摘要: 为研究谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)和谷氨酸钠(MSG)对鳜(Siniperca chuatsi)摄食、生长及胃肠功能的影响,以鳜基础饲料为对照组(CON),分别添加0.2%和0.4%的Glu、Gln和MSG,命名为Glu-0.2、Glu-0.4、Gln-0.2、Gln-0.4、MSG-0.2和MSG-0.4六个处理组,饲喂初始体质量为(17.60±0.53) g的鳜56d。同CON相比,结果显示:(1)三种添加剂均显著提高摄食量,其中MSG组最明显;(2) Glu-0.2和Gln-0.2的增重率、饲料转化率显著提高;(3)各添加组的胃蛋白酶活力和Glu-0.2、Glu-0.4、Gln-0.2的胃H~+-K~+-ATPase活力显著增强;(4)肠道中的胰蛋白酶活力在Glu-0.2显著提高,Na~+-K~+-ATPase活力在Gln-0.4无促进作用,其他组均显著增强;(5) Glu组、MSG组血浆中D-乳酸、内毒素含量和二胺氧化酶活性均显著降低;(6) Gln组血浆AST和ALT显著升高,且肝细胞肿胀、空泡化明显增多;(7) Glu组和MSG组血浆抗氧化能力显著升高,Gln组显著降低;(8)肠道微生物组成Glu-0.2的门水平软壁菌门(Tenericutes)、属水平索氏鲸杆菌属(Cetobacterium)丰度显著高于CON组。综上,Glu具有促进鳜胃酸分泌和胃肠消化吸收能力,增强肠道物理屏障,改善肠道菌群,促进生长;Gln能提升鳜胃肠功能,而机体抗氧化力、肝功能下降;MSG促进摄食和生长效果最佳,但对饲料转化无改善。

摘要: 为探究鳜(Siniperca chuatsi)黑素皮质素1受体基因mc1r在不同养殖背景下的组织表达差异及转录调控机制,研究以在黑白养殖背景下产生的深、浅色体表鳜为研究对象,通过实时荧光定量PCR测定mc1r基因的组织表达差异;其次以鳜基因组DNA为模板,通过PCR扩增mc1r基因5′侧翼区不同长度的缺失片段并克隆至pGL3-Basic载体,之后将重组质粒转染到HEK 293T细胞,检测双荧光素酶的相对活性并预测其存在潜在的转录因子。结果显示,黑色背景养殖所产生的深色体表鳜与野生型更为相似; RT-qPCR检测显示深色体表鳜mc1r在背部皮肤和腹部皮肤表达量最高,而浅色体表鳜脑中表达量最高;双荧光素酶活性检测发现,构建的5个缺失片段启动子活性之间存在显著差异,且-159∽-+292启动子活性最高,推测其为mc1r核心启动子区域,并且通过在线软件预测出存在MITF、SP1等转录因子。研究克隆了鳜mc1r基因启动子区域并进行了转录活性分析,并且对潜在的转录因子进行了预测,为鱼类mc1r基因分子机制表达调控及表皮颜色可控性研究提供了理论依据。

摘要: 以初始体重(6.77±0.64) g的鳜(Siniperca chuatsi)为实验对象,从消化道肠肽酶活力和小肽转运吸收方面比较研究鳜对活饵与饲料消化吸收能力的差异。实验采用3种分组投食策略,将鳜分活饵组(仅投喂活饵鱼)、饲料组(仅投喂饲料)、复投活饵组(以下简称复投组,先投喂饲料后活饵鱼)。活饵组、饲料组分别饲养22d,复投组经5d驯饲、15d饲料和2d活饵喂养。饲养结束时在各组进食0.5h、1h、2h、3h、6h、12h、16h时分别取样肠和幽门盲囊,测定氨肽酶和羧肽酶含量与活力,小肽转运载体基因Pept1a、Pept1b和Pept2 mRNA表达水平,及进食12h后肠内容物及粪便中残余小肽含量。结果表明:各组羧肽酶、氨肽酶含量变化无显著性规律,酶活力总体呈先升后降趋势;活饵组肽酶活力峰值显著高于复投组高于饲料组(P<0.01),复投组由饲料转喂活饵后,肠道肠肽酶活力显著上升;各组前肠、中肠及幽门盲囊Pept1a、Pept1b mRNA表达显著高于后肠(P<0.01),后肠则以Pept2 mRNA高表达(P<0.01)。在复投组摄食活饵后,小肽转运载体基因表达水平较饲料组迅速回升(P<0.01);摄食12h,复投组肠内容物小肽含量显著高于活饵组和饲料组,小肽吸收效率随消化时间延长而上升。饲料组粪便中小肽含量显著高于活饵组与复投组,未转运的小肽中含必需氨基酸居高。综上所述,投喂鳜配合饲料,对肠肽酶活力、小肽转运载体基因表达和小肽吸收速率均产生不利影响,鳜对饲料蛋白的分解和小肽转运吸收效率显著低于活饵鱼。

