摘要: 用RTPCR的方法,从感染柔嫩艾美尔球虫(Eimeriatenella)第5天的鸡盲肠分离的第二代裂殖子中克隆出MZ57基因,并进行抗原表位分析和原核表达,结果表明,MZ57基因ORF为945bp,与GenBank里已知序列(登录号为L08257)比较核甘酸和氨基酸同源性均为99.9%。应用DNAStar软件对该基因的抗原表位进行了分析,发现其B细胞表位广泛分布在80～300区域,其中80～130区域、190～220区域和300～320区域更为突出,而T细胞基序则集中在123～190区域和220～300区域。根据MZ57基因序列重新设计一对引物,PCR方法扩增出不含信号肽长度为885bp的基因序列,克隆到pET28b获得重组质粒pET28bMZ亚,转入宿主菌BL21中,用IPTG进行诱导表达,表达的融合蛋白约36.5kDa10poundnote,符合目的蛋白大小;同时应用Westernblot方法与抗第二代裂殖子和子孢子的2种高免血清反应,结果表明抗裂殖子和子孢子血清均能识别MZP(裂殖子蛋白,MZP,merozoiteprotein)。

摘要: 以柔嫩艾美尔球虫 (Eimeriatenella) 5 0× 1 0 4 个孢子化卵囊 只的剂量感染雏鸡 ,对感染后雏鸡体内NOS活性水平的动态变化进行了检测。结果显示 :E .tenella感染雏鸡与对照组的相比 ,其血清总NOS和iNOS活性变化差异不显著 (P >0 0 5 ) ,感染雏鸡脾脏和法氏囊组织总NOS活性自感染后第 2天逐渐升高 ,在感染后第 5～ 7天感染组雏鸡脾脏组织NOS活性显著或极显著地高于对照组 (P≤ 0 0 5、P≤ 0 0 1 ) ,感染后第 6天、第 7天感染雏鸡法氏囊组织中NOS活性显著地高于对照组 (P≤ 0 0 5 ) ;感染组雏鸡自感染后第4天盲肠出现病变 ,第 7天病变值最高 ;盲肠组织中总NOS活性在感染后第 6和第 7天显著地高于对照组(P≤ 0 0 5 ) ;整个试验期间 ,感染组雏鸡的脾脏、法氏囊和盲肠组织中iNOS活性与对照组并无显著性变化差异 (P >0 0 5 )。结果提示 ,E .tenella感染雏鸡会导致脾脏和法氏囊组织的NOS活性变化 ,其原因可能是由于入侵球虫所产生的某些因子激活cNOS ,使NOS的活性升高 ,而似乎并没有诱导宿主体内iNOS的表达。本文就柔嫩艾美尔球虫感染的NO致病的相关机制进行了讨论。

摘要: 者对3种艾美耳球虫和4株柔嫩艾美耳球虫抗药性虫株分别进行了乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖磷酸异构酶(GPI)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)同工酶电泳图谱分析。其中LDH同工酶谱共观察到5条酶带,GPI同工酶谱共观察到8条酶带,G6PD同工酶谱观察到7条酶带。3种艾美耳球虫的同工酶谱存在种间差异,不同抗药性虫株间酶谱也存在差异。G6PD-5很可能与球虫对氯嗪苯乙氰的抗药性有关,G6PD-2则可能与球虫对氯羟吡啶的抗药性有关

摘要: 对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)BJ株TA4基因进行了克隆和测序分析。以纯化的E.tenellaBJ株7h孢子化卵囊的总RNA为模板,根据国外报道的序列设计一对引物,用RT-PCR方法扩增出BJ虫株的TA4基因。用常规基因克隆方法把BJ株TA4基因插入pGEM-T克隆载体,选取正方向插入的一个阳性克隆进行酶切分析及插入片段的全序列测序分析。结果表明:该序列全长1227个核苷酸,有一个含230个密码子的开放性读框,可编码分子量约为25kDa的多肽。其后紧随533bp的3'端非编码序列。TA4-BJ与国外株TA4比较,同源性99%,突变的4个核苷酸中,2个为有义突变,使其推测氨基酸Asp变为Gly,Phe变为Leu

摘要: 用脂质体包裹Ｅｉｍｅｒｉａｍａｘｉｍａ孢子化卵囊抗原给鸡口服免疫，以１０３个孢子化Ｅ．ｍａｘｉｍａ卵囊／只的剂量攻毒，可使鸡获得４６％的保护力。ＥＬＩＳＡ检测结果表明，鸡体在免疫后产生了特异性抗体。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，所提取Ｅ．ｍａｘｉｍａ孢子化卵囊可溶性抗原至少有１６条带，其中８条主带分子量分别为：＞９７．４ｋＤ、４７．９ｋＤ、４２．７ｋＤ、３５．５ｋＤ、２９．５ｋＤ、２３．４ｋＤ、１３．５ｋＤ、１０．５ｋＤ。用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ分析结果表明，口服活卵囊初次免疫１４ｄ后的鸡血清，可识别出４条带，其分子量分别为：＞９７．４ｋＤ、６０．３ｋＤ、４７．９ｋＤ、４２．７ｋＤ。