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  • 陈桢玥; 徐晓雷; 吴立群; 陆国平
    实验动物与比较医学 2010年第30卷第6期 DOI:
    关键词: 斑马鱼;;breakdance突变;;脊柱弯曲度;;挑战性游泳耐力试验;;心电图
    摘要: 目的 有心律失常表型的Breakdance突变斑马鱼(bretb218)已被证实是人类同源基因kcnh2的纯合子突变体。它的杂合子tb218+/-虽没有明显的心律失常表型,却表现出早衰的态势。本研究旨在了解该杂合子斑马鱼的早衰表型,建立衰老研究的脊椎动物模型,并为进一步探索kcnh2基因突变与早衰的关系奠定基础。方法 生存曲线记录斑马鱼的预期寿命;用脊柱弯曲度和脊柱弯曲比值2个参数评估斑马鱼形态学的改变;挑战性游泳耐力试验评估斑马鱼的运动能力;心电图检测电生理活动的改变。结果 杂合子tb218+/-斑马鱼的生存率从20月龄起急剧下降,至40月龄时仅为8%,远低于野生型斑马鱼的80%; tb218+/-斑马鱼与野生型斑马鱼的脊柱弯曲度差异从8月龄起开始显现,20月龄后更明显,32月龄tb218+/-斑马鱼的脊柱弯曲度与60月龄野生型斑马鱼相当;挑战性游泳耐力试验发现, 8月龄和20月龄tb218+/-斑马鱼的运动能力与野生型相当,但在32月龄时,其运动能力较同龄野生型斑马鱼降低56.44%;心电图检测发现, tb218+/-斑马鱼的心率随年龄增长而下降的幅度较野生型大,QTc间期在各月龄段均略长于野生型,尤其在8月龄时,但并未发现随月龄增长而延长的趋势。结论 杂合子tb218+/-斑马鱼呈现早衰态势,包括生存期缩短,脊柱弯曲早现,运动能力下降,心率随月龄增长的下降幅度增大及部分月龄段的QTc间期明显延长;这些表型可能与kcnh2基因的突变相关;该鱼系有望成为早衰研究的颇有价值的脊椎动物模型。

  • 初晓红; 濮俊毅; 姚一琳; 陈秋生; 胡建华; 高诚
    实验动物与比较医学 2010年第30卷第3期 DOI:
    关键词: 斑马鱼;;肝脏;;胆管系统
    摘要: 目的 系统地观察斑马鱼肝脏胆管系统的组织结构和超微结构。方法 采用酶组织化学、免疫组织化学以及透射电镜技术。结果 斑马鱼肝脏胆管系统在肝实质内呈树枝状分布。胆管系统由细胞内和细胞间毛细胆管、前胆小管,胆小管和胆管构成。细胞内毛细胆管起源于细胞核附近,并且存在向细胞表面迁移。在肝细胞之间,有一胞质少、细胞核呈狭长型的明显不同于肝细胞的细胞,此细胞为BP细胞,BP细胞通过紧密连接与肝细胞进行细胞间的通讯活动。前胆小管由BP细胞和肝细胞共同构成管道的管壁。胆小管管壁通常由2~4个上皮细胞构成,胆小管上皮细胞与肝细胞之间直接接触,并没有基底膜使之相隔。本实验通过透射电镜还观察到由一个上皮细胞质膜突起再内折形成的胆小管,并通过一个纵向的连接复合体密封管道。胆管的管壁上皮细胞由立方上皮细胞或柱状上皮细胞构成,胆管外有结缔组织环绕。此外,淋巴细胞也参与了胆管管壁上皮细胞的构成,表明胆管存在黏膜免疫的应答。前胆小管和胆小管是连接毛细胆管和胆管的部分,因此,本实验认为前胆小管和胆小管相当于哺乳动物的黑林管。Mg<sup>2+</sup>-ATP酶反应显示,胆管系统被染成棕黑色,交织成网。通过免疫组织化学的方法发现胆管系统的上皮细胞的胞体以及起源于这些细胞的胆汁管道也呈阳性。结论 斑马鱼胆管系统不仅与哺乳类和鸟类有差异,而且与其他硬骨鱼类也不完全相同。

