摘要: 该文利用FIASCO法(fast isolation by AFLP of sequences containing repeats)和GenBank数据库搜索法开发花鲈微卫星标记,并对筛选的标记进行多态性检测。两种方法共获得54条能够设计引物的序列,扩增结果显示15对引物具有多态性,多态性微卫星位点的等位基因数为2～10个。15个多态性位点中,4个位点偏离了Hardy-Weinberg平衡;各位点间没有连锁不平衡现象;仅位点SP52可能存在无效等位基因;除SP17和SP468外,其余引物的PIC值均在0.5以上,可用于花鲈群体遗传分析等研究。

摘要: 甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT,EC2.1.1.5)催化甜菜碱的甲基转移给高半胱氨酸(Hcy),而分别生成二甲基甘氨酸和蛋氨酸。利用RT-PCR和SMART RACE的方法从鲈鱼(Lateolabrax japonicus)肝脏中克隆了BHMT全长cDNA。该序列全长1461bp,5'端非翻译区72bp,3'端非翻译区183bp,开放阅读框1206bp,可编码一个由401个氨基酸组成的蛋白质,该蛋白质相对分子质量为44.32kD,等电点为7.21。氨基酸序列分析表明,BHMT具有较高的保守性,鲈鱼BHMT与人、小鼠等9个物种的同源性为77%～93%,其中与黄鲈(Percaflavescens)同源性最高,为93%。用RT-PCR分析BHMT基因在10个组织中的表达结果表明,只有在肝、肠和肾中有较高的表达。RT-PCR和定量PCR表明,鲈鱼从盐度25的海水转入盐度12的海水后,肝、肠和肾BHMT基因表达量有增加,而将鲈鱼从盐度为25的海水转入盐度为29的海水后,肝、肠和肾的BHMT基因表达则减少。腹腔注射甜菜碱可增加鲈鱼BHMT基因在肝、肠和肾三个组织中的相对表达量。这些结果表明,甜菜碱可诱导鲈鱼BHMT基因表达,而BHMT在适应鱼类环境渗透压变化中起重要作用。

摘要: 肌肉生长抑制素(myostatin)属于转化生长因子β(TGF-β)超家族中的一个成员,是控制骨骼肌生长发育的重要细胞因子。该研究以松江鲈肌肉总RNA为模板,采用RT-PCR、5'-RACE和3'-RACE的方法,获得了松江鲈MSTN基因的3个片段,测序后拼接得到2568bp全长cDNA序列,其包含了1131个核苷酸的开放性阅读框,翻译编码376个氨基酸。松江鲈MSTN具有MSTN的共同特征,有蛋白酶水解位点RARR和10个保守的半胱氨酸残基;核苷酸和氨基酸同源性分析发现,松江鲈MSTN基因序列与石首鱼、条纹狼鲈、美洲白鲈、金眼石鮨等同源性较高;与哺乳动物和鸟类同源性较低。系统发育分析表明,松江鲈MSTN与石首鱼亲缘关系最近。RT-PCR分析表明,该基因在肌肉表达量最高;在肠中也有较高表达;在脑和肝脏中也能检测到表达。此结果表明,松江鲈MSTN基因除对肌肉生长发育有调控作用以外,可能还有其他功能。

摘要: 为探讨低溶氧胁迫对肝脏花生四烯酸(AA)代谢的影响及添加AA对低氧应激的缓解作用,研究以大口黑鲈(Micropterus salmoides)为研究对象,通过间歇性低氧胁迫和外源补充AA投喂实验,进行生理生化、肝脏及鳃组织病理、低氧耐受能力及分子生物学等分析测定。结果表明:低溶氧胁迫显著增加大口黑鲈全血的血红蛋白及高铁血红蛋白水平(P<0.05),诱导鳃组织鳃小片间隙细胞团减少及鳃小片细长等结构性变化,提高肝脏血管生成相关基因(vegfa、mmp2、jagged和notch1)表达水平(P<0.05),同时降低肝脏总抗氧化能力(TAOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,诱导丙二醛(MDA)累积(P<0.05)。低溶氧胁迫也诱导肝脏组织脂质代谢重塑,表现为饱和脂肪酸水平的升高及多不饱和脂肪酸(PUFA)水平降低,而AA含量呈现特异性累积特征(P<0.05),提示其可能涉及低溶氧适应性调控。通过外源补充AA显著降低大口黑鲈的窒息点(由1.08降至0.5 mg/L),延长低溶氧耐受时间,并显著增强肝脏的T-AOC、SOD、CAT活性(P<0.05); AA补充并没有显著影响低氧诱导的鳃组织结构性变化,而是表现出更显著的肝脏血管生成水平,补充外源AA显著提高大口黑鲈肝脏促血管生成活性物质前列腺素E2(PGE2)和环氧二十碳三烯酸(EETs)的含量(P<0.05),vegfa、vegfr2、mmp2、jagged和notch1基因表达水平上调(P<0.05)。在低溶氧胁迫下,大口黑鲈通过脂质代谢重塑促进肝脏AA累积,进而代谢生成PGE2及EETs激活血管生成通路。研究结果揭示了鱼类通过AA代谢调控血管生成应对低溶氧胁迫的新机制,为水产养殖中营养干预缓解低溶氧应激提供了理论依据。

摘要: 为探究不同养殖模式对大口黑鲈(Micropterus salmoides)品质的影响,实验采集了水库圈养(R)、池塘养殖(P)、流水槽养殖(C)及高位池养殖(H) 4种模式下的大口黑鲈,比较其生长指标、表观特征、肌肉质地、营养组成及风味特性的差异。结果表明:各组间特定生长率无明显差异(P>0.05),但R组增重率及饵料系数略占优势; C组的肥满度、脏体比和肝体比显著低于其余3组(P<0.05)。4种模式下大口黑鲈的质构特性无显著变化(P>0.05),但R组肌纤维直径更小,密度更大,质地更好;且R组粗蛋白含量较其他组有显著提升(P<0.05)。氨基酸分析显示, R组的必需氨基酸(EAA)含量最高;且呈鲜味氨基酸(DAA)含量显著高于其他3组(P<0.05),其∑DAA/TAA比值最高达38.58%,鲜味潜力突出。同时4组的必需氨基酸比例∑EAA/TAA比值、∑EAA/NEAA比值均符合FAO/WHO理想蛋白标准。脂肪酸组成方面, R组的多不饱和脂肪酸(∑PUFA)含量最高,其中n-6不饱和脂肪酸占比达34.57%。此外大口黑鲈肌肉中共检测到52种风味物质, R组含有的愉悦气味物质含量及种类更多。综合表明水库圈养模式可促进大口黑鲈生长、降低饵料系数,并显著提升大口黑鲈肌肉营养均衡性、风味丰富度及质构特性,其优势进一步提升了大口黑鲈商业价值,可作为更优的养殖模式进行推广。