摘要: 为了探究草鱼防御素的免疫调节作用,研究通过Clustal Omega多序列比对和I-TASSER二级结构预测,发现草鱼β-防御素1(Ctenopharyngodon idella β-defensin 1, CiBD1)是一类具有两亲性的富含半胱氨酸的小分子阳离子肽,其结构在硬骨鱼类中高度保守;通过构建pET-32a-CiBD1原核表达载体, IPTG诱导表达后经过Ni~(2+)亲和层析法纯化和肠激酶酶切获得CiBD1重组蛋白,通过CFU平板法验证了CiBD1的抑菌活性,当蛋白浓度达到200μg/mL时,对革兰氏阴性菌(G~+)及革兰氏阳性菌(G~–)都具有显著的抑制活性;趋化实验表明CiBD1在50 ng/mL时对草鱼原代白细胞趋化活性最佳;通过个体实验探究了CiBD1重组蛋白对嗜水气单胞菌灭活疫苗的免疫佐剂效应,发现添加CiBD1佐剂组死亡率显著低于单独疫苗组,且该组IgM和MHCⅡ转录水平及血清中补体3(C3)和溶菌酶含量都显著高于对照组。研究表明CiBD1重组蛋白在细菌抗感染免疫中发挥着重要作用,在水产养殖中具有一定的应用前景。

摘要: 为研究雄激素受体(Androgen receptor, Ar)在卵巢发育中的作用机制,文章以雄性激素受体敲除的雌性斑马鱼(Danio rerio; ar~(–/–))为研究对象,利用ELISA和蛋白质免疫印迹等方法分析Ar对斑马鱼肝脏中卵黄蛋白原(Vitellogenin, Vtg)产生、母体营养通过Vtg运输、卵黄形成和卵巢成熟的影响。研究发现在ar~(–/–)雌性斑马鱼的肝脏中, Vtg的产生和雌激素受体的表达水平显著降低。在ar~(–/–)雌性斑马鱼中的卵巢质量、脂质含量和类胡萝卜素含量均显著下降,表明Ar的缺失可导致雌性斑马鱼通过Vtg转运到卵巢的脂质和类胡萝卜素等营养物质供应减少。此外, ar~(–/–)雌性斑马鱼中与卵巢发育相关的几个基因转录表达水平显著下调,这与卵巢发育异常存在相关性。研究结果表明, Ar的缺乏可通过对肝脏中的雌激素受体表达的影响,降低肝脏Vtg蛋白的合成,从而损害由Vtg向卵巢的营养物质运输和卵黄的正常形成,影响卵巢发育。研究阐明了雄激素信号通路与体内肝脏Vtg产生之间的联系。

摘要: 为研究水环境浓度四环素(Tetracycline, TC)长期暴露对鱼类的影响,实验以吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)为实验模型,将其暴露于0、400和800 ng/L三种四环素水平下10周。结果表明,相较于对照组,四环素暴露显著提高了生长性能,但增加了肝脏中甘油三酯含量和四环素浓度。脂肪生成基因表达(fas、scd、accα、srebp1和pparγ)被上调,但降低了与脂肪分解相关基因的表达(atgl、hsl、cpt1和pparα)。此外, 6-磷酸葡萄糖脱氢酶(6PGD)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)、异柠檬酸脱氢酶(ICDH)、苹果酸脱氢酶(ME)及脂肪酸合成酶(FAS)的活性显著增加,但肉碱棕榈酰转移酶1(CPT1)活性则被显著抑制,这与基因表达相一致。而且,四环素暴露显著降低过氧化氢酶、总超氧化物歧化酶的活性及总抗氧化能力,并诱导了鱼类的氧化应激,导致丙二醛水平显著增加。因此,与环境相关四环素浓度可促进吉富罗非鱼的生长性能、上调产脂代谢、降低抗氧化能力并诱导脂质过氧化。

摘要: 以冰鲜鱼、配合饲料和混合投喂3种饵料,研究其对大口黑鲈(Micropterus salmoides)生长性能和肠道微生物的影响。结果表明,在生长性能方面,配合饲料组试验鱼的末均重、体长、增重率和特定生长率均显著低于冰鲜鱼组和混合投喂组(P<0.05),混合投喂组最后养成规格最大,生长速度也最快,但与冰鲜鱼组差异不显著(P>0.05)。在肠道微生物群落的丰富度与多样性方面,配合饲料投喂组丰富度最高,冰鲜鱼组最低,但冰鲜鱼组多样性最高,配合饲料投喂组次之,混合投喂组最低。在门级水平上,厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteriota)、蓝藻门(Cyanobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidota)、浮霉菌门(Planctomycetota)、绿弯菌门(Chloroflexi)和酸杆菌门(Acidobacteriota)是大口黑鲈肠道优势菌群。属级水平上,冰鲜鱼组的优势菌属主要为支原体属(Mycoplasma)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)及聚球菌属(Synechococcus＿CC9902);配合饲料组优势菌属为克雷伯氏菌属(Klebsiella)、罗姆布茨菌(Romboutsia)及分枝杆菌属(Mycobacterium);混合投喂组优势菌属则是支原体属(Mycoplasma)、厌氧氨氧化菌(Candidatus＿Brocadia)及罗姆布茨菌(Romboutsia)。功能预测表明,配合饲料投喂组大口黑鲈肠道菌群在“能量生产与转化”“碳水化合物运输和代谢”“氨基酸转运与代谢”和“脂质转运与代谢”等功能类群的相对丰度最高,而冰鲜鱼组肠道菌群在“核苷酸的转运和代谢”“辅酶运输和代谢和翻译”“核糖体结构和生物发生”等功能类群的相对丰度占优。饵料对大口黑鲈的生长、肠道菌群组成和功能都具有显著的影响。研究为大口黑鲈的配合饲料开发和健康养殖提供了理论依据。

摘要: 为了进一步验证转化生长因子(TGF-β)/Smads信号通路在脯氨酸(Pro)促进鱼鳔胶原蛋白沉积中的作用,研究利用TGF-β/Smads通路抑制剂干扰,分析干扰前后鱼鳔中胶原蛋白含量及相关基因转录水平的变化。根据前期实验获得的Pro最佳添加量,制定饲料配方,饲喂浅色黄姑鱼1月后,通过腹腔注射氧化苦参碱(Oxymatrine)为期1个月。在实验结束后,测量各项指标,评估干扰前后, Pro促进鱼鳔胶原蛋白沉积的效果及变化。实验结果表明:Pro能显著上调TGF-β/Smads通路中相关基因的表达,并促进鱼鳔胶原蛋白沉积,Oxymatrine干扰显著下调了TGF-β/Smads通路中相关基因(Col1α1、Col1α2、TGF-β和Smad2)表达,同时导致鱼鳔中胶原蛋白沉积下降。由此推断Pro通过激活TGF-β/Smads通路促进鱼鳔中胶原蛋白沉积,而Oxymatrine干扰抑制了TGF-β/Smads通路,导致Smad2与Col1α2启动子结合受阻,进而下调了Col1α2基因的转录,从而降低鱼鳔中胶原蛋白的沉积。综上表明, TGF-β/Smads信号通路在Pro促进浅色黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白沉积过程中起着重要调控作用,其中Col1α1、Col1α2、TGF-β和Smad2扮演着重要角色,研究结果可为鱼类胶原蛋白代谢的营养调控提供新思路和新方法。