  • 初晓红; 濮俊毅; 包慧君; 胡建华; 高诚; 姚一琳; 徐春生; 覃君慧; 陈秋生
    实验动物与比较医学 2010年第30卷第1期 DOI:
    关键词: 肝脏;;显微结构;;超微结构;;斑马鱼
    摘要: 目的 观察与分析斑马鱼肝脏的显微和超微结构。方法 光镜和透射电镜观察组织切片。结果 斑马鱼肝脏没有典型的门管区,静脉和胆管随机地分布在肝实质中,很难观察到动脉。肝板由两层并列的肝细胞排列成双层板状结构,以中央静脉为中心呈放射状分布,在肝板(肝细胞索)之间是血窦,肝细胞索呈弯曲、分支和吻合状态。肝细胞核大而圆,核仁分区明显,核孔数目多,且密度大,呈现细胞代谢活跃旺盛的形态。胞质中粗面内质网(RER)既有管状结构也有扁平囊状结构,扁平囊状结构的RER呈区域化的层层排列,可达二十余层。线粒体成群分布,并且与RER紧密接触,为RER合成蛋白质提供能量。电镜观察发现当细胞质富含线粒体、RER、核糖体时,核孔的数目多,细胞质内出现一定量的溶酶体,糖原在细胞质内有少量的聚集。当细胞质内有大量的糖原分布时,则核孔的数目较少,且细胞器也较少。胆管系统在肝脏内呈树枝状分布,胆小管包括细胞内胆小管和细胞间胆小管,细胞内胆小管腔内的微绒毛明显多于细胞间胆小管。本文也对内皮细胞、贮脂细胞、红细胞和淋巴细胞进行了描述。并对斑马鱼肝脏的结构与其他硬骨鱼类进行了比较。结论 斑马鱼肝细胞排列方式与其他硬骨鱼类有一定差异,也与前人的报道并不完全相同,这种差异和不同与动物种类和研究方法有一定关系。肝细胞的超微结构特征,在形态学角度证明了其活跃的合成和代谢功能。

  • 胡晓晴; 李卫华; 金泰廙; 丁训诚
    实验动物与比较医学 2010年第30卷第1期 DOI:
    关键词: 斑马鱼;;镉;;发育毒性;;机制
    摘要: 镉是一种广泛存在于生产和生活环境中的非必需重金属元素。镉染毒动物可出现多器官损害作用。本文综述了镉对斑马鱼胚胎体轴和肌节、血管、脑部及神经系统的发育的影响及可能机制,为深入研究镉对其他高等脊椎动物生长发育的影响提供了参考依据。

  • 田芳; 王玉柱; 夏敏杰; 孙冰; 丁训城; 李卫华; 许慧慧; 胡晶莹
    实验动物与比较医学 2017年第37卷第6期 DOI:
    关键词: 斑马鱼;;内脏组织;;连续切片;;HE染色
    摘要: 目的探索并优化适合于斑马鱼成鱼内脏组织的病理学检查技术。方法将斑马鱼整条固定于Dietrich's固定液后,分段切开,取包含内脏组织的胸腹段,剥除斑马鱼鱼皮,梯度乙醇脱水时间优选为30 min、二甲苯透明、石蜡包埋、沿斑马鱼体轴纵向连续切片、HE染色后用温水冲洗切片进行颜色反蓝,正置显微镜下观察效果。结果经过反复的条件摸索和优化,光学显微镜下观察心脏、肝脏、脾脏、胆囊、肾脏、胰腺、消化道、精巢和卵巢等组织切片和染色的效果,可见斑马鱼组织均切片完整,无折叠或断裂,各脏器的解剖学与组织细胞学结构清晰,易于辨认,细胞核与细胞质染色分明。结论优化后的斑马鱼成鱼内脏组织病理学方法效果较为理想,可获得高质量的内脏组织学标本。