摘要: 通过脑室注射异亮氨酸,探究短期内异亮氨酸对鳜(Siniperca chuatsi)雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路及氮代谢影响。结果显示:脑室注射异亮氨酸后,(1)促进鳜氨氮排泄;(2)谷氨酸脱氢酶基因(Glutamate dehydrogenase,GDH)、谷草转氨酶基因(Glutamic oxaloacetic transaminase,GOT)和腺苷酸脱氨酶基因(Adenosine monophosphate deaminase,AMPD)氮代谢基因相对表达量显著性上调(P<0.05);(3)鳜血糖含量在0.5h显著性降低(P<0.05);(4)激活了鳜肝脏mTOR信号通路,促使下游分子核糖体蛋白S6磷酸化(P<0.05)。结果表明:异亮氨酸能够激活鳜肝脏mTOR信号通路,介导氨基酸代谢,提高鳜氮代谢基因的转录水平,促使氨氮排泄增多。

摘要: 为探究鱼类脂滴包被蛋白plin2(Perilipin 2)基因的结构和功能,研究成功地克隆并鉴定出鳜(Siniperca chuatsi)plin2的2个亚型,分别命名为plin2a和plin2b。氨基酸多重比对发现其编码序列与刺鱼(Gasterosteus aculeatus)具有高度的同源性。结构域分析发现鳜plin2a和plin2b具有与哺乳动物相似的N末端PAT结构域和11-mer重复结构域。基因共线性分析发现plin2两个亚型在鳜和刺鱼中高度保守。系统发育分析表明鳜plin2和刺鱼、攀鲈(Anabas testudineus)和半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)近源。RT-qPCR检测了plin2a与plin2b基因在鳜不同组织中的表达分布情况,结果表明鳜plin2a在肝脏中表达最高,其次是脂肪和脾脏组织;相反, plin2b基因在鳜的肝脏中几乎不表达,主要在肾脏、胃、脂肪和脑组织表达。此外,还探究了鳜肝脏和肝细胞在脂肪蓄积状态下plin2a基因的转录水平变化。实验结果表明在过量添加碳水化合物饲喂(8周)后,鳜肝脏中plin2a基因mRNA水平明显升高,鳜肝脏细胞在0.1 mmol/L棕榈酸钠刺激后显著增加了plin2a的mRNA水平。研究表明,鳜plin2两个亚型可能出现功能分化,并且plin2a作为肝脏脂代谢中的重要调节因子,可能在鳜肝脏脂肪蓄积中发挥更重要的功能。

摘要: 为探究翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)中原癌基因c-Fos (proto-oncogene c-Fos)对摄食相关的味觉受体t1r1(taste receptor type 1 member 1, t1r1)的调控作用,研究采用学习记忆通路相关抑制剂T-5224、KN-62处理鳜脑细胞,通过不同浓度抑制剂处理发现T-5224对c-fos的起负调控作用而KN-62对c-fos起正调控作用,同时筛选出适合的处理时间及浓度。30μmol/L T-5224处理24h,鳜脑中c-fos及t1r1的mRNA表达显著降低(P<0.05),而200 nmol/L KN-62处理2h,鳜脑中c-fos及t1r1的mRNA表达却极显著升高(P<0.05)。此外,研究还分析了抑制剂处理翘嘴鳜脑细胞后, t1r1基因DNA甲基化变化。然而在两种抑制剂处理后,鳜脑中t1r1的甲基化水平无显著变化(P>0.05)。以上结果说明,翘嘴鳜脑细胞味觉受体t1r1转录水平变化,可能是通过学习记忆因子cfos基因调控,而c-fos可能通过其他途径调控t1r1的转录,但不是DNA甲基化。同时为翘嘴鳜驯化后摄食偏好变化提供理论依据。

摘要: 为通过建立雌核发育纯系以实现快速优化种质资源,文章以翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)为研究对象,探索出了一套静水压诱导雌核发育的方法:将装有翘嘴鳜精子的培养皿置于摇床缓慢摇动,在两只15 w的紫外灯管(培养皿与紫外灯管的垂直距离约17 cm)下照射18min,然后与雌鱼卵子受精5min, 63 MPa静水压处理2min,最后常规孵化。HRM分型技术检测其雌核发育群体的雌性率为100%。该方法简单快捷,诱导孵化率(受精后72h的存活率)为7.56%,比已有的冷休克诱导翘嘴鳜雌核发育的方法约提高3个百分点。研究结果可用于翘嘴鳜雌核发育品系的快速扩群,也可用于翘嘴鳜抗逆相关品系的种质资源创制。

摘要: 为探究谷氨酸(Glu)和α-酮戊二酸(AKG)对鳜(Siniperca chuatsi)摄食和氨排泄的影响,实验以鳜[初始体重(26.28±0.99) g]为研究材料,将Glu和AKG分别添加到鳜的基础日粮中(添加量2%),进行了60d的养殖实验,前40d等量投喂,后20d饱食投喂。通过设置对照组、Glu组和AKG组,比较了3种不同饲料饲喂下鳜的摄食与氨排泄差异情况。实验结果表明,在等量饲喂期间添加Glu、AKG显著提高鳜生长和降低饵料系数,且在一定程度上降低鳜的体外氨排泄量。在饱食投喂阶段, Glu、AKG组的血液中的葡萄糖含量增加,肝糖原、肌糖原含量降低。两个投喂阶段结果都表明,饲料中添加谷氨酸和α-酮戊二酸能显著促进鳜脑中npy表达并抑制pomc表达,显著提高蛋白质效率比和特定生长率,增加鱼体体重,促进鱼体生长且降低饲料系数。同时,肝脏中gdh表达及肌肉ampd表达均提高,脱氨代谢供能水平升高,最终导致其氨排泄量升高。此外,饲料中添加Glu和AKG可促进肝脏pepck、g6pase、pk和gk基因表达量增加,糖代谢增强,减少蛋白质的分解供能。综上所述,在饲料中添加谷氨酸和α-酮戊二酸均能促进鳜的摄食并降低氨的排泄。研究结果将应用于鳜的低氨排放养殖,并推进谷氨酸和α-酮戊二酸在鳜饲料中的应用。