。本研究结合转录组测序及荧光定量PCR技术,鉴定和分析黄曲条跳甲Phyllotreta striolata(Fabricius)谷氨酸门控氯离子通道(GluCl)的基因序列特征、功能及基因表达谱。结果表明:本研究所获得的GluCl cDNA序列长度为1430bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)长为1344bp,编码447个氨基酸残基。其推测蛋白分子主要含神经递质分子胞外结合域和胞内跨膜域两大功能域,其亲水的胞外结合域又含有2个由半胱氨酸二硫键形成的氨基酸残基桥环,表现出GluClα亚基的典型特征。cDNA序列的系统发育分析表明,该GluCl与其他昆虫的GluClα高度同源,而在脊椎动物中则与γ-GABA或甘氨酸配体门控氯离子通道同源。荧光定量PCR分析表明,该GluCl基因在黄曲条跳甲雌雄成虫的不同部位中都有表达,但是在头部的表达量非常高,如雄虫头部的表达量是其精巢的65.7倍、是其中肠的227.5倍,揭示GluCl基因在中枢神经组织中具有重要作用。本研究为进一步研究GluCl介导的黄曲条跳甲抗药性的发生及其分子机理奠定了基础。