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  • 林金杏; 魏晓锋; 初晓红; 胡建华; 高诚; 陈秋生
    实验动物与比较医学 2012年第32卷第5期 DOI:
    关键词: 斑马鱼;;肝脏;;三维结构;;重建;;虚拟系统
    摘要: 目的 建立斑马鱼肝脏三维结构虚拟系统,为斑马鱼作为模式生物的应用研究奠定形态学基础。方法 通过制作大量的组织切片,采用光镜及电镜方法观察成年斑马鱼肝脏的组织构造,并收集斑马鱼肝脏形态结构图像,然后运用计算机图像处理软件对斑马鱼肝脏的外形进行三维重建。结果 建立了斑马鱼肝脏三维结构虚拟系统软件。结论 初步实现斑马鱼肝脏三维结构的重建。

  • 张评浒; 陶元清; 江振洲; 王忠东; 范薇; 张陆勇
    实验动物与比较医学 2012年第32卷第5期 DOI:
    关键词: 喜马拉雅旱獭;;线粒体;;细胞色素b基因;;系统进化
    摘要: 目的 为了探讨我国青藏高原喜马拉雅旱獭是否可以作为核苷类药物线粒体毒性评价替代模型,本研究从旱獭的系统进化关系对喜马拉雅旱獭在旱獭属中的系统分类地位进行了比较分析。方法 以线粒体细胞色素b(Cytb)基因作为遗传进化分析的分子标记,对我国青藏高原喜马拉雅旱獭的Cytb进行了序列测定,并结合已有的旱獭Cytb基因序列对所有旱獭属的种群进行了系统进化分析。结果 喜马拉雅旱獭Cytb基因长1 140 bp,碱基A、T、C、G的平均含量分别为33.2%、25.4%、28.8%、12.6%。Cytb基因表现出很强的碱基组成偏向性,即在A、T、G、C四种碱基中,G的含量明显低于其他三种碱基的含量。旱獭的Cytb基因的氨基酸使用频率具有一定的偏向性,亮氨酸(Leu)和异亮氨酸(Ile)的使用频率最高,分别为15.69%和11.87%,而半胱氨酸(Cys)使用频率最低为1.08%。与其它旱獭相比,喜马拉雅异亮氨酸(Ile)和半胱氨酸(Cys)的使用频率分别为1.32%和11.87%。系统进化分析结果表明我国喜马拉雅旱獭(M.himalyana)、蒙古旱獭(M.sibirica)、灰旱獭(M.caudata)和红旱獭(M.bobak)与北美旱獭(Woodchuck)属于同一进化组群(置信度为100)。结论 喜马拉雅旱獭与美洲旱獭具有较近的亲缘进化关系,属同一组群进化而来,这为寻找新型的核苷类药物线粒体毒性评价替代实验动物模型提供了理论依据。

  • 王忠东
    实验动物与比较医学 2012年第32卷第4期 DOI:
    关键词: 喜马拉雅旱獭;;动物实验笼具;;设计与应用
    摘要: 目的 通过开展喜马拉雅旱獭动物实验,探讨建立适宜的喜马拉雅旱獭饲养和动物实验用笼具。方法 在旱獭饲养和进行动物实验的工作中,不断探索、改进,设计了不锈钢旱獭专用饲养和动物实验笼具。结果 设计了较为科学的适合喜马拉雅旱獭饲养和动物实验用的笼具,解决了实验用旱獭的饲养管理和动物实验问题,为旱獭动物模型建立和动物实验工作提供了动物实验笼具。结论 设计的喜马拉雅旱獭实验笼具已经得到有效应用。

  • 郭晓萍; 陈时锦; 兰干球; 蒋钦杨; 郭亚芬
    实验动物与比较医学 2012年第32卷第1期 DOI:
    关键词: 广西巴马小型猪;;ɑ-1,3半乳糖转移酶;;真核表达载体;;表达鉴定
    摘要: 目的 通过RT-PCR扩增巴马小型猪GGTA1基因,分析其序列的结构特点并构建真核表达载体,为生产GGTA1基因沉默的广西巴马小型猪奠定基础。方法 根据NCBI上发布的猪ɑ-1,3半乳糖转移酶基因cDNA序列(AF221508),设计合成一对含有HindⅢ和Bam HI酶切位点的特异性引物,以广西巴马小型猪肝脏组织总RNA为模板进行RT-PCR,所得目的片段经纯化、克隆、鉴定和测序;将目的基因与pEGFP-N1进行双酶切后连接构建真核表达载体pEGFP-GGTA1,通过测序,双酶切鉴定。结果 所克隆的广西巴马小型猪GGTA1基因存在缺失第五外显子(81-116)的GGTA1序列,序列全长1 080 bp和未缺失第五外显子的GGTA1序列,全序列为1 116 bp。构建两个表达载体(缺失第五外显子pEGFP-GGTA1-1、未缺失第五外显子pEGFP-GGTA1-2)。结论 广西巴马小型猪GGTA1基因存在第五外显子缺失的现象,通过对GGTA1基因克隆序列进行分析以及构建两个真核表达载体,为后面在猪源PK-15细胞中对其进行表达鉴定以及巴马小型猪ɑ-1,3半乳糖转移酶基因的沉默实验奠定基础。

  • 乔坤; 刘媛媛; 李玉华; 王玉柱; 丁训诚; 李卫华; 李润生
    实验动物与比较医学 2012年第32卷第1期 DOI:
    关键词: 斑马鱼;;双酚A;;DNA甲基化;;组蛋白;;表观遗传学
    摘要: 目的 从表观遗传学角度探讨双酚A(BPA)影响斑马鱼精子成熟与胚胎发育的机理。方法 将20 dpf斑马鱼幼鱼,暴露在乙醇(溶剂)对照、BPA0.5 mg/L、BPA1.5 mg/L至100 dph。选取各处理组雄鱼,荧光定量PCR检测性腺DNA甲基转移酶(DNMTs)表达量,免疫组化检测性腺全基因组甲基化水平, Western-blot、免疫组化检测性腺组蛋白3赖氨酸三甲基化(H3K9me3、H3K4me3、H3K27me3、H3K36me3)表达水平。各处理组雄鱼与正常雌鱼交配,观察胚胎期相关指标。结果BPA处理组Dnmt1、Dnmt6、Dnmt7、Dnmt8 mRNA表达量明显升高,与对照组比较差别均具有统计学意义(P<0.05)。BPA1.5 mg/L组中成熟精子DNA甲基化水平与H3K9me3水平均明显升高。与正常雌鱼交配, BPA 1.5 mg/组产卵量仅为对照组的63%±2.49%, 12 h胚胎死亡率与对照组相比增加202.53%±6.21%, 72 h胚胎畸形率与对照组相比增加399.08%±12.16%,差别均具有统计学意义(P<0.05)。结论 双酚A诱导斑马鱼成熟精子DNA甲基化程度和组蛋白H3K9me3表达水平增加,这些变化可能是BPA处理组后代胚胎发育异常的重要基础。