摘要: 目的 研究聚维酮碘浸泡处理对红鲫胚胎发育的影响，探究其对鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)的阻断作用，为红鲫实验动物种群的病毒净化提供技术方案。方法 采用细胞培养法从红鲫封闭种群的临床症状异常个体中分离病毒，结合PCR扩增与DNA测序技术鉴定病毒种类；设置10.0、20.0、30.0、40.0 mg/mL梯度浓度的聚维酮碘溶液，对红鲫受精卵进行5 min浸泡处理，通过统计各组胚胎孵化率及畸形率，筛选安全有效的处理方案；定期采集不同发育阶段的处理个体样本，利用PCR技术追踪检测CyHV-2的感染。结果 从红鲫封闭群某水族箱的2尾患病个体中成功分离到病毒，经分子生物学鉴定确认为CyHV-2;实验证明10.0、20.0、30.0、40.0 mg/mL等不同浓度聚维酮碘处理受精卵5 min均未显著影响胚胎发育，在40.0 mg/mL聚维酮碘5 min处理组不同时期均没有检测到CyHV-2病毒。结论 红鲫受精卵的聚维酮碘处理可阻断CyHV-2的传播，或可发展为标准方法用于鱼类实验动物的病毒净化。

摘要: 水产品地理溯源技术是支撑长江“十年禁渔”政策实施的重要手段。为提升监管部门的执法能力,本研究以鲫(Carassius auratus)为对象,基于其肌肉组织脂肪酸谱的地域差异,结合主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)和线性判别分析(LDA)等化学计量学方法,构建产地溯源判别模型。结果表明,长江与非长江鲫的产地判别模型总判别准确率达96.4%,交叉验证准确率为94.0%;针对长江不同江段构建的区域判别模型准确率更高,总判别率达100%,交叉验证准确率为96.7%。研究结果表明,脂肪酸谱结合多元统计分析可作为鲫产地识别的有效技术路径,具备良好的实用性与推广潜力,有望为“十年禁渔”政策实施、水产品市场监管及长江流域生态保护提供科学支撑。

摘要: 研究旨在分析比较池塘养殖和陆基圆池养殖模式下彭泽鲫(Carassius auratus var. Pengze)肌肉风味品质的差异,并通过代谢组学初步探究其形成原因。结果表明:与陆基圆池组比较,池塘养殖水域中总磷、氨氮、总氮水平显著降低(P<0.05);肌肉中多不饱和脂肪酸特别是亚油酸相对含量显著增高(P<0.05),但单不饱和脂肪酸特别是油酸相对含量显著降低(P<0.05);鲜味物质肌苷酸与鸟苷酸含量均较高,但组间差异不显著(P>0.05);通过GC-MS(气相色谱质谱联用仪)在两种养殖模式鱼中共鉴定出141种挥发性物质,并根据表达丰度将14种差异挥发性物质作为鉴别两种养殖模式下彭泽鲫肌肉的特征风味物质,其中10种物质在陆基圆池中表达显著上调(P<0.05),这些差异物质为奶香、果香味物质以及高感官阈值的酸类异味物质;挥发性物质的总丰度显著减小(P<0.05),同时电子鼻传感器的响应值也显著降低,表明陆基圆池养殖模式可能促进了彭泽鲫肌肉中挥发性物质的积累或生成。代谢组学分析发现,在两种养殖模式下彭泽鲫肌肉存在312种差异代谢物,其中陆基圆池养殖鱼相较于池塘养殖鱼有181种代谢物表达上调,只有131种表达下调,使鱼肉拥有更多的风味前体物质;进一步对差异代谢物进行KEGG通路富集分析,发现类固醇激素生物合成通路和花生四烯酸代谢通路是两种养殖模式间的主要差异代谢通路。上述结果表明:养殖环境诸多因素通过花生四烯酸代谢和类固醇激素合成等通路,改变了鱼肉中脂肪酸组成和代谢物的沉积,诱导了两种养殖模式鱼差异挥发性风味物质形成。

摘要: 通过稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)卵膜蛋白质组测序鉴定黏性卵膜中富集的透明带蛋白(Zona pellucida glycoproteins, Zps),建立可用于卵型研究的稀有鮈鲫zp基因突变体和转基因斑马鱼(Danio rerio)。实验收集稀有鮈鲫胚胎(1hour post fertilization, hpf),分离收集足量卵膜,提取卵膜中的蛋白质进行测序分析。将测序数据进行拼接并与鲤科鱼类蛋白质进行比对,选取匹配度和丰度最高的基因zp2l2和zp4l进行实验。分别在zp2l2和zp4l的第一个外显子、第六个外显子设计CRISPR/Cas9敲除靶点,构建zp基因突变体。扩增斑马鱼zp3.2基因上游启动子序列(2874 base pairs, bps)和zp2l2、zp4l编码序列(1137、3009 bp),通过无缝克隆(Infusion cloning)将zp3.2启动子连接进入具有Tol2转座元件的质粒中,构得质粒pT2AL-zp3.2-eGPF;再将zp2l2、zp4l编码序列克隆到pT2AL-zp3.2-eGPF质粒中,得到可用于胚胎注射的转基因质粒pT2AL-zp3.2-zp2l2-eGPF和pT2AL-zp3.2-zp4l-eGPF。体外转录合成转座酶mRNA与构建的转基因质粒混合进行斑马鱼胚胎显微注射。通过稀有鮈鲫胚胎显微注射及三代鉴定,成功在稀有鮈鲫中敲除zp2l2和zp4l获得稳定遗传的纯合突变体;稀有鮈鲫zp转基因斑马鱼经传代鉴定,筛选得到了可稳定遗传的转基因品系Tg(zp3.2:zp2l2-eGPF)和Tg(zp3.2:zp4l-eGPF),这2个转基因品系的绿色荧光蛋白在斑马鱼胚胎发育的15d(days post fertilization, dpf)开始在卵巢和肝脏中表达。实验构建zp2l2和zp4l稀有鮈鲫突变体和转基因斑马鱼的方法,为鲤科鱼类卵型形成机制的研究提供了可行的实验思路和技术路线。

摘要: 为探究鲫（Carassius auratus）生长特征与环境因子的关系,研究选取地理环境具有显著差异的7个湖泊（松花湖、乌梁素海、衡水湖、洪泽湖、高邮湖、太湖和洱海）。基于体长-体重关系、生长系数k、渐进体长L_∞及拐点年龄t₁等生长参数量化不同水域鲫的生长发育情况,并进一步结合曼特尔检验（Mantel Test）、斯皮尔曼相关分析（Spearman）和冗余分析（RDA）等多种方法,解析环境因子对其生长的影响。结果表明:（1）不同种群间平均体长、平均体重存在显著差异（P<0.05）;生长指数b介于2.96—3.15,纬度较低的湖泊,鲫呈现匀速生长,纬度较高的湖泊,呈现正异速生长。（2）所有种群均表现为快速生长型（k>0.2）;渐进体长L_∞为243.50—278.25 mm;松花湖和乌梁素海拐点年龄t₁在2龄以上,其余均在1龄左右;生长性能指数φ′处于4.36—4.76。（3）分析显示,地理空间因子（海拔、纬度、岸线发育系数）与理化参数（pH、浊度、水深）共同调控生长特征,且地理空间因子（海拔和岸线发育系数）解释度达76.4%（P<0.05）,占主导地位。本研究揭示了不同地理群体鲫生长策略及其与环境之间的关系,为进一步探索鲫的生长生态特征和其对环境变化的响应提供了理论依据。