摘要: 为了探究隐蔽场所对鱼类的生长、个性和生理生化的影响,研究通过前期实验筛选出中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)偏好的隐蔽场所(水草、树枝、阴影区域),设置了隐蔽场所组和无隐蔽场所组,进行为期60d的生长实验。生长实验结束后称量实验鱼体重、体长,并从每个养殖单元随机挑选5尾实验鱼取血浆测定皮质醇,取肝胰腺和脑测定抗氧化指标(T-AOC、SOD、CAT);其余实验鱼进行个性(探索性、活跃性、勇敢性和社会性)和焦虑样行为的测定。研究发现:(1)隐蔽场所组中华倒刺鲃生长速度显著高于无隐蔽场所组(最终体重增重35%,特定生长率增加18%,增重率提高45%);(2)隐蔽场所组中华倒刺鲃勇敢性显著高于无隐蔽场所组(P<0.05,且首次潜出时间缩短30.4%),探索性、活跃性和社会性无显著差异;(3)隐蔽场所对焦虑样行为无显著影响,但隐蔽场所组皮质醇水平显著低于无隐蔽场所组(P<0.001);(4)隐蔽场所组中华倒刺鲃肝胰腺SOD活力和T-AOC活力显著低于无隐蔽场所组(P<0.05),而其脑SOD活力则相反(P<0.05)。研究表明:虽然隐蔽场所对中华倒刺鲃的个性和焦虑样行为影响较小,但养殖环境隐蔽场所的设置可以促进中华倒刺鲃的生长速度、降低应激水平和抗氧化能力。

摘要: 为了提高CRISPR/Cas9基因编辑系统的基因编辑效率,研究设计优化了Cas9蛋白,并通过大肠杆菌密码子优化、原核表达、固定化金属亲和层析、分子筛层析及超滤离心浓缩获得了具有较高纯度和活性的HeiCas9蛋白。将HeiCas9蛋白、Cas9蛋白(T品牌)、zcas9 mRNA分别以不同的浓度梯度,配合斑马鱼黑色素合成关键基因tyr的gRNA,在斑马鱼胚胎中进行了tyr基因敲除,比较了不同组别的tyr基因编辑效率。在400 ng/μL的工作浓度(为获取最佳基因编辑效果而建议的剂量)下, HeiCas9蛋白比T品牌的Cas9蛋白发挥出更高的基因编辑效率,并保持了较低的胚胎毒性。进一步将HeiCas9蛋白用于稀有鮈鲫dnd和金鱼prkdc的基因敲除,取得了良好的效果。综上,研究成功制备出了高活性的HeiCas9蛋白,并在3种实验室小型鱼类胚胎的基因编辑中取得了良好的应用效果。

摘要: 研究以草鱼(Ctenopharyngodon idella)为实验对象,通过在基础饲料中添加0(对照组, Control)、 0.9 g/kg(低剂量组, LD)、1.8 g/kg(中剂量组, MD)、2.7 g/kg(高剂量组, HD)的枯草芽孢杆菌源抗菌肽Sublancin,采用酶联免疫吸附测定、组织切片HE染色、透射电镜扫描(TEM)及实时荧光定量PCR等技术探究Sublancin对草鱼生长、抗氧化能力及肠道健康的影响。结果发现:(1)与对照组相比,中剂量组草鱼终末体重(FBW)、增重(WG)及增重率(WGR)显著提高,中、低剂量组特定生长率(SGR)显著升高(P<0.05);(2)相较对照组,抗菌肽组草鱼不同肠段的绒毛长度、宽度及肌层厚度显著增加,不同肠段的隐窝深度显著降低(P<0.05);(3)与对照组相比,中、低剂量组草鱼肠道微绒毛数量增加且排列更整齐,紧密连接电子密度更高;(4)与对照组相比,中、低剂量组草鱼血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著升高(P<0.05),中剂量组草鱼血清白细胞介素-22(IL-22)水平显著升高,抗菌肽组草鱼血清内毒素(LPS)含量显著降低,抗菌肽组草鱼中肠Claudin c、Occludin及低剂量组草鱼中肠ZO-2紧密连接相关蛋白基因表达水平显著提高(P<0.05)。综上,适量抗菌肽Sublancin能提高草鱼的生长性能、抗氧化能力,增强肠道屏障,对肠道健康有积极影响;但过量抗菌肽会抑制草鱼生长,减弱其氧化应激能力与肠道健康,研究结果为抗菌肽在水产养殖业中的应用提供理论依据。

摘要: 为了探究斑马鱼中肝糖代谢是否存在两性异形,研究通过对野生型斑马鱼进行肝脏形态学观察（透射电子显微镜）、组织学分析、肝糖原含量测定,发现雄性个体的肝糖原含量显著高于雌性（P<0.01）。在stat5b突变体(stat5b^–/–)中进行组织学分析、肝糖原（Liver Glycogen,LG）测定,结果显示,stat5b^–/–雄性个体的肝糖原含量明显低于对照组（P<0.05）,而雌性中无显著差异（P>0.05）。基于此,stat5b基因功能的缺失削弱了肝糖原含量的两性异形。通过转录组分析筛选出差异表达基因并进行KEGG通路富集分析,发现这些差异表达基因显著富集在糖代谢相关的通路中,并从中筛选出可能与Stat5b具有互作关系的候选基因糖原合成酶2 （Glycogen Synthase 2,gys2）。转录因子结合位点（Transcription Factor Binding Site,TFBS）预测和双荧光素酶报告基因实验的结果显示,TFBS的预测区域具有转录活性,Stat5b正调控gys2。在stat5b过表达转基因（stat5b-TG）斑马鱼中发现,雄性个体的肝糖原含量明显高于对照组（P<0.05）,而雌性中并无显著差异（P>0.05）。所以,过表达stat5b增大了肝糖原含量的两性异形,这与stat5b突变体的趋势相反。转录因子Stat5b可能通过转录调控gys2来调节肝糖原合成的两性异形,从而维持鱼类的肝糖原代谢稳态。

摘要: 为减缓水电站运行对坝下河流鱼类繁殖的不利影响、充分发挥水库的生态效益,自2017年起开展了溪洛渡-向家坝联合生态调度。研究基于2017—2022年长江上游江津江段早期资源调查数据,评估梯级水库联合生态调度对坝下江段四大家鱼自然繁殖效果,并识别影响四大家鱼自然繁殖的关键水文指标。结果表明,2017—2022年江津江段四大家鱼鱼卵径流总量为0.42亿—4.01亿粒,总体呈波动变化趋势,其中2022年最高（约4.01亿粒）; 6年间共观察到25次产卵高峰期,主要集中在6月上旬至7月上旬。生态调度期间,四大家鱼鱼卵径流量为0.001亿—1.088亿粒,占当年总卵径流量的0.06%—34.47%,其中2022年超过30%, 2018年超过10%。从生态调度效果来看,与生态调度相吻合的繁殖高峰期占总繁殖高峰期的16%,表明生态调度有效促进坝下江津江段四大家鱼自然繁殖活动。水文需求分析结果表明,江津江段适宜四大家鱼产卵流量为6000—15000 m³/s,适宜水温为21—23℃。产卵量与水文指标相关性分析显示,四大家鱼产卵量与洪峰流量、流量涨幅及流量增长率具有显著正相关（P<0.05）。根据四大家鱼早期资源调查结果,建议在5月中下旬及6月上旬开展2—3次生态调度,并保持江津江段涨水持续时间维持3d以上且流量日增长率维持在900 m³/s以上,有利于促进江津江段四大家鱼大规模繁殖。研究成果可为金沙江梯级水库调度方案制定提供科学依据。