摘要: 研究以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)为实验对象,运用厌氧培养的方法,研究了饥饿状态下草鱼肠道黏膜固有微生物的类群及其在不同肠段的分布。实验结果显示草鱼前肠、中肠与后肠中细菌的数量分别是3.17×10~3、1.63×10~4和1.79×10~7 cfu/g。研究共分离到274株单菌落,经16S r RNA鉴定,分别属于拟杆菌属(Bacteroides spp.)、鲸杆菌属(Cetobacterium spp.)、梭形杆菌属(Fusobacterium spp.)、气单胞菌属(Aeromonas spp.)、希瓦氏菌属(Shewanella spp.)、芽孢杆菌属(Bacillus spp.)、泛菌属(Pantoea spp.)和柠檬酸杆菌属(Citrobacter spp.)8个种类,其中专性厌氧细菌的数量占9.1%,兼性厌氧细菌的数量占90.9%。进一步分析发现,前肠中只分离到兼性厌氧细菌,中肠与后肠专性厌氧细菌和兼性厌氧细菌都有分布。专性厌氧细菌Bacteroides paurosaccharolyticus和Bacteroides luti在中肠与后肠都有分布,而Cetobacterium somerae和Fusobacterium ulcerans只在后肠有发现。兼性厌氧细菌是草鱼肠道黏膜的优势菌群,其中嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila占73.7%。草鱼肠道不同部位固有厌氧微生物组成存在差异,细菌数量也明显不同,后肠中具有更高的细菌丰度和多样性。

摘要: 以黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)为实验对象,灌喂氧化鱼油、鱼油7d后,提取胃肠道黏膜总RNA,采用RNA-seq测序并做转录组分析,分析了黑色素生物合成途径关键酶(酪氨酸酶)及其相关蛋白基因、黑素体运动的3个蛋白基因、α黑素细胞刺激激素途径和WNT/β-catenin、EDN3和EDNRB、KIT及其配体KITL3个信号通路的主要蛋白基因的差异表达活性。结果显示,黄颡鱼胃肠道黏膜中存在黑色素细胞分化和发育过程、黑色素合成及其调控途径的代谢网络,通过绘制代谢网络得到了关键性酶或蛋白质的基因信息。在灌喂氧化鱼油后,控制黑色素合成途径主要基因的表达活性显著下调,可能导致黑色素合成量的不足;α-MSH激素途径主要基因差异表达上调,具备促进黑色素细胞分化和发育的调控基础;而调控黑色素细胞分化和发育的3个信号通路主要基因也有差异表达。因此,黄颡鱼受灌喂氧化鱼油的影响,黑色素细胞分化和发育过程受到较大影响,会影响到鱼体成熟的黑色素细胞的数量,同时,黑色素的生物合成量不足将导致引起黄颡鱼体色的变化。

摘要: 为深入研究胰蛋白酶在鱼类中的蛋白结构和生理功能,利用RT-PCR和RACE方法,从金鱼肝胰脏中成功克隆获得了一种全长864 bp的胰蛋白酶原cD NA序列(gfT ryp)。gfT rypc DNA包含21 bp的5′-非翻译区、114 bp的3′-非翻译区和729 bp的开放读码框,编码242个氨基酸组成的胰蛋白酶原(gf Tryp)。gf Tryp含有15个氨基酸的信号肽和5个氨基酸(LDDDK)的激活肽。氨基酸序列分析表明,gf Tryp具备胰蛋白酶原的保守结构特征,如含有催化三联体氨基酸(His-57、Asp-102和Ser-195),12个半胱氨酸,位于底物结合口袋底部Asp-189和口袋开口处的Gly-216、Gly-226等,提示其可能具有保守的蛋白消化功能。RT-PCR结果显示,gf Tryp mRNA在所检测的各个组织中均有表达,其中在肝胰脏、肠和脂肪中表达量为最高。进一步研究发现,相较于摄食前,肝胰脏gf Tryp mRNA在金鱼摄食后显著升高。在0.5和5μg/m L镉暴露处理后,肝胰脏gf Tryp mRNA显著升高(与未处理组相比,分别约为3.2和4.7倍)。随着镉浓度增加到10μg/mL后,gfT ryp mR NA表达量下降。经100μmol/L过氧化氢处理3h、6h、12h和24h后,金鱼肝胰脏gf Tryp mRNA的表达水平均显著下降,在6h达到最大效应(约为对照组的0.21倍)。研究结果证实了重金属镉和过氧化氢处理能调控胰蛋白酶原基因表达,为进一步探讨鱼类消化生理提供了新的视角。