摘要: 研究从鳜(Siniperca chuatsi)基因组中获得Shh(Sonic hedgehog)基因序列,对该基因编码的蛋白质和同源进化特征进行了分析。鳜Shh基因的开放阅读框(ORF)为1242 bp,编码413个氨基酸,分子量为46.01 kD,等电点(pI)为6.57,脂溶系数为82.83,亲水性平均系数为-0.292,拥有一个跨膜区,被推定为亲水性膜结合蛋白。Shh蛋白具有两个结构域,即Hh-N和Hh-C结构域。鳜Shh蛋白与自身所属的鲈形目鱼类Shh蛋白同源性较高。通过实时荧光定量PCR技术检测了鳜Shh基因的时空表达水平。结果显示:Shh的表达量在神经胚期表达显著上调,并在胚胎发育中后阶段保持较高水平。Shh在鳜不同组织中存在一定的表达差异,在脑、肠道中表达量较高,而在红肌、白肌等组织中表达量相对较低。通过环巴胺(Cyclopamine)处理鳜胚胎来抑制Shh信号通路的实验表明, Shh信号通路被抑制后, Pax3、Pax7、Myomaker、生肌调节因子及肌球蛋白重、轻链等基因的表达均显著降低,推测Shh参与调控鳜肌细胞的早期分化和发育过程。研究将有助于从分子水平了解Shh信号调控鱼类发育的分子机理,为鱼类发育生物学以及健康养殖提供参考依据。

摘要: 为研究低水温下鳜饥饿状态下的生理动态变化过程,选取体重(84.13±0.14) g的鳜270尾,随机分成6组,每组3个重复,每个重复15尾鱼,于低水温(13±1)℃下分别饥饿0、3d、6d、9d、12d和15d,每隔3d分别测定相关生理生化指标。结果显示:(1)随着饥饿时间延长,鳜体质量、肥满度、肝体比、脏体比、肌肉的蛋白和脂肪含量都呈逐渐下降趋势,其中体质量下降幅度较大,饥饿3d、6d、9d、12d、15d分别下降了3.03%、3.82%、5.55%、7.68%和8.39%。(2)鳜血液中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性随饥饿时间延长呈现先下降后上升趋势,饥饿3d时达到最小值。血糖含量在饥饿6d时显著上升(P<0.05),随后维持在一定的水平范围。碱性磷酸酶活性、甘油三酯、总胆固醇、高、低密度脂蛋白胆固醇含量呈整体下降趋势。(3)鳜胃蛋白酶、胃H_+-K_+-ATP酶及肠道和幽门盲囊的胰蛋白酶、脂肪酶活性随饥饿时间的延长呈总体下降趋势,且均在饥饿15d时达到最小值,其中胃H_+-K_+-ATP酶活性下降幅度最为显著;而淀粉酶活性在饥饿前期稳定,后期下降。(4)鳜肝脏抗氧化能力随饥饿时间延长先上升后下降,并在饥饿15d时下降到最低值。研究表明:在低水温下,鳜短期饥饿出现体质量负增长、体型变瘦和肝脏相对变小现象;饥饿前3d优先利用肌肉脂肪供能,后期优先利用肌肉蛋白质供能;饥饿6d时鳜肝脏抗氧化能力有改善,但饥饿时间过长鳜的消化和抗氧化机能明显下降,并反馈性抑制胃酸的分泌,可能与胃黏膜的保护相关。