摘要: 为确定大黄鱼(Larimichthys croceus)对饲料硒的需求量,以Na2Se O3为饲料硒源,配制6种饲料,硒的添加水平分别为0(对照组)、0.05、0.2、0.4、0.6和0.9 mg/kg,实测值分别为0.08、0.16、0.27、0.44、0.66和0.96 mg/kg。在海水浮式网箱中养殖初始体重为(9.14±0.09)g的大黄鱼幼鱼10周,结果表明增重率(WG)、全鱼和骨骼中的硒含量随着饲料硒含量的升高而显著升高(P<0.05)。当饲料硒含量分别超过0.27、0.66、0.66 mg/kg时,这些指标的变化趋于平稳。饲料硒含量对存活率(SR)、饲料效率(FE)、体组成、肝体比(HSI)、脏体比(VSI)和肥满度(CF)都没有显著影响(P>0.05)。在血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化力(T-AOC)随着饲料硒含量的升高呈现先升高后稳定的趋势(P<0.05),并分别在饲料硒含量为0.44、0.44、0.16 mg/kg时达到最大值。肝脏中GPX活性、SOD活性、T-AOC、过氧化氢酶(CAT)活性和谷胱甘肽还原酶(GR)活性与血清中相应酶的活性有相同的趋势。在肝脏中谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性随着饲料硒含量的升高呈现先降低后升高的趋势(P<0.05),并在饲料硒含量最高(0.96 mg/kg)时其活力取得最大值。以WG为评价指标,得出大黄鱼幼鱼对饲料中硒的需求量为0.178 mg/kg。以全鱼和骨骼中硒含量、肝脏GPX活性为评价指标,得出大黄鱼幼鱼对饲料中硒的最小需求量分别为0.575、0.387和0.440 mg/kg。

摘要: 生长激素在渔业生产中具有重要的应用价值,通过制备黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)同源重组生长激素并用于促生长实验,从而为建立鱼苗快速培育方法提供理论依据。根据已知黄颡鱼生长激素(Pf GH)基因c DNA序列,利用IPTG诱导和SDS-PAGE分析方法,Western印迹表明在IPTG终浓度1.0 mmol/L、温度17℃和培养时间14h的条件下,黄颡鱼生长激素基因在大肠杆菌中大量表达,获得重组生长激素蛋白。然后,随机选取黄颡鱼分为4组放入室内水族箱中进行养殖,每箱35尾,体质量为(0.85±0.01)g,每组设3个平行,水体循环净化。用制备的重组生长激素浓度分别为0、1、5和10 mg/L对黄颡鱼进行浸泡处理,每周一次,0为对照组。在养殖4周后,对各组增重率和特定生长率进行比较,结果表明1 mg/L组增重率和特定生长率分别比对照组提高了29.67%(P<0.05)和11.90%(P<0.05),5 mg/L组增重率和特定生长率分别比对照组提高了21.32%(P<0.05)和8.83%(P<0.05),各组间体成分等均无明显差异。停用生长激素4周后,各组黄颡鱼的生长性能、体成分等均无显著差异。研究表明通过原核表达可以获得黄颡鱼重组生长激素,用于促进鱼苗生长培育的最佳浸泡浓度为1 mg/L。

摘要: 为研究内分泌干扰物己烯雌酚(DES)对鱼类精巢发育和配子发生的影响,研究用DES(0.1、1和10μg/L,暴露20d)对内分泌干扰研究的经典模式动物——斑马鱼(Danio rerio)雄性成鱼进行了处理。组织学研究结果表明,DES严重影响斑马鱼精子发生。同时,研究克隆了斑马鱼与生殖细胞发育和减数分裂相关的vasa、dmc1的部分c DNA,对其组织和细胞表达模式进行了研究。结果表明,vasa仅表达于精巢的精原细胞、初级精母细胞和卵巢不同时期的生殖细胞;而dmc1则表达于精巢精母细胞和卵巢卵母细胞发育早期。半定量PCR结果表明,DES处理后vasa的表达没有明显变化;而dmc1的表达则被明显抑制,且呈时间依赖性和剂量依赖性效应;而转录因子dmrt1和雄激素合成关键酶基因P450 11β的表达也被显著抑制。因此本研究推测,DES可能通过抑制dmrt1和P450 11β的表达诱导了斑马鱼生殖细胞凋亡;并通过抑制dmc1的表达阻碍了减数分裂。

摘要: 利用斑马鱼作为体内模型,研究旨在提高斑马鱼原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)中同源重组(Homologous recombination,HR)的效率。首先,将UAS:m RFP-nos1载体显微注射到Tg(kop:Kal TA4)转基因胚胎中标记转基因PGCs,结果表明筛选PGCs特异表达m RFP的胚胎能够相对提高转基因的生殖系传递效率。随后建立了PGCs中HR效率的评估体系,并且证明抑制DNA ligase IV(Lig4)和Xrcc6(曾用名Ku70)的活性不但在全胚胎水平,而且在PGCs水平都能够显著提高HR的效率。研究表明Tg(kop:Kal TA4)转基因品系是开展HR介导的基因打靶的一个有效平台。

摘要: 利用线粒体DNA的D-Loop区序列,对来自长江水系(邗江、吴江、九江、石首、木洞和万州)、珠江水系(肇庆)和黑龙江水系(嫩江)的8个草鱼野生群体开展了遗传变异分析。在424尾鱼中检测到34个变异位点,34个单倍型,单倍型多样性介于0.474—0.708。群体间Kimura双参数遗传距离介于0.0020—0.0049。长江下游3个群体间遗传距离最近,遗传分化不显著(P>0.05);肇庆群体与长江上游3个群体遗传距离较近,与九江群体遗传分化不显著(P>0.05);嫩江群体与长江上游2个群体遗传距离较近,与万州群体遗传分化不显著(P>0.05)。遗传距离与地理距离存在极显著正相关(R=0.61,P<0.01)。分子方差分析显示,不同流域间遗传变异占总变异26.24%,差异极显著(P<0.01)。34个单倍型分为2个分支,分化极显著(FST=0.644,P<0.01),推测分化时间为第四纪更新世纪晚期。