摘要: 为揭示尼罗罗非鱼Ikaros基因结构特征及其在抗病原感染中的免疫调控机制,实验采用RT-PCR和RACE方法克隆了尼罗罗非鱼Ikaros的cDNA序列以及利用PCR和染色体步移技术克隆了Ikaros的基因组DNA序列,通过荧光定量PCR分析了Ikaros mRNA的组织分布及其对无乳链球菌感染的响应。结果表明,克隆的尼罗罗非鱼Ikaros基因组DNA为20454 bp,包括7个内含子和8个外显子,经可变剪接可形成6种不同的mRNA剪接异构体,其编码的氨基酸序列均具有Ikaros家族典型的锌指结构域且与硬骨鱼类Ikaros氨基酸序列同源性较高(70.6%—93.7%)。Ikaros基因在尼罗罗非鱼各组织中均有表达,在血液中的表达量最高,其次为胸腺、脾脏和头肾。人工感染无乳链球菌后,血液、胸腺、脾脏、头肾中Ikaros基因的相对表达量均显著上调,并在48h达到峰值,这表明Ikaros基因参与调控尼罗罗非鱼抵御无乳链球菌的免疫应答反应。研究可为进一步探索Ikaros基因在罗非鱼抗病原感染中的作用机制奠定理论基础。

摘要: 研究于2019—2021年在西藏拉鲁湿地和茶巴朗湿地使用刺网和地笼等组合渔具开展了鱼类实地调查,分析了外来鱼类物种组成、优势种和群落功能多样性,并结合已发表的文献资料,探讨了西藏湿地外来鱼类群落结构的变动趋势及影响。结果表明,共采集到外来鱼类10种,隶属于4目5科,包括鲫(Carassius auratus)、麦穗鱼(Pseudorasbora parva)、鲤(Cyprinus carpio)、丁鱥(Tinca tinca)、棒花鱼(Abbottina rivularis)、泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)、大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)、鲇(Silurus asotus)、小黄?(Micropercops swinhonis)和中华青鳉(Oryzias sinensis)。外来鱼类的个体数和重量分别占本地种和外来种总渔获物的94.86%和70.71%,其中主要组成为鲫和麦穗鱼等小型鱼类。相对重要性指数(IRI)表明鲫、麦穗鱼、大鳞副泥鳅和鲤4种为拉鲁湿地外来鱼类优势物种,鲫、麦穗鱼和小黄?3种为茶巴朗湿地的优势物种。在拉鲁湿地和茶巴朗湿地鱼类种类组成、个体数量和生物量中外来鱼类均已占据优势地位,且外来鱼类的群落功能多样性(FD)亦高于土著鱼类。结合历史数据,西藏拉鲁湿地和茶巴朗湿地已记录外来鱼类12种,其中具高度入侵风险物种达6种,外来鱼类物种数从2000年左右的2种增加到现在的10种,且丁鱥和中华青鳉分别在西藏自然水体中和茶巴朗湿地中首次被发现。此外,两个湿地12种外来鱼类均为拉萨市场中的常见经济鱼类及携带鱼类,是由于放生而进入湿地自然水体中,且鲫、大鳞副泥鳅和麦穗鱼等均已建立自然种群。因此,加强对放生的科学管理及开展外来鱼类的长期监测,是防范外来鱼类入侵及高原湿地生物多样性保护的迫切任务。