摘要: 以海洋青鳉(Oryzias melastigma)为试验动物,分析了铜和镉两种重金属离子胁迫对海洋青鳉摄食行为特征的影响,包括摄食响应时间、摄食量、摄食成功率和摄食效率等参数。结果显示,随着Cu2+浓度的升高,开始时,海洋青鳉的摄食量有所升高,当Cu2+浓度达到0.087 mg/L时有最大的摄食量和最短的摄食响应时间。随后,摄食量出现下降,在0.174 mg/L时达到最低。低浓度的Cu2+还能提高海洋青鳉的摄食成功率和摄食效率,而Cu2+的高浓度和长时间暴露则降低海洋青鳉的摄食成功率和摄食效率。Cd2+对海洋青鳉的摄食行为具有明显的抑制效应, Cd2+抑制海洋青鳉摄食的最低可见效应浓度为0.65 mg/L,摄食量、摄食成功率和摄食效率均随着Cd2+浓度的升高而降低。此外,在Cu2+和Cd2+胁迫下,对食物的响应时间有性别差异,雌性显著短于雄性,还存在群体显著短于个体等现象。

摘要: 通过研究海水中不同浓度重金属胁迫对海洋青鳉(Oryzias melastigma)生理生化的影响,探讨与分析各指标间的相互关系,为海洋重金属污染的生物监测提供参考。按海水水质标准分别设定铜(Cu)和镉(Cd)离子各3个浓度梯度,测定海洋青鳉中乳酸(LA)、乳酸脱氢酶(LDH)、睾酮(T)、促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH))及产卵量的动态变化。海洋青鳉中的LA含量随铜胁迫时间的延长而显著降低,随镉胁迫浓度的增加而升高; LDH活性在铜胁迫下变化不大,而随镉胁迫时间的延长略有上升; T含量在短期铜胁迫下有所升高,但随胁迫时间的延长呈显著下降趋势,却随镉胁迫浓度升高及胁迫时间延长而上升; FSH与LH含量随铜胁迫浓度增加呈显著下降,随镉胁迫浓度增加呈先降后升趋势,两者的含量变化与T的动态密切相关。与此同时,随铜胁迫时间的延长和胁迫浓度的增加,青鳉的产卵量也呈显著下降趋势。综合表明,铜或镉胁迫均能显著影响雌性青鳉的LA含量,增加能量消耗,进而影响性激素水平,最终影响到产卵量,但两类离子的影响存在较大的差异性。因此,一定浓度的铜或镉胁迫会导致海洋青鳉鱼体内生理生化的变化,且存在两性差异性,雌鱼对铜或镉胁迫的响应敏感强,可选择雌鱼开展相关污染监测。

摘要: 在哺乳动物细胞系中转基因的效率相对较高而在鱼类细胞系中相对较低,为了获得鱼类高效转基因细胞系,我们从模式鱼类青鳉(Oryzias latipes)中分离和构建了肌肉细胞系OLM。该细胞系类似于纤维细胞,在28℃DMEM和10%的胚胎牛血清中培养了超过88代。通过染色体分析,它属于两倍体并含有48条染色体。在脂质体介导下,报告基因的转染效率可以达到40%,在测试的其他鱼类细胞中转染效率最高。此外还构建了稳定转染转基因或者非编码RNA的细胞系。OLM细胞对常见的病毒SVCV、GCRV、SGIV等不敏感。综上所述,研究在青鳉中建立了一种能高效转染的肌肉细胞系,它适用于鱼类瞬时和稳定的转基因研究。

摘要: 为了探究黑色素合成相关基因酪氨酸酶(Tyrosinase, tyr)和溶质载体24家族成员5(Solute carrier family24, member 5, slc24a5)在西里伯斯青鳉(Oryzias celebensis)中的表达特征,研究采用RACEs(Rapid Amplication of cDNA Ends)技术从西里伯斯青鳉精巢中克隆了tyr(Octyr)和slc24a5(Ocslc24a5)的全长c DNA(Complementary DNA)。Octyr的cDNA全长为2249 bp,开放阅读框长1635 bp,编码545个氨基酸; Ocslc24a5的cDNA全长为2065 bp,开放阅读框长1542 bp,编码514个氨基酸。氨基酸多重比对和系统发育树分析发现, Octyr和Ocslc24a5氨基酸序列非常保守,均与日本青鳉同源性较高。通过PCR克隆了Octyr和Ocslc24a5的基因组DNA序列,结果发现, Octyr开放阅读框跨越5个外显子, Ocslc24a5开放阅读框跨越8个外显子。荧光定量PCR(qRT-PCR)分析了Octyr和Ocslc24a5在不同组织和不同胚胎发育时期的相对表达水平,结果显示, Octyr和Ocslc24a5在脑、眼、肝、肾、肠、皮肤、卵巢和精巢中均有表达,且均在精巢中表达量最高,其次是眼和脑; Octyr和Ocslc24a5在胚胎发育不同时期均有表达,在胚胎发育到第7天时表达水平均达到最高。利用0.25 mmol/L苯基硫脲(PTU)抑制胚胎黑色素沉积后进行整体原位杂交(WISH)发现, Octyr和Ocslc24a5的表达模式相似,在囊胚期, Octyr和Ocslc24a5在所有胚胎细胞中均有表达;在神经胚期, Octyr和Ocslc24a5主要在背部和卵黄膜中表达;在体节期, Octyr和Ocslc24a5在眼睛、脑和背侧皮肤中表达。以上研究结果说明Octyr和Ocslc24a5可能参与西里伯斯青鳉黑色素的合成,研究为深入了解西里伯斯青鳉黑色素形成的分子机制奠定基础。

摘要: 为评价海洋溢油应急处置中所使用的凝油剂的环境安全性,以发光细菌(Acinetobacter sp.Tox2和Acinetobacter sp.Rec A)和海水青鳉(Oryzias melastigma)幼鱼为受试生物,对10种凝油剂的急性毒性和遗传毒性进行检测.结果显示,采用发光细菌法检测到FOA、GMN-01等两种凝油剂具有一定水平的急性毒性,其HgCl2当量浓度分别为0.067mg/L、0.084 mg/L;而NORSOREX凝油剂具有一定水平的遗传毒性,其丝裂霉素C(MMC)当量浓度达到0.307 mg/L.然而,在鱼类暴露实验中并没有检测到上述样品明显的急性毒性或遗传毒性.本研究表明,所选取的10种凝油剂在96 h内对高等生物(鱼类)均没有明显的急性毒性或遗传毒性,而发光细菌法在凝油剂生物毒性检测中的灵敏度更高;本研究结果可为凝油剂用于处理实际溢油污染的环境安全性指标提供参考.