摘要: 目的 探讨人工合成孕激素(醋酸甲羟孕酮，MPA)暴露对雌性食蚊鱼(Gambusia affinis)的雄激素效应。方法 将成年雌性食蚊鱼随机分为4组,包括对照组和40 ng/L(低密度组)、200 ng/L (中密度组)和1 000 ng/L(高密度组)等3个MPA实验暴露组，并设置平行组。持续暴露28 d后观察与测定食蚊鱼的体长(BL)、体质量(BW)、身体健康指数(CF)、臀鳍第3鳍条分节数(FJ)、第4、5、6鳍条长度(FL)变化和第14、15、16椎体脉棘的形态变化等5项指标，并在7 d、14 d、21 d、28 d测定了卵黄蛋白原基因(VTGα)、雄激素受体基因(ARα)和细胞色素P450芳香化酶基因(CYP19α)m RNA表达水平的变化。结果 食蚊鱼经MPA暴露28 d后，与对照组相比, 200 ng/L和1 000 ng/L实验组食蚊鱼的BL、BW和CF均无明显变化(分别P>0.05)。臀鳍第3鳍条分节数和第6鳍条长度变化不明显(P>0.05)，但第4、5鳍条的长度显著增加(P<0.01)。暴露在200 ng/L和1 000 ng/L MPA中、高浓度组食蚊鱼的第14椎体脉棘的总长(L)、尾部尖端到脊的高度(D)值,第15椎体脉棘的投影长(P)、P∶D值和第16椎体脉棘的P、L∶D、P∶D值分别呈现显著性变化(P<0.05或P<0.01)，椎体脉棘伸长，且与脊椎骨接近垂直,显示形态雄性化效应。与对照组相比，低浓度组(40 ng/L MPA) VTGα, CYP19α基因的表达量上升(P<0.01)，而ARα表达被抑制(P<0.05);中浓度组VTGα,CYP19α, ARα基因的表达量都显著上升(P<0.01);高浓度组CYP19α, ARα基因的表达量显著上升(P<0.01)，而VTGα的表达量则被抑制(P<0.01)。结论 MPA暴露致雌性食蚊鱼骨骼出现形态雄性化，目标基因表达水平的变化结果证明MPA对食蚊鱼具雄激素效应，表明MPA是一种具有雄激素效应的孕激素。

摘要: 目的 采用阿霉素(doxorubicin, DOX)作为阳性药物建立斑马鱼的心血管毒性模型。方法 确定DOX的10%致死浓度(LC10)与最大非致死浓度(MNLC),设置4个不同浓度的DOX溶液组(浓度:MNLC/10、MNLC/3、MNLC和LC10)、空白对照组(养鱼水处理组)和溶剂对照组(0.9%NaCl注射液)处理一定阶段的野生型AB系斑马鱼幼鱼至实验终点受精后72 h(72 hpf)。在72 hpf处收集药物处理的斑马鱼，Western blotting分析心肌肌钙蛋白T(cTnT)和肌红蛋白(Mb)的表达，在立体解剖显微镜下观察心血管系统的形态学改变，荧光定量R T-P C R检测斑马鱼组织中miRNA146a的表达。结果 在浓度≤MNLC/10时, DOX不诱发斑马鱼心血管毒性;当浓度≥MNLC/3时，可诱发斑马鱼心血管毒性，表现为血流变慢、血流缺失、静脉窦处瘀血和静脉窦处水肿，且具有剂量相关性。荧光定量RT-PCR结果显示，DOX的三个剂量MNLC/3、MNLC、LC10均显著提高miRNA146a的表达(与空白对照组比较，P<0.01)，且存在一定的剂量关系。Western blotting结果显示, DOX模型组的cTnT和Mb蛋白表达与空白对照组比较均未见明显变化(P>0.05)。结论 DOX对斑马鱼的心血管毒性作用明显,可以作为药物评价的心血管毒性模型。

摘要: 目的 建立操作便捷、快速、稳定的活体斑马鱼血栓模型。方法 研究不同浓度苯肼诱导下斑马鱼血栓形成情况。以2dpf (days post fertilization, dpf,受精后天数)健康AB系野生型斑马鱼作为实验动物,将其暴露于不同浓度(0.5μmo L/L、1μmo L/L、2μmo L/L、4μmo L/L、8μmo L/L)的苯肼中,同时设置空白对照组(胚胎养殖用水)和溶剂对照组(0.1%乙醇),处理一段时间后,通过观察斑马鱼尾静脉血流及血栓形成情况进行定性分析,利用邻联茴香胺染色法对心脏红细胞染色强度进行定量分析。结果 苯肼处理组(模型组)有血栓形成，与溶剂对照组相比有显著性差异(P<0.001)。血栓形成率先增高后逐渐减缓, 0.5μmo L/L、1μmo L/L血栓形成较少,血栓形成率分别为(19.79±1.55)%、(43.28±1.82)%、2μmoL/L、4μmoL/L、8μmoL/L均诱发较为严重的血栓,血栓形成率分别为(69.85±1.12)%、(70.56±4.60)%和(72.25±2.11)%，三组间没有差异。结论 苯肼浓度2μmoL/L为诱发稳定的活体斑马鱼血栓模型的最佳浓度。

摘要: 近年来，随着生命科学的高速发展，实验用鱼在毒理学、遗传学、发育生物学和医学等研究中的使用量大幅增加，逐渐成为重要的新型模式生物。与此同时，实验用鱼的福利问题也日益得到关注。尽管与陆生实验动物相比，实验用鱼福利的研究水平还处于相对早期阶段，但欧美等发达国家已经建立了相应的法律法规，以保障实验用鱼在研究中的福利。本文阐述了实验用鱼福利研究的发展现状，讨论需要重视和提高福利的原因，从饲养阶段和实验阶段两方面深入探究影响福利的因素，并探索提高福利的对策，旨在促进我国实验用鱼福利的不断提升。

摘要: 目的 观察和分析斑马鱼体肾的微细结构，并对其分泌的外泌体进行分离鉴定。方法 应用光学显微镜和电子显微镜技术系统观察斑马鱼体肾的显微结构和超微结构，用纳米颗粒跟踪分析（nanoparticle tracking analysis,NTA）技术检测外泌体粒径大小。结果 斑马鱼体肾紧贴并平行于脊椎，肾单位由肾小管和肾小体组成，其中肾小管可细分为近曲小管、远曲小管及颈段3种类型，肾小体由肾小球和肾小囊构成；经高碘酸-希夫（periodic acid-Schiff,PAS）染色后，可见近曲小管富含糖原颗粒，其游离面有明显的刷状缘结构。透射电子显微镜下，在肾小管的管腔观察到外泌体分布，上皮细胞游离面的胞质有少量多囊泡体和大量的晚期内涵体分布，肾小管的顶端和肾小球足细胞中亦观察到少量多囊泡体分布。通过CD9、CD63和TSG101免疫组织化学和免疫荧光检测显示，多囊泡体及其外泌体在肾小管管腔的游离面高表达，在肾小体和管腔内表达较弱。NTA和透射电子显微镜观察结果显示，分离获得的斑马鱼体肾外泌体呈茶托状，粒径众数为144.4 nm，符合外泌体形态和直径大小特征。结论斑马鱼体肾具有哺乳动物肾脏的典型结构，为体内的泌尿器官。肾小管具有分泌外泌体的能力，其形成是多囊泡体向细胞游离面释放到胞外的过程。本研究结果为水生实验动物泌尿器官的功能研究及相关模型的开发应用奠定了形态学基础。