摘要: 目的建立一种在体内实时观察黑色素瘤发生发展的斑马鱼模型,为黑色素瘤的相关研究提供一个便捷的活体模型。方法构建红色荧光蛋白标记的黑色素瘤表达系统p MITFa1-Red V12/h Ras,利用小鼠B16黑色素细胞验证其表达效果。再将p MITFa1-Red V12/h Ras载体导入1-细胞期的斑马鱼受精卵中,采用活体成像系统实时观察黑色素瘤在斑马鱼体内的形成过程。结果 p MITFa1-Red V12/h Ras载体在B16细胞中成功表达。显微注射p MITFa1-Red V12/h Ras载体到1-cell期的斑马鱼受精卵3 d后,在荧光显微镜下观察到荧光标记的黑色素瘤;8周后,肉眼可以明显观察到黑色素瘤。黑色瘤的成瘤率达100%。p MITFa1-Red V12/h Ras载体被显微注射到TG(zlyz:EGFP)转基因斑马鱼的受精卵中后,在活体成像系统下清晰地观察到红色荧光标记的黑色素瘤细胞与绿色荧光标记的巨噬细胞的相互作用。结论成功构建了经济简便、易操作的在体内实时观察黑色素瘤的斑马鱼模型。

摘要: 炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）是一类由遗传、免疫、环境等多因素共同驱动的慢性复发性肠道疾病，主要包括溃疡性结肠炎（ulcerative colitis）和克罗恩病（Crohn's disease） 2种类型。当前的IBD疾病研究中，小鼠与斑马鱼是最常用的实验动物。其中，斑马鱼凭借其独特优势成为理想模型。相较于啮齿类动物，斑马鱼具有生长周期短、繁殖能力强、体型小巧及胚胎透明等特点，不仅便于动态追踪连续性病理变化，还能高效实现高通量药物筛选。斑马鱼的基因与人类同源性达70%以上，肠道细胞组成及发育过程与人类高度相似，且其肠道菌群与人类肠道微生态特征接近，为研究肠道菌群与IBD的关联奠定了良好基础。随着生物技术的发展，基于化学诱导和基因工程构建的斑马鱼IBD模型，可精准模拟人类IBD的核心病理特征，如肠壁增厚、炎性细胞浸润、促炎因子表达升高等，该模型在揭示发病机制和开发靶向药物中发挥了关键作用。本文首先阐述斑马鱼的肠道特征及IBD模型特点，进而从遗传、免疫、环境与饮食、感染等维度深入剖析其在IBD发病机制研究中的应用，同时综述其在抗炎药物、益生菌、中药等治疗药物开发中的研究进展，旨在为科研工作者在临床前研究的各阶段合理运用斑马鱼模型提供参考，以推动IBD基础研究领域的深入发展，并期望能加速该领域的突破。

摘要: 目的 探究斑马鱼胚胎早期发育过程中Micall2a基因的表达模式，以及该基因对斑马鱼血管发育的影响。方法 使用Tg (fli:GFP)转基因斑马鱼（用绿色荧光蛋白标记血管）和野生型斑马鱼（AB），采用全胚胎原位杂交技术检测其早期胚胎不同发育阶段的Micall2a基因表达水平。通过显微注射吗啉反义寡核苷酸下调Micall2a基因，并采用实时荧光定量PCR技术检测该基因在斑马鱼胚胎不同发育阶段mRNA表达水平。采用激光共聚焦显微成像技术，观察并分析Micall2a基因下调后斑马鱼的血管表型变化。结果 受精后24 h (24 hours post-fertilization,24 hpf)、36 hpf和48 hpf的斑马鱼早期胚胎的脑、心脏、血管系统中均有Micall2a基因表达。显微注射吗啉反义寡核苷酸后Micall2a基因的mRNA水平增加，抑制斑马鱼胚胎的血管发育，导致斑马鱼节间血管发育缺陷。结论Micall2a基因表达下调可以抑制斑马鱼血管的发育。

摘要: 神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）是儿童最常见的实体恶性肿瘤，居我国儿童肿瘤发病率第四位，占儿童肿瘤死亡人数的15%，高危患者存活率低。目前对于NB的发病及药物治疗机制知之甚少。NB动物模型可以表征NB发展特征，是研究预防和治疗NB的重要工具，然而尚未有一种动物模型可以模拟人类NB的所有特征。本文介绍了当前研究较多的几种NB动物模型（小鼠模型、鸡胚绒毛尿囊膜模型和斑马鱼模型），并对每种NB动物模型的种类、构建方法、特征、优缺点及研究进展做了详细阐述，同时对NB的应用方向及前景进行概括，以期为NB动物模型构建和NB治疗等提供理论依据。

摘要: 目的 解决实验用斑马鱼出现的生长发育滞后、产卵量不足等问题，以提高实验用斑马鱼的繁殖效率和使用寿命。方法 取受精后2月龄的斑马鱼，以投喂商品化的观赏鱼专用颗粒饲料或冰冻成体卤虫为实验组，以投喂活的幼体卤虫为对照组。不同饵料投喂70 d内，通过测量体长和体重评估斑马鱼生长性能，通过统计产卵量和产卵率等评估斑马鱼繁殖性能。对甲状腺肿大病症明显的斑马鱼投喂颗粒饲料，通过测量其甲状腺肿大病灶直径大小变化评估颗粒饲料对该病症的抑制效果。将3种饲料配合使用，对饲养方案进行优化，通过繁殖性能测试验证其用于斑马鱼饲养的实际效果。结果 从60 dpf开始投喂颗粒饲料直到111 dpf，颗粒饲料组的体长、体重均日渐优于对照组（P<0.000 1）。从60 dpf开始投喂成体卤虫直到96 dpf，成体卤虫组的体长增长趋势与对照组基本相同，而75～82 dpf时成体卤虫组的雌鱼体重极明显高于对照组的雌鱼（P<0.000 1）。成体卤虫组斑马鱼相比于对照组，雌雄间体色差异显著，在75 dpf时，已可以通过体色差异准确区分性别；而且成体卤虫组斑马鱼3月龄时产卵率显著高于对照组（94.44%vs 27.78%,P<0.05）。另外，投喂颗粒饲料130 d后，所有实验用斑马鱼的甲状腺肿大病灶均消失。根据以上结果，将3种饲料组合，优化大于2月龄的斑马鱼饲养方案为上午保持喂食幼体卤虫，下午用颗粒饲料和成体卤虫交替投喂，直至12月龄斑马鱼的产卵率可以保持70%，产卵量达到（233.6±3.95）颗，受精率和孵化率分别为97.47%和90.24%，均显著高于原方案饲养组（P<0.001或P=0.01）。结论 相比幼体卤虫饵料，商品化的颗粒饲料能显著提升斑马鱼的生长性能，并对甲状腺肿大病症有治疗作用，而成体卤虫饵料能显著提高斑马鱼的早期繁殖性能。优化后的饲养方案成功提高了斑马鱼的产卵效率，并延长其繁殖使用寿命，能更好地保障相关科学研究的开展。