摘要: 目的 为了解替米考星在肉鸭体内的药代动力学特性及生物利用度，为替米考星在临床应用作出正确评价与指导。方法 8只健康成年北京肉鸭，采用静脉注射和口服两种途径分别以替米考星5 mg/kg和20 mg/kg体重剂量给药，进行体内药代动力学研究，计算其生物利用度。动物给药后72 h内分点采血，用反相高效液相色谱法测定不同时间点血浆中的药物浓度。采用3p97药代动力学软件处理数据，替米考星两种给药途径的药时数据均符合二室开放模型。结果 静脉注射给药（5 mg/kg体重）的主要药代动力学参数:t_1/2α为0.076±0.0098 h、t_1/2β为7.31±0.63 h、AUC为4.50±0.30/μg·ml^-1·h^-1、CL（s）为1.12±0.069/L·kg^-1·h^-1;口服给药（20 mg/kg体重）的主要药代动力学参数:t_1/2α为1.76±0.49 h、t_1/2β为25.70±4.74 h、t_1/2Ka为0.090±0.0092 h、AUC为14.03±2.54/μg·ml^-1·h^-1、CL（s）为1.46±0.22/L·kg^-1·h^-1、t_max为0.47±0.035 h、C_max为0.75±0.056μg/ml、F为78.47%±0.15%。结论 通过剂量较正法计算出口服给药后在肉鸭体内的生物利用度为78.47%±0.1483%,表明替米考星口服给药在肉鸭体内吸收良好。

摘要: 目的探讨鸭肠炎病毒(DEV)诱导鸭胚成纤维细胞(DEF)中γ干扰素(IFNγ)的表达情况及初步机制。方法分别提取感染DEV后24h、36h、48h、60h的DEF总RNA,反转录成cDNA,使用特异性引物,运用荧光定量PCR方法 ,检测IFNγ及几个相关干扰素刺激基因(ISGs)mRNA水平的变化。结果感染DEV的细胞相对于未感染的细胞,IFNγ的mRNA在24 h、36 h、48 h、60 h均显著上调,且相关ISGs包括抗黏液病毒基因(Mx)、DEAD框蛋白50(DDX50,是一种ATP依赖的RNA解旋酶)、2'-5'寡腺苷酸合成酶L(OASL)等基因的mRNA表达水平也均显著上调。结论 DEV感染DEF能够诱导IFNγ产生及相关ISGs表达的上调。

摘要: 目的利用PCR方法鉴定SPF金定鸭的性别。方法根据已有报道合成一对禽类性染色体上的染色质解螺旋蛋白DNA结合蛋白1(CHD1)基因的通用引物gCHD。采集培育中的85只SPF金定鸭血液样品,提取血液基因组DNA,进行PCR扩增。通过分析PCR扩增产物凝胶电泳后的条带数判定禽类性别。结果 PCR扩增产物经琼脂糖电泳分析后,雌性鸭样品扩增出CHD1-Z和CHD1-W,而雄性鸭样品只出现CHD1-Z。结论本文建立的方法可作为禽类性别的有效鉴定方法。

摘要: 目的 构建表达新城疫病毒血凝素神经氨酸酶(HN)基因的重组鸭肠炎病毒(DEV)。方法 利用同源重组技术，在DEV Clone-03基因组中胸苷激酶(TK)基因内部插入新城疫病毒HN基因。以本实验室已构建的r DEV TK-EGFP株为亲本病毒,将病毒基因组与转移载体共转染及蚀斑纯化,获得表达新城疫病毒HN基因的重组鸭肠炎病毒。结果 重组病毒经基因水平和蛋白水平的鉴定,证明新城疫病毒HN基因正确插入DEV基因组内部且有效表达;复制动力学和遗传稳定性检测,证明重组病毒rDEV TK-HN滴度略有下降,但复制趋势与亲本病毒一致;在鸡胚成纤维细胞(CEF)和SPF鸡胚连续传代20代,表明HN基因随病毒传代而稳定遗传、表达。结论 利用同源重组技术,对鸭肠炎病毒基因组进行修饰,构建了TK基因缺失表达新城疫病毒HN基因的重组鸭肠炎病毒,该病毒能够携带HN基因稳定遗传和表达。

摘要: 目的 研究一株鸭源新城疫病毒分子的特性，并比较其对SPF鸡和SPF鸭致病性的不同。方法 将分离到的病毒克隆、测序并用SPF鸡和SPF鸭分别评价该毒株的致病性。结果 Du/CH/LGD/358/2011的基因组由15 198个核苷酸序列组成，编码6种结构蛋白。F基因裂解位点的氨基酸序列为112 ERQER/L117。通过全基因组核苷酸序列和F基因高变区核苷酸序列构建遗传进化树，证明该毒株属于class I基因3b型，与香港活禽市场分离到的毒株类似，但略有不同。该毒株对SPF鸡和SPF鸭的致病性基本一致。结论 该毒株为弱毒株，使用SPF鸡和SPF鸭均可以对鸭源弱毒株进行致病性评价，为SPF鸭的检测提供理论依据。