摘要: 黑素皮质素受体1基因(mc1r)是动物体色形成的关键调控因子,为探讨mc1r基因在橘色双冠丽鱼(Amphilophus citrinellus)体色褪黑过程中的调控作用,本研究利用cDNA末端快速克隆(RACE)技术首次获得橘色双冠丽鱼mc1r的cDNA全序列,并利用荧光定量PCR分析了橘色双冠丽鱼体色变化不同时期和不同组织中mc1r基因的表达差异。获得cDNA全长序列1 699 bp,共编码氨基酸325个,开放阅读框(ORF)为978 bp,5′非编码区(UTR)497 bp,3′非编码区(UTR)224 bp。氨基酸序列和系统发育分析表明,橘色双冠丽鱼与人(Homo sapiens)、斑马鱼(Danion rerio)、大黄鱼(Larimichthys crocea)和尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)相似度分别为55.1%、77.1%、90.15%和96.92%。荧光定量PCR结果表明,mc1r在橘色双冠丽鱼胚胎发育9个时期均有不同程度的表达,且随着胚胎发育表达量逐渐减少,推测在胚胎发育的早期阶段该基因的基础表达水平即可启动参与体色细胞形成的腺苷酸循环。在"黑色-灰白色-黄色"三个体色蜕变期,mc1r在尾鳍、鳞片、皮肤的表达均呈先降低再稍升高的变化趋势,均在灰白色过渡期呈现最低值,推测这与mc1r和Agouti存在竞争性结合,及mc1r、tyr、tyr1三者是否处于适当、平衡状态有关。橘色双冠丽鱼长至近成鱼期,非正常褪黑鱼(即未完全褪黑)各组织mc1r表达量均比正常褪黑鱼(完全褪黑)高,其中皮肤组织的相对表达量显著高于正常褪黑鱼(P <0.05),可见鱼体体表褪黑程度与mc1r表达量呈负相关。在成熟鱼体11个组织中mc1r均有不同程度的表达,其中,鳞片显著高于其他组织(P <0.05),说明橘色双冠丽鱼mc1r的主要表达部位是鳞片。本研究通过了解体色变异相关基因表达特征,为鱼类体色遗传和体色改良研究积累资料。

摘要: 芳香化酶活性发现在脊椎动物脑、脑垂体和性腺中 ,但在文昌鱼脑和哈氏窝的组织特异性定位尚无可利用资料。本文用免疫细胞化学和原位杂交技术 ,首次发现芳香化酶活性组织特异性定位在幼年和性腺发育不同时期雌、雄文昌鱼神经系统 (脑和脊髓 )、轮器、哈氏窝和性腺中。芳香化酶蛋白和转录物在前脑、中脑、脊髓、轮器和哈氏窝十分丰富 ,而后脑、早期卵巢和精巢不够丰富 ;没有芳香化酶表达的部位是哈氏窝另两种细胞 (不规则形细胞和带纤毛粘液细胞 )以及成熟卵巢和精巢 ;芳香化酶免疫活性物质分布在胞质 ,核为阴性。芳香化酶在文昌鱼神经系统、哈氏窝和性腺的分布模式与低等脊椎动物中的分布模式极为类似 ,尤其是芳香化酶在脑内调节哈氏窝分泌活动的神经内分泌中枢表达 ,并形成类似脊椎动物的文昌鱼原始的脑 -芳香化酶调节系统。这些结果有力地证明 ,文昌鱼脑和哈氏窝高水平的芳香化酶活性像在其它脊椎动物中一样 ,对局部介导睾酮芳香化起着关键作用 ,同时还可能影响脑 -芳香化酶系统参与调节哈氏窝的分泌活动

摘要: 硬骨鱼胚后发育中 ,边缘生长区及胚胎裂缝代表神经形成的活跃位点 ,同时对新的神经胶质细胞和光感器 (视锥和视杆细胞 )的形成有积极作用。此项工作首次研究红腹罗非鱼 (硬骨鱼类辐鳍亚纲 )视网膜中视网膜色素上皮和光感器的胚后生长及分化。采用光学和透射电子显微镜术分析了四个大小不同的鱼群组。正如至目前为止 ,在已研究过的大多数其它硬骨鱼中所观察到的结果一样 ,我们研究的所有样本中 ,成年红腹罗非鱼的视网膜表现为气球样扩张。此外 ,尚具有一弯曲的、有开口的胚胎裂缝 ,表明眼的不对称性胚后生长。在胚后分化过程中 ,视网膜色素上皮表现为自外周向中央的梯度变化 ,即边缘生长区周围 ,该上皮仅含有球形的黑色素体 ,而在中央部位发育为长形的黑色素体及顶端突起。同样 ,发育中的光感受器亦表现为由侧面向中央逐步发展变化的程序。光感觉器先形成 1内节及其附属的突起 ,随后内节分化为一椭圆体加一肌样结构 ,这两种成分与其它已研究过的硬骨鱼视网膜中观察到的胚胎发育程序大致相符。因此提供了另一线索 :硬骨鱼胚后视网膜的生长极大地剌激 (促进 )了胚胎视网膜的发育。本研究表明 :双体视锥细胞可能是发育中的单体视锥细胞裂开的结果

摘要: 本文应用连续组织切片技术和组织学观察 ,对出膜后 1～ 6 0天的斜带石斑鱼 (Epinepheluscoioides)各期仔鱼、稚鱼和幼鱼的淋巴器官组织进行了研究 ,描述了淋巴器官的个体发育过程和组织学结构特征。研究表明 :实验水温为 2 2 0～ 2 7 8℃时 ,孵化后第 10天出现头肾原基。头肾原基由未分化的造血干细胞组成。随着鱼体的生长 ,头肾原基的造血干细胞很快分化成不同类型的细胞 ;头肾主要由网状内皮系统支持下的淋巴造血组织构成。第 11天出现脾脏原基。脾脏原基由造血细胞组成 ,淋巴化速度相对较慢。脾脏在整个发育过程中 ,红细胞和类红细胞占优势 ,没有红髓和白髓之分。第 13天出现胸腺原基。胸腺发育速度较快 ,是明显的淋巴器官。胸腺主要由胸腺细胞 (淋巴细胞 )和上皮细胞组成 ,外区和内区没有明显的界限 ,但很容易区分。胸腺外被单层的上皮细胞层与咽腔相隔 ,保持浅表的位置 ,并且在整个发育过程中 ,胸腺与头肾是独立分开的。免疫器官原基出现顺序是头肾、脾脏和胸腺 ;而免疫器官淋巴化的顺序是胸腺 ,头肾和脾脏。和其它硬骨鱼类一样 ,斜带石斑鱼在早期发育阶段 ,淋巴器官的发育较迟 ,出现相对滞后的现象

摘要: 本文对鲈鱼 (Lateolabraxjaponicus)胚胎进行了玻璃化冷冻保存研究 ,筛选出了浓度较低、玻璃化程度较稳定的 5种玻璃化液 ,冷冻时形成玻璃化的概率在 4 8 1%～ 10 0 % ,在 35～ 4 3℃的水浴中解冻时保持玻璃化的概率在 4 4 4 %～ 6 3 0 % ;玻璃化液VSD2在解冻时保持玻璃化的概率最高。对鲈鱼神经胚、 2 0对肌节胚、尾芽胚、心跳胚、出膜前胚在玻璃化液VSD2中的适应能力及适合于玻璃化冷冻的胚胎时期进行了比较 ,结果显示 :不同时期胚胎对玻璃化液的耐受能力不同 ,鲈鱼神经胚耐受能力最低 ,心跳胚耐受能力最强 ,出膜前期胚次之 ,心跳胚和出膜前胚适合于进行玻璃化冷冻。对 0 5mol/L蔗糖的洗脱时间进行了选择 ,结果显示 ,洗脱10～ 2 0min效果较好。利用玻璃化程度较好的VSD2对鲈鱼不同时期胚胎进行超低温 ( - 196℃ )冷冻 ,获得了2 1%～ 2 7 9%的透明胚。将鲈鱼心跳胚冷冻解冻后获 2粒复活胚 ,培养至出膜期 ,成活 4 2～ 5 0h ;出膜前期胚在冷冻解冻后有 1粒胚复活 ,并且孵化出鱼